附件：總膽固醇測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2019年第74號）.doc

總膽固醇測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對總膽固醇（Total cholesterol，TC）測定試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對總膽固醇測定試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則所指的總膽固醇測定試劑是指利用CHOD-PAP法對人血清、血漿等樣本中總膽固醇含量進(jìn)行體外定量測定的試劑。

目前，總膽固醇測定已有完整的參考系統(tǒng)：其決定性方法為同位素稀釋質(zhì)譜法，參考方法為正己烷抽提L-B反應(yīng)顯色法（ALBK法）或色譜法，常規(guī)測定方法為酶法。酶法主要包括膽固醇氧化酶法和膽固醇脫氫酶法，其中膽固醇氧化酶-PAP法是目前應(yīng)用最為廣泛的常規(guī)測定方法。依據(jù)YY/T 1227-2014《臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）命名》的要求，將膽固醇氧化酶-PAP法規(guī)范表述為CHOD-PAP法。本指導(dǎo)原則適用于采用CHOD-PAP法測定的試劑，不適用于脫氫酶法和干化學(xué)法測定的試劑，但適用處可參照執(zhí)行。

依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）、《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號），總膽固醇測定試劑屬于酯類檢測試劑，管理類別為Ⅱ類，分類編碼為6840。本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行產(chǎn)品注冊和相關(guān)許可事項(xiàng)變更的產(chǎn)品。

二、注冊申報資料要求

（一）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性說明、產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價以及同類產(chǎn)品上市情況等內(nèi)容，應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的相關(guān)要求。

1.產(chǎn)品預(yù)期用途

總膽固醇是指血液中各脂蛋白所含膽固醇之總和，分為酯化型膽固醇（又稱膽固醇酯，CE）和游離型膽固醇（FC），其中CE占60%~70%，F(xiàn)C占30%~40%，健康個體之間兩種類型的比例保持穩(wěn)定。膽固醇是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸以及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料，也是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分，其濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。

定量測定人體樣本中總膽固醇含量，臨床主要用于心血管疾病的危險分析，高TC血癥是冠心病的主要危險因素之一。病理狀態(tài)下，高TC有原發(fā)與繼發(fā)兩類，原發(fā)的如家族性高膽固醇血癥（低密度脂蛋白受體缺陷）、家族性apoB缺陷癥、多源性高TC、混合性高脂蛋白血癥。繼發(fā)的多見于腎病綜合征、甲狀腺功能減退、糖尿病、妊娠等。低TC血癥也有原發(fā)性的與繼發(fā)的，前者如家族性的無或低β脂蛋白血癥，后者如甲亢、營養(yǎng)不良、慢性消耗性疾病等。

2.產(chǎn)品描述

應(yīng)闡述產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理、主要原材料的來源及制備方法、主要生產(chǎn)工藝過程，注冊申請包含質(zhì)控品、校準(zhǔn)品時，應(yīng)明確制備方法及定值（溯源）情況。

3.有關(guān)生物安全性方面的說明

如試劑中主要原材料由各種動物、病原體、人源組織和體液等生物材料經(jīng)處理或添加某些物質(zhì)制備而成，為保證產(chǎn)品在運(yùn)輸、使用過程中對使用者和環(huán)境的安全，研究者應(yīng)提供上述原材料有關(guān)生物安全性的說明或證明文件。

4.有關(guān)產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價。

5.其他

包括同類產(chǎn)品在國內(nèi)外批準(zhǔn)上市的情況，相關(guān)產(chǎn)品所采用的技術(shù)方法及臨床應(yīng)用情況，申請注冊產(chǎn)品與國內(nèi)外同類產(chǎn)品的異同等。

（二）主要原材料的研究資料（如需提供）

包括主要反應(yīng)成分、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品等的選擇、制備及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究資料；質(zhì)控品應(yīng)提供詳細(xì)的定值試驗(yàn)資料，校準(zhǔn)品應(yīng)提供詳細(xì)的溯源性文件，包括具體溯源鏈、實(shí)驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。

（三）主要生產(chǎn)工藝和反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

1.主要生產(chǎn)工藝介紹，可以圖表方式表示；

2.確定反應(yīng)體系（樣本、試劑等）最適條件的研究資料等。

（四）分析性能評估資料

申請人應(yīng)當(dāng)提交三批產(chǎn)品研制階段對試劑進(jìn)行的所有性能驗(yàn)證研究資料，對于每項(xiàng)分析性能的評價應(yīng)包括具體研究目的、實(shí)驗(yàn)設(shè)計、研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法等詳細(xì)資料。有關(guān)分析性能驗(yàn)證的背景信息也應(yīng)在申報資料中體現(xiàn)，包括實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)、適用儀器、試劑規(guī)格、批號、臨床樣本來源等。

對于總膽固醇測定試劑，分析性能應(yīng)包括試劑空白吸光度、線性范圍、準(zhǔn)確度、分析靈敏度、精密度、分析特異性、其他影響檢測的因素等。

1.試劑空白吸光度

用指定空白樣品（如純化水、生理鹽水等）加入工作試劑作為樣品，在試劑規(guī)定主波長下測試吸光度值，重復(fù)兩次，均值即為空白吸光度。雙試劑型試劑應(yīng)不大于0.080，單試劑型試劑應(yīng)不大于0.100。

2.線性范圍

2.1線性范圍的建立

申請人建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實(shí)際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度達(dá)到預(yù)期測定上限的混合人源樣本，制備低濃度樣本時應(yīng)充分考慮稀釋對樣本基質(zhì)的影響。建立線性范圍時，需在預(yù)期測定范圍內(nèi)選擇7～11個濃度水平。例如，將預(yù)期測定范圍加寬至130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點(diǎn)（最終不得少于7個水平）直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，可發(fā)現(xiàn)最寬的線性范圍。

2.2線性范圍的驗(yàn)證

2.2.1用接近線性范圍上限的高濃度樣本和接近線性范圍下限的低濃度樣本，混合成至少5個稀釋濃度（xi）。分別測試樣本，每個稀釋濃度測試3次，求出每個稀釋濃度測定結(jié)果的均值（yi）。以稀釋濃度（xi）為自變量，以測定結(jié)果均值（yi）為因變量求出線性回歸方程。計算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（r），r≥0.9900。

2.2.2用2.2.1方法中稀釋濃度（xi）代入求出線性回歸方程，計算yi的估計值及yi與估計值的絕對偏差或相對偏差，應(yīng)符合申請人給定值。

3.準(zhǔn)確度

測試可用于評價常規(guī)方法的國家/國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)3次，測試結(jié)果記為（xi），按公式（1）分別計算相對偏差（B%），如果3次結(jié)果都在±10%范圍內(nèi)，即判為合格。如果大于等于2次的結(jié)果不符合，即判為不合格。如果有1次結(jié)果不符合，則應(yīng)重新連續(xù)測試20次，并分別按照公式（1）計算相對偏差（B%），如果大于等于19次測試的結(jié)果都在±10%范圍內(nèi)，即判為合格。

B%＝|xi－T|／T×100%………………………………（1）

式中：

xi為測試結(jié)果；

T為國家/國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)示值。

4.分析靈敏度

測試給定濃度的被測物時，在規(guī)定參數(shù)下所得的吸光度差值（ΔA）應(yīng)符合申請人給定的范圍。

5.精密度

5.1批內(nèi)精密度

重復(fù)測試不同濃度（如高、中、低）的質(zhì)控品或樣本10次，所得結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應(yīng)不大于4.0%。

5.2批間差

選取3個不同批次的試劑，測試不同濃度（如高、中、低）的質(zhì)控品或樣本，每個批號測定3次，批間相對極差（R）應(yīng)不大于6.0%。

6.分析特異性

應(yīng)明確已知干擾因素對測定結(jié)果的影響：對膽紅素、甘油三酯、血紅蛋白、抗壞血酸等干擾物質(zhì)分別進(jìn)行驗(yàn)證。說明樣本的制備方法及實(shí)驗(yàn)的評價標(biāo)準(zhǔn)，確定干擾物質(zhì)的接受標(biāo)準(zhǔn)。

7.校準(zhǔn)品溯源及質(zhì)控品定值（如適用）

校準(zhǔn)品應(yīng)提供詳細(xì)的量值溯源資料，包括賦值試驗(yàn)資料和溯源性文件等；質(zhì)控品應(yīng)提供詳細(xì)的定值資料。應(yīng)參照GB/T 21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品賦值及不確定度計算記錄，提供質(zhì)控品在所有適用機(jī)型上的定值及其靶值范圍確定的記錄。

8.其他需注意問題

對于適用多個機(jī)型的產(chǎn)品，注冊申請時應(yīng)提供如產(chǎn)品說明書【適用機(jī)型】項(xiàng)中所列的所有型號儀器的性能評估資料。

注冊申請中包含不同的包裝規(guī)格，需要對不同包裝規(guī)格之間的差異進(jìn)行分析或驗(yàn)證，如不同包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差異，需要提交采用每個包裝規(guī)格產(chǎn)品的分析性能評估。如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細(xì)說明，具體說明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。

（五）參考區(qū)間確定資料

應(yīng)明確研究采用的樣本來源、健康個體定義、詳細(xì)的試驗(yàn)資料、統(tǒng)計方法等，參考區(qū)間可參考文獻(xiàn)資料，但應(yīng)當(dāng)對至少120例的健康個體進(jìn)行驗(yàn)證。

產(chǎn)品說明書【參考區(qū)間】的相應(yīng)描述應(yīng)與研究結(jié)論保持一致。

（六）穩(wěn)定性研究資料

1.穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。

2.試劑的穩(wěn)定性包括實(shí)時穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶/復(fù)溶穩(wěn)定性（如適用）等，申請人應(yīng)至少提供3個生產(chǎn)批次的實(shí)時穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶/復(fù)溶穩(wěn)定性（如適用）等研究資料，包括研究目的、評價標(biāo)準(zhǔn)、研究方法和研究結(jié)論等。

3.適用樣本的穩(wěn)定性主要包括室溫保存、冷藏和/或冷凍條件下的有效期驗(yàn)證，在合理溫度范圍內(nèi)選擇溫度點(diǎn)，間隔一定時間段對儲存樣本進(jìn)行性能的分析驗(yàn)證，從而確認(rèn)樣本的效期穩(wěn)定性，也可以通過相關(guān)文獻(xiàn)資料來證明適用樣本的穩(wěn)定性。適用冷凍保存的樣本應(yīng)對凍融次數(shù)進(jìn)行評價。

試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)分別在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項(xiàng)中進(jìn)行詳細(xì)說明。

（七）臨床評價資料

此項(xiàng)目已經(jīng)列入《關(guān)于新修訂免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)醫(yī)療器械目錄的通告》（國家藥品監(jiān)督管理局通告2018年第94號）中免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑目錄。根據(jù)體外診斷試劑臨床評價的相關(guān)要求，申請人可按照《免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評價資料基本要求（試行）》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2017年第179號）要求進(jìn)行臨床評價。如無法按要求進(jìn)行臨床評價，應(yīng)進(jìn)行臨床試驗(yàn)，臨床試驗(yàn)的開展、方案的制定以及報告的撰寫等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求。

1.臨床評價途徑

臨床評價是指申請人通過對涵蓋預(yù)期用途及干擾因素的臨床樣本的評估、綜合文獻(xiàn)資料等非臨床試驗(yàn)的方式對產(chǎn)品臨床性能進(jìn)行評價的過程。

申請人可自行或者委托境內(nèi)機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室完成該產(chǎn)品的臨床評價，試驗(yàn)地點(diǎn)的設(shè)施、設(shè)備、環(huán)境等應(yīng)能夠滿足該產(chǎn)品的檢測要求。申請人對整個試驗(yàn)過程進(jìn)行管理和試驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性進(jìn)行負(fù)責(zé)。臨床評價報告作為臨床評價資料在注冊時提交，其他臨床評價相關(guān)資料如試驗(yàn)方案、原始記錄等由申請人進(jìn)行保管，保管期限至少為10年。境外申請人可通過其在中國境內(nèi)的代理人，開展相關(guān)臨床評價工作。以下簡要說明臨床評價的相關(guān)內(nèi)容。

1.1研究方法

總膽固醇測定試劑盒目前已有相應(yīng)的參考方法（ALBK法、色譜法等）和境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品，申請人可以選擇其中一種方法開展比較研究試驗(yàn)。

與參考方法進(jìn)行比較研究試驗(yàn)，考察待評價試劑與參考方法的一致性。一致性評價應(yīng)選擇在參考實(shí)驗(yàn)室開展研究，參考實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有中國合格評定國家認(rèn)可委員會認(rèn)可關(guān)于該項(xiàng)目的檢測資質(zhì)。

與境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品進(jìn)行比較研究試驗(yàn)，證明兩者具有等效性。應(yīng)選擇目前臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的產(chǎn)品作為對比試劑，同時應(yīng)充分了解對比試劑的信息，包括方法學(xué)、預(yù)期用途、主要性能指標(biāo)、校準(zhǔn)品的溯源情況以及參考區(qū)間等，并提供已上市產(chǎn)品的境內(nèi)注冊信息及說明書。

1.2試驗(yàn)設(shè)計

申請人應(yīng)根據(jù)申請注冊產(chǎn)品的特性建立具體的試驗(yàn)方案，并詳細(xì)說明對比試劑/方法的選擇、入排標(biāo)準(zhǔn)、樣本量要求以及具體試驗(yàn)操作過程、試驗(yàn)周期、設(shè)盲要求、統(tǒng)計分析方法等內(nèi)容。

1.2.1樣本要求

評價用樣本應(yīng)來源于人體樣本，樣本的來源可追溯。評價用樣本應(yīng)涵蓋申請注冊產(chǎn)品預(yù)期用途和含有膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯、抗壞血酸等干擾物質(zhì)的樣本，并應(yīng)考慮到不同人群之間的差異等。所用樣本應(yīng)能夠充分的被用于評價產(chǎn)品臨床使用的安全性、有效性。

樣本數(shù)量應(yīng)采用合理的統(tǒng)計學(xué)方法（如目標(biāo)值法等）進(jìn)行計算，并符合統(tǒng)計學(xué)要求。可選擇總樣本量不少于40例并分別采用待評價試劑和對比試劑/參考方法進(jìn)行雙份測定的方式，亦可選擇總樣本量不少于100例并分別采用待評價試劑和對比試劑/參考方法進(jìn)行單次測定的方式。其中參考區(qū)間以外樣本應(yīng)不少于50%，同時應(yīng)注重醫(yī)學(xué)決定水平（6.2mmol/L）附近樣本的選擇，并盡量涵蓋檢測范圍。

試驗(yàn)前應(yīng)設(shè)定臨床評價性能指標(biāo)的可接受標(biāo)準(zhǔn),如果比較研究試驗(yàn)結(jié)果無法達(dá)到預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)適當(dāng)擴(kuò)大樣本量進(jìn)行評價。

評價用的樣本類型應(yīng)與注冊申請保持一致。對于具有可比性的不同樣本類型，如血清和血漿樣本，可在分析性能評估中對樣本適用性進(jìn)行研究，或在臨床評價中對每種樣本類型分別進(jìn)行符合統(tǒng)計學(xué)意義數(shù)量的評估。

1.2.2試驗(yàn)操作及周期

申請人可以通過對總樣本量不少于40例，用待評價試劑和對比試劑/參考方法進(jìn)行平行試驗(yàn)，對每份臨床樣本作雙份測定。在試驗(yàn)操作過程中應(yīng)對樣本進(jìn)行編盲，試驗(yàn)檢測周期至少為5天。

申請人也可以通過對總樣本量不少于100例，用待評價試劑和對比試劑/參考方法進(jìn)行平行試驗(yàn)，作單次測定。在試驗(yàn)操作過程中應(yīng)對樣本進(jìn)行編盲，試驗(yàn)檢測周期至少為5天。

1.2.3數(shù)據(jù)收集和處理

應(yīng)首先進(jìn)行離群值觀察，離群值的個數(shù)不得超過限值。若未超限，可刪除離群值后進(jìn)行分析；若超出限值，則需合理分析原因并考慮糾正措施，必要時重新收集樣本進(jìn)行分析。離群值分析和處理方法應(yīng)有依據(jù)。

1.2.4統(tǒng)計學(xué)分析

對試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計方法，如相關(guān)分析、線性回歸、偏倚/偏差分析等。對于對比試驗(yàn)的等效性研究，最常用是對待評試劑和對比試劑/參考方法兩組檢測結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，應(yīng)重點(diǎn)觀察相關(guān)系數(shù)（r值）或判定系數(shù)（R2）、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）等指標(biāo)。

1.3臨床評價報告

臨床評價報告應(yīng)對試驗(yàn)設(shè)計、試驗(yàn)實(shí)施情況和數(shù)據(jù)分析方法等進(jìn)行清晰的描述。應(yīng)至少包括如下內(nèi)容：

1.3.1基本信息，如產(chǎn)品名稱、申請人名稱及聯(lián)系方式、試驗(yàn)時間及地點(diǎn)等。

1.3.2試驗(yàn)設(shè)計，詳細(xì)說明對比試劑/方法選擇、樣本入組和排除標(biāo)準(zhǔn)、樣本量要求、設(shè)盲要求、統(tǒng)計分析方法的選擇等內(nèi)容。

1.3.3試驗(yàn)實(shí)施情況，具體包括：

樣本選擇情況，包括例數(shù)、樣本分布等。樣本例數(shù)應(yīng)詳細(xì)說明計算方法及依據(jù)。臨床評價所用產(chǎn)品信息，如評價用試劑、對比試劑/方法、配合使用的其他試劑/儀器的產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)企業(yè)、規(guī)格/型號、批號等。實(shí)驗(yàn)過程描述。試驗(yàn)管理，包括參加人員、質(zhì)量控制情況、數(shù)據(jù)管理、出現(xiàn)的問題及處理措施等。數(shù)據(jù)分析及評價結(jié)果總結(jié)，根據(jù)確定的統(tǒng)計方法對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，對產(chǎn)品的臨床性能進(jìn)行合理評價。評價數(shù)據(jù)表應(yīng)以附件形式對入組的樣本情況進(jìn)行匯總描述，應(yīng)至少包括：可溯源樣本編號、樣本基本信息、樣本類型、評價用試劑和對比試劑/方法檢測結(jié)果、樣本臨床背景信息等。

評價報告應(yīng)由申請人/代理人簽章。

1.4文獻(xiàn)資料

除以上臨床評價報告外,對擬申報產(chǎn)品臨床性能進(jìn)行評價的相關(guān)文獻(xiàn),可作為補(bǔ)充臨床評價資料提交。文獻(xiàn)的檢索、篩選和分析參照《醫(yī)療器械臨床評價技術(shù)指導(dǎo)原則》的文獻(xiàn)檢索要求。

2.臨床試驗(yàn)途徑

臨床試驗(yàn)的開展、方案的制定以及報告的撰寫等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求。

（八）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料

對體外診斷試劑產(chǎn)品壽命周期的各個環(huán)節(jié),從預(yù)期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知和可預(yù)見的危害等方面的判定以及對患者風(fēng)險的估計進(jìn)行風(fēng)險分析、風(fēng)險評價和相應(yīng)的風(fēng)險控制基礎(chǔ)上，形成風(fēng)險管理報告，應(yīng)當(dāng)符合相關(guān)YY/T 0316-2016行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求。

風(fēng)險分析應(yīng)包含但不僅限于以下方面的內(nèi)容：預(yù)期用途錯誤包括：設(shè)計開始時未設(shè)定預(yù)期分析物、未作適用機(jī)型驗(yàn)證、未針對特定的樣本類型驗(yàn)證。性能特征失效包括：精密度失效、準(zhǔn)確度失效、非特異性、穩(wěn)定性失效、測量范圍失效、定量失效、量值溯源失效、校準(zhǔn)失效。不正確的結(jié)果包括：配方錯誤、采購的原料未能達(dá)到設(shè)計要求的性能、原材料儲存條件不正確、使用了過期的原材料、反應(yīng)體系不正確、試劑與包裝材料不相容?？赡艿氖褂缅e誤包括：生產(chǎn)者未按照生產(chǎn)流程操作，檢驗(yàn)者未按照原料、半成品、成品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作，裝配過程組份、標(biāo)簽、說明書等漏裝或誤裝，成品儲存或運(yùn)輸不當(dāng)，客戶未參照產(chǎn)品說明書設(shè)置參數(shù)或使用。與安全性有關(guān)的特征包括：有毒化學(xué)試劑的化學(xué)污染、樣本的潛在生物污染、不可回收包裝或塑料的環(huán)境污染。

（九）產(chǎn)品技術(shù)要求

申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品前期研究的結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)，按照《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的有關(guān)要求，擬定產(chǎn)品技術(shù)要求，內(nèi)容主要包含產(chǎn)品性能指標(biāo)和檢驗(yàn)方法。

下面就產(chǎn)品技術(shù)要求中涉及的產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和主要性能指標(biāo)等相關(guān)內(nèi)容作簡要敘述。

1.產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)：

2.主要性能指標(biāo)：

2.1外觀

符合申請人規(guī)定的外觀要求。

2.2裝量

液體試劑的裝量應(yīng)不少于標(biāo)示量。

2.3試劑空白吸光度

用指定空白樣品（如純化水、生理鹽水等）加入工作試劑作為樣品，在試劑盒規(guī)定主波長下測試吸光度值，重復(fù)兩次，均值即為空白吸光度。雙試劑型試劑盒應(yīng)不大于0.080，單試劑型試劑盒應(yīng)不大于0.100。

2.4線性范圍

線性范圍應(yīng)至少包含2～10mmol/L。

2.4.1相關(guān)系數(shù)（r）

線性相關(guān)系數(shù)r應(yīng)不小于0.9900。

2.4.2線性偏差

線性偏差應(yīng)不超過申請人給定值。線性偏差可分段描述或連續(xù)描述，若分段描述，應(yīng)注意分段點(diǎn)的確定。

2.5準(zhǔn)確度

試劑盒測試可用于評價常規(guī)方法的國家/國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)3次，測試結(jié)果記為（xi），按公式（1）分別計算相對偏差（B%），如果3次結(jié)果都在±10%范圍內(nèi)，即判為合格。如果大于等于2次的結(jié)果不符合，即判為不合格。如果有1次結(jié)果不符合，則應(yīng)重新連續(xù)測試20次，并分別按照公式（1）計算相對偏差（B%），如果大于等于19次測試的結(jié)果都在±10%范圍內(nèi)，即判為合格。

B%＝|xi－T|／T×100%………………………………（1）

式中：

xi為測試結(jié)果；

T為國家/國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)示值。

2.6分析靈敏度

試劑盒測試給定濃度的被測物時，在試劑盒規(guī)定參數(shù)下所得的吸光度差值（ΔA）應(yīng)符合申請人給定的范圍。

2.7精密度

2.7.1批內(nèi)精密度

重復(fù)測試不同濃度（如高、中、低）的質(zhì)控品或樣本10次，所得結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應(yīng)不大于4.0%。

2.7.2批間差

選取3個不同批次的試劑盒，測試不同濃度（如高、中、低）的質(zhì)控品或樣本，每個批號測定3次，試劑盒批間相對極差（R）應(yīng)不大于6.0%。

2.8穩(wěn)定性

2.8.1效期末穩(wěn)定性

試劑盒在規(guī)定的保存條件下保存至有效期末進(jìn)行檢驗(yàn)，產(chǎn)品性能應(yīng)符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。

2.8.2加速穩(wěn)定性

根據(jù)試劑盒的有效期，將試劑盒放置于37℃條件下，一定時間（通常是3d～7d）后進(jìn)行檢驗(yàn)，產(chǎn)品性能應(yīng)符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。

注1：熱穩(wěn)定性不能用于推導(dǎo)產(chǎn)品有效期，除非是采用基于大量的穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)建立的推導(dǎo)公式。

注2：根據(jù)產(chǎn)品特性可選擇以上方法之一進(jìn)行驗(yàn)證，但所選用方法宜能驗(yàn)證產(chǎn)品的穩(wěn)定性，以保證在效期內(nèi)產(chǎn)品性能符合產(chǎn)品技術(shù)要求的規(guī)定。

2.9校準(zhǔn)品和質(zhì)控品（如適用）

應(yīng)包含外觀、裝量（如適用）、準(zhǔn)確度、均一性、穩(wěn)定性。

2.9.1 外觀

符合申請人規(guī)定的外觀要求。

2.9.2裝量

液體校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的裝量應(yīng)不少于標(biāo)示量。

2.9.3準(zhǔn)確度

2.9.3.1校準(zhǔn)品準(zhǔn)確度

申請人可采用國家/國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/具有溯源性的工作校準(zhǔn)品作校準(zhǔn)曲線后測定校準(zhǔn)品的方法，計算測試結(jié)果與標(biāo)示值的相對偏差，其結(jié)果應(yīng)在±10.0%范圍內(nèi)。

2.9.3.2 質(zhì)控品準(zhǔn)確度

測定定值質(zhì)控品，測試結(jié)果應(yīng)在申請人給定的范圍內(nèi)。

2.9.4均一性

取相同批號的校準(zhǔn)品或質(zhì)控品10瓶，每瓶測試1次，按公式（2）和公式（3）計算測試結(jié)果的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差S1；另用上述校準(zhǔn)品或質(zhì)控品中的1瓶連續(xù)測10次，計算測試結(jié)果的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差S2；再按公式(4)和公式(5)計算S瓶間和CV瓶間，其結(jié)果應(yīng)符合申請人的規(guī)定。

2.10穩(wěn)定性

校準(zhǔn)品、質(zhì)控品在規(guī)定的保存條件下保存至有效期末進(jìn)行檢驗(yàn)，性能應(yīng)符合準(zhǔn)確度和均一性的要求。

（十）產(chǎn)品注冊檢驗(yàn)報告

具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗(yàn)資質(zhì)和承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的注冊檢驗(yàn)報告和產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評價意見?？偰懝檀柬?xiàng)目目前有國家/國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，建議使用國家/國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行注冊檢驗(yàn)。

（十一）產(chǎn)品說明書

說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。

結(jié)合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求，下面對總膽固醇測定試劑盒說明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明。

1.【產(chǎn)品名稱】

試劑盒名稱由三部分組成：被測物質(zhì)的名稱、用途、方法或原理。如：總膽固醇測定試劑盒（CHOD-PAP法）。

2.【包裝規(guī)格】

2.1包裝規(guī)格應(yīng)明確單、雙或其他多試劑類型。

2.2包裝規(guī)格應(yīng)注明可測試的樣本數(shù)或裝量，如xx測試/盒、xxmL。

2.3如有貨號，可增加貨號信息。

3.【預(yù)期用途】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

3.1說明試劑盒用于體外定量測定人血清、血漿等樣本中總膽固醇的含量。

3.2明確與總膽固醇測定相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況。

4.【檢驗(yàn)原理】

標(biāo)本中的膽固醇酯被膽固醇酯酶（CHER）水解為游離膽固醇，和標(biāo)本中存在的游離膽固醇一起被膽固醇氧化酶（CHOD）氧化為膽甾烯酮和過氧化氫，后者再經(jīng)過氧化物酶（POD）催化，使4-氨基安替比林和酚發(fā)生氧化縮合反應(yīng)，生成紅色醌亞胺(稱Trinder反應(yīng)，或稱PAP反應(yīng))。標(biāo)本中的膽固醇含量和生成的醌亞胺呈正比，500nm左右波長檢測醌亞胺的吸光度，對照校準(zhǔn)物即可計算出標(biāo)本中的總膽固醇含量，其反應(yīng)式如下：

5.【主要組成成分】

應(yīng)明確以下內(nèi)容：

5.1說明試劑盒包含組分的名稱、比例或濃度；對于多組分試劑盒，應(yīng)明確不同批次試劑中各組分是否可以互換。

5.2對于試劑盒中不包含，但對該試驗(yàn)必需的試劑組分，說明書中應(yīng)列出此類組分的名稱、純度，提供稀釋或混合方法及其他相關(guān)信息。

5.3試劑盒如含有校準(zhǔn)品或質(zhì)控品，除明確組成成分及生物學(xué)來源外，還應(yīng)明確校準(zhǔn)品溯源性，溯源性應(yīng)寫明溯源的最高級別，包括標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)編號，質(zhì)控品應(yīng)明確靶值范圍。

6.【儲存條件及有效期】

6.1說明試劑盒的效期穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性（如適用）、復(fù)溶穩(wěn)定性（如適用）等，并標(biāo)明儲存條件。

6.2應(yīng)注明生產(chǎn)日期及使用期限，可見標(biāo)簽。

注：儲存條件不應(yīng)有模糊表述，如“室溫”、“常溫”。

7.【適用儀器】

應(yīng)明確可適用儀器的具體品牌、型號。

8.【樣本要求】

重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：樣本類型、處理、保存期限及保存條件等，如有血漿樣本，應(yīng)明確抗凝劑的要求。冷藏樣本檢測前是否須恢復(fù)室溫，冷凍樣本應(yīng)明確凍融次數(shù)。

對已知干擾物進(jìn)行說明并明確不產(chǎn)生干擾的最高濃度，如：膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯、抗壞血酸。

9.【檢驗(yàn)方法】

詳細(xì)說明試驗(yàn)操作的各個步驟，包括：

9.1試劑配制方法、注意事項(xiàng)。

9.2試驗(yàn)條件：測定方法（反應(yīng)類型）、反應(yīng)方向、溫度、測定主/副波長、樣本用量、試劑用量、空白/測定讀數(shù)時間以及試驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng)。

9.3校準(zhǔn)：說明使用的校準(zhǔn)品，校準(zhǔn)曲線的繪制方法。

9.4質(zhì)量控制：說明質(zhì)控品的使用、質(zhì)量控制方法、質(zhì)控頻率。

9.5檢驗(yàn)結(jié)果的計算：應(yīng)明確檢驗(yàn)結(jié)果的計算方法。

10.【參考區(qū)間】

應(yīng)注明樣本類型的參考區(qū)間，并簡要說明其確定方法。建議注明“由于地理、人種、性別和年齡等差異，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考區(qū)間”。

11.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

說明可能對檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素，在何種情況下需要進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)，如檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析查找原因并重新確認(rèn)等。

12.【檢驗(yàn)方法的局限性】

如試劑盒可稀釋，應(yīng)明確當(dāng)測定值超出線性上限時的稀釋方法以及最大稀釋倍數(shù)。

說明該檢驗(yàn)方法的局限性，如本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，不能作為臨床確診依據(jù)，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮等。

13.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

通常包括以下內(nèi)容：

13.1試劑外觀；

13.2空白吸光度；

13.3線性范圍；

13.4準(zhǔn)確度；

13.5分析靈敏度；

13.6精密度（批內(nèi)精密度和批間差）；

13.7校準(zhǔn)品、質(zhì)控品性能（如適用）。

14.【注意事項(xiàng)】

通常包括以下內(nèi)容：

14.1采用不同方法學(xué)的試劑檢測所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較，以免造成錯誤的醫(yī)學(xué)解釋。

14.2有關(guān)人源組分（如有）的警告，如：試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他人源組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等項(xiàng)目的檢測，但截至目前，沒有任何一項(xiàng)檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

14.3對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源對待。

15.【標(biāo)識的解釋】

如有圖形或符號，解釋其代表的意義。

16.【參考文獻(xiàn)】

應(yīng)當(dāng)注明在編制說明書時所引用的參考文獻(xiàn)。

17.【基本信息】

17.1境內(nèi)體外診斷試劑

17.1.1注冊人與生產(chǎn)企業(yè)為同一企業(yè)的，按以下格式標(biāo)注基本信息：

注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱，住所，聯(lián)系方式，售后服務(wù)單位名稱，聯(lián)系方式，生產(chǎn)地址，生產(chǎn)許可證編號

17.1.2委托生產(chǎn)的按照以下格式標(biāo)注基本信息：

注冊人名稱，住所，聯(lián)系方式，售后服務(wù)單位名稱，聯(lián)系方式，受托企業(yè)的名稱，住所，生產(chǎn)地址，生產(chǎn)許可證編號

17.2進(jìn)口體外診斷試劑

按照以下格式標(biāo)注基本信息：

注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱，住所，生產(chǎn)地址，聯(lián)系方式，售后服務(wù)單位名稱，聯(lián)系方式，代理人的名稱，住所，聯(lián)系方式

18.【醫(yī)療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】

19.【說明書核準(zhǔn)日期及修改日期】

應(yīng)注明該產(chǎn)品說明書的核準(zhǔn)日期。如曾進(jìn)行過說明書的變更申請，還應(yīng)該同時注明說明書的修改日期。

三、審查關(guān)注點(diǎn)

（一）技術(shù)要求中性能指標(biāo)的設(shè)定及檢驗(yàn)方法是否符合相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求；技術(shù)要求的格式是否符合《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的相關(guān)規(guī)定。

（二）產(chǎn)品說明書的編寫內(nèi)容及格式是否符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，相關(guān)內(nèi)容是否符合《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號）中對說明書的要求。

（三）分析性能評估指標(biāo)及結(jié)果是否滿足產(chǎn)品技術(shù)要求的規(guī)定；是否滿足本指導(dǎo)原則中各指標(biāo)驗(yàn)證的要求。

（四）參考區(qū)間確定使用的方法是否合理，數(shù)據(jù)統(tǒng)計是否符合統(tǒng)計學(xué)的相關(guān)要求，結(jié)論是否和說明書聲稱一致。

（五）試劑盒的穩(wěn)定性研究方法是否合理，穩(wěn)定性結(jié)論是否和說明書聲稱的一致。

（六）臨床試驗(yàn)采用的樣本類型及病例是否滿足試劑盒聲稱的預(yù)期用途，樣本量及臨床研究單位的選擇、對比試劑的選擇、統(tǒng)計方法及研究結(jié)果、臨床方案及報告撰寫的格式等是否符合《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》對相關(guān)內(nèi)容的規(guī)定。

四、編寫單位

浙江省醫(yī)療器械審評中心。