附件：白蛋白測定試劑（盒）注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2016年第29號）.doc

白蛋白測定試劑（盒）注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對白蛋白測定試劑（盒）注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對白蛋白測定試劑（盒）的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）和《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號），本指導(dǎo)原則適用于按Ⅱ類醫(yī)療器械管理的白蛋白檢測試劑（盒），產(chǎn)品類別為：Ⅱ-1用于蛋白質(zhì)檢測的試劑。

白蛋白測定試劑（盒）適用于使用溴甲酚綠法（BCG）、溴甲酚紫法（BCP）對血清、血漿中白蛋白進(jìn)行定量檢測的白蛋白測定試劑（盒），包括手工試劑和在半自動、全自動生化分析儀上使用的試劑。

本指導(dǎo)原則不適用于干化學(xué)方法測定白蛋白試劑（盒）。

二、注冊申報資料要求

（一）綜述資料

白蛋白是屬于球蛋白的一種蛋白質(zhì)。廣泛分布在各種動植物中，在人體血液，組織液中含有白蛋白，它最重要的作用是維持膠體滲透壓。白蛋白的分子結(jié)構(gòu)含585個氨基酸殘基的單鏈多肽，分子量為66458，分子中含17個二硫鍵，不含有糖的組分。在體液pH7.4的環(huán)境中，白蛋白為負(fù)離子，每分子可以帶有200個以上負(fù)電荷。它是血漿中很重要的載體，許多水溶性差的物質(zhì)可以通過與白蛋白的結(jié)合而被運(yùn)輸。白蛋白（又稱清蛋白，albumin,Alb）是由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，在血漿中的半壽期約為15—19天，是血漿中含量最多的蛋白質(zhì)，占血漿總蛋白的40%—60%。其合成率雖然受食物中蛋白質(zhì)含量的影響，但主要受血漿中白蛋白水平調(diào)節(jié)，在肝細(xì)胞中沒有儲存，在所有細(xì)胞外液中都含有微量的白蛋白。白蛋白是血漿中含量最多、分子最小、溶解度大、功能較多的一種蛋白質(zhì)。白蛋白增高主要見于血液濃縮而致相對性增高，如嚴(yán)重脫水和休克、嚴(yán)重?zé)齻?、急性出血、慢性腎上腺皮質(zhì)功能減低癥。白蛋白降低常見于肝硬化合并腹水及其他肝功能嚴(yán)重?fù)p害(如急性肝壞死、中毒性肝炎等)營養(yǎng)不良、慢性消耗性疾病、糖尿病、嚴(yán)重出血腎病綜合征等。

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說明、研究結(jié)果的總結(jié)評價以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、臨床應(yīng)用情況、性能指標(biāo)等方面寫明擬申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的異同。應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的相關(guān)要求。

（二）主要原材料研究資料（如需提供）

1.試劑盒所用與白蛋白結(jié)合的染料（如溴甲酚綠或溴甲酚紫）詳細(xì)試驗(yàn)資料。如外觀、純度或試劑等級，供應(yīng)商信息和資質(zhì)，采購合同、原輔料性能指標(biāo)及合格證（檢驗(yàn)證書）等。

2.企業(yè)內(nèi)部參考品（白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液）的原料選擇、制備、定值過程及試驗(yàn)資料；白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液的溯源性文件，包括具體溯源鏈、實(shí)驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。白蛋白已具備有證參考物質(zhì)（如CRM470、ERM/IFCC），生產(chǎn)企業(yè)內(nèi)部白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（液）應(yīng)通過建立自己的參考品體系并溯源。

（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

1.主要生產(chǎn)工藝介紹，可以流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

2.產(chǎn)品反應(yīng)原理介紹。

3.檢測體系反應(yīng)條件確定：申請人應(yīng)考慮反應(yīng)時間、反應(yīng)溫度、實(shí)驗(yàn)參數(shù)、儀器型號等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗(yàn)確定上述條件的最佳組合。

4.檢測體系中樣品加樣方式及加樣量確定：申請人應(yīng)考慮樣品加樣方式、加樣量對產(chǎn)品檢測結(jié)果的影響，通過實(shí)驗(yàn)確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測，申請人還應(yīng)對可用于樣本稀釋的物質(zhì)或處理方法進(jìn)行研究，通過試驗(yàn)確定最終選擇的用于樣本稀釋的物質(zhì)或處理方法。

5.不同適用機(jī)型的反應(yīng)條件如果有差異應(yīng)分別詳述。

（四）分析性能評估資料

企業(yè)應(yīng)提交制造商在產(chǎn)品研制階段對試劑盒進(jìn)行的所有性能驗(yàn)證的研究資料，包括具體研究方法、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。對于白蛋白測定試劑（盒）建議選擇多批產(chǎn)品對以下分析性能進(jìn)行研究：分析靈敏度、線性范圍、精密度、準(zhǔn)確度等指標(biāo)。

對于適用多個機(jī)型的產(chǎn)品，應(yīng)提供如產(chǎn)品說明書【適用儀器】項(xiàng)中所列的所有型號儀器的性能評估資料及其實(shí)驗(yàn)參數(shù)。

性能評估應(yīng)采用臨床樣本，并盡量采用異常人群（低蛋白血癥、肝硬化患者）樣本，如果線性范圍低端樣本不足，可以考慮補(bǔ)充低風(fēng)險患者樣本或健康人群。

1.分析靈敏度：分析靈敏度的確定常使用同批號試劑對已知濃度樣品（或有證參考物質(zhì)）在試劑盒規(guī)定參數(shù)讀數(shù)點(diǎn)下的吸光度值（A）或差值（ΔA），換算成40.0g/L的吸光度或吸光度差值。

2.線性范圍：建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實(shí)際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的混合人血清，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。

3.精密度：測量精密度的評估應(yīng)至少包括兩個濃度水平的樣本進(jìn)行，兩個濃度都應(yīng)在試劑盒的測量范圍內(nèi)且有一定的臨床意義（醫(yī)學(xué)決定水平），通常選用該檢測指標(biāo)的正常參考區(qū)間附近和異常高值樣本。兩個濃度都選用高值樣品，可能致CV偏小，也不能選用接近最低檢出限的樣品，可能致CV偏大。

4.準(zhǔn)確度

（1）與企業(yè)內(nèi)部白蛋白校準(zhǔn)品（液）的比對研究

使用已溯源的企業(yè)內(nèi)部定值參考品進(jìn)行驗(yàn)證，重點(diǎn)觀察檢測結(jié)果的偏差情況。

（2）方法學(xué)比對

采用參考方法或國內(nèi)/國際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類試劑作為參比方法，與擬申報試劑同時檢測臨床樣品，從測定結(jié)果間的差異了解擬申報試劑與參比方法間的偏倚。

在實(shí)施方法學(xué)比對前，應(yīng)分別對擬申報試劑和對比試劑進(jìn)行初步評估，只有在確認(rèn)兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方可進(jìn)行比對試驗(yàn)。方法學(xué)比對時應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

5.干擾物質(zhì)及交叉反應(yīng)研究。

（五）參考區(qū)間確定資料

參考區(qū)間確定所采用的樣本來源、確定方法及詳細(xì)的試驗(yàn)資料。

（六）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及申報試劑的穩(wěn)定性研究。包括效期穩(wěn)定性（實(shí)時穩(wěn)定性）、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性及熱穩(wěn)定性等研究，申請人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于效期穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

（七）臨床評價資料

試劑（盒）按照《體外診斷試劑注冊管理辦法》及《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）進(jìn)行臨床試驗(yàn)。

1.研究方法

選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為對比試劑，采用試驗(yàn)用體外診斷試劑（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行對比試驗(yàn)研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。建議企業(yè)盡量選擇方法學(xué)相同、線性范圍及精密度等性能接近的同類試劑作為對比試劑。

2.臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的選擇

（1）第二類產(chǎn)品申請人應(yīng)當(dāng)選定不少于2家（含2家）國家食品藥品監(jiān)督管理總局資質(zhì)認(rèn)可的臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)。

（2）臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)有能力提供臨床評價所需的各類樣本，實(shí)驗(yàn)操作人員有足夠的時間熟悉檢測系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉臨床試驗(yàn)方案。在整個實(shí)驗(yàn)中，考核試劑和對比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，定期對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。

（3）不同的臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)盡可能使用同一批次考核試劑進(jìn)行臨床試驗(yàn)，以便對數(shù)據(jù)進(jìn)行科學(xué)客觀的統(tǒng)計(jì)分析。

（4）對比試劑統(tǒng)一。

3.臨床試驗(yàn)方案

臨床試驗(yàn)實(shí)施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床研究方案。各臨床研究機(jī)構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)基本一致，且保證在整個臨床試驗(yàn)過程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動。整個試驗(yàn)過程應(yīng)在臨床研究機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)并由本實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員操作完成，申報單位的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗(yàn)操作過程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時應(yīng)采用盲法及樣本隨機(jī)分配以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀性。對于新方法測定白蛋白試劑建議明確測定原理或方法學(xué)定義的研究，應(yīng)在方案中明確前后兩次濃度變化有臨床意義的標(biāo)準(zhǔn)。臨床試驗(yàn)中所涉及的樣本類型應(yīng)與產(chǎn)品說明書一致，且每種樣本類型例數(shù)的選擇應(yīng)符合基本的統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)選用的對比試劑與其適用機(jī)型匹配。

4.研究對象選擇

4.1臨床試驗(yàn)樣本量的確定：申請人或臨床研究者應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品臨床使用目的，與該產(chǎn)品相關(guān)疾病的臨床發(fā)生率確定臨床研究的樣本量。在符合指導(dǎo)原則有關(guān)最低樣本要求的前提下，還應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。

4.1.1臨床研究的總樣本數(shù)至少為200例。

4.1.2應(yīng)考慮樣本量的分布。樣本量的選擇應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)及相關(guān)指導(dǎo)原則的要求。

4.1.3樣本濃度應(yīng)覆蓋考核試劑檢測范圍，盡可能均勻分布。不少于30%樣本的測定值處于參考區(qū)間以外，但在測量范圍內(nèi)。

4.2如果考核試劑同時適用于血清或血漿樣本類型，可完成一個樣本類型（血清或血漿）不少于200例的臨床研究，同時可選至少100例血清或血漿同源樣本進(jìn)行比對研究。

4.3建議在臨床試驗(yàn)中選擇部分含干擾物質(zhì)的標(biāo)本進(jìn)行對比研究，包括高脂、溶血、黃疸的樣本。血清中多種蛋白成分如a1-球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、觸珠蛋白也會和BCG或BCP反應(yīng)，以從臨床角度驗(yàn)證對試劑的影響。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對臨床試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法，如相關(guān)分析、線性回歸、受試者工作特征（Receiver Operating Characteristic curve，ROC）曲線分析等。對于對比實(shí)驗(yàn)的等效性研究，最常用是對考核試劑和對比試劑兩組檢測結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，應(yīng)重點(diǎn)觀察相關(guān)系數(shù)（r值）或判定系數(shù)（R2）、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）等指標(biāo)。結(jié)合臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的正/偏態(tài)分布情況，建議統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測結(jié)果無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)假設(shè)，即評價考核試劑與對比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。

6.結(jié)果差異樣本的驗(yàn)證

在數(shù)據(jù)收集過程中，對于兩種試劑的檢測結(jié)果有明顯差異的樣本，應(yīng)采用臨床上普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的第三種同類試劑進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，同時結(jié)合患者的臨床病情對差異原因及可能結(jié)果進(jìn)行分析。

7.臨床試驗(yàn)總結(jié)報告撰寫

根據(jù)《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，臨床試驗(yàn)報告應(yīng)該對試驗(yàn)的整體設(shè)計(jì)及各個關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗(yàn)實(shí)施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法。建議在臨床總結(jié)報告中對以下內(nèi)容進(jìn)行詳述。

7.1臨床試驗(yàn)總體設(shè)計(jì)及方案描述

7.1.1臨床試驗(yàn)的整體管理情況、臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)選擇、臨床主要研究人員簡介等基本情況介紹；

7.1.2病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)、不同年齡段人群的預(yù)期選擇例數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)；

7.1.3樣本類型，樣本的收集、處理及保存等；

7.1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法、統(tǒng)計(jì)軟件、評價統(tǒng)計(jì)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。

7.2具體的臨床試驗(yàn)情況

7.2.1考核試劑和對比試劑的名稱、批號、有效期及所用機(jī)型等信息；

7.2.2對各研究單位的病例數(shù)、病種分布情況進(jìn)行總合，建議以列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比；

7.2.3質(zhì)量控制，試驗(yàn)人員培訓(xùn)、儀器日常維護(hù)、儀器校準(zhǔn)、質(zhì)控品運(yùn)行情況，對檢測精密度、室內(nèi)質(zhì)控（質(zhì)控品測量值）、抽查結(jié)果評估；

7.2.4具體試驗(yàn)過程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、樣本長期保存、結(jié)果不一致樣本的校驗(yàn)等。

7.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

7.3.1數(shù)據(jù)預(yù)處理、差異數(shù)據(jù)的重新檢測或第三方驗(yàn)證以及是否納入最終數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、對異常值或缺失值的處理、研究過程中是否涉及對方案的修改。

7.3.2定量值相關(guān)性和一致性分析

用回歸分析驗(yàn)證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，以y=a+bx和R2的形式給出回歸分析的擬合方程，其中：y是考核試劑結(jié)果，x是對比試劑結(jié)果，b是方程斜率，a是y軸截距，R2是判定系數(shù)，同時應(yīng)給出b的95%（或99%）置信區(qū)間，定量值結(jié)果應(yīng)無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

另外考慮到在不同的樣本濃度區(qū)間試劑的性能可能存在一定差異，因此，建議對總體濃度范圍進(jìn)行區(qū)間分層統(tǒng)計(jì)，對不同濃度區(qū)間內(nèi)的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析以更好的驗(yàn)證兩種試劑的相關(guān)性。

7.4討論和結(jié)論

對總體結(jié)果進(jìn)行總結(jié)性描述并簡要分析試驗(yàn)結(jié)果，對本次臨床研究有無特別說明，最后得出臨床試驗(yàn)結(jié)論。

8.變更事項(xiàng)相關(guān)的臨床試驗(yàn)

涉及產(chǎn)品檢測條件優(yōu)化、增加與原樣本類型具有可比性的其他樣本類型等變更事項(xiàng)，臨床試驗(yàn)總樣本數(shù)至少為100例,并在至少2家(含2家)臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)；變更參考區(qū)間的變化及增加臨床適應(yīng)癥等變更事項(xiàng)，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品具體變更情況，酌情增加臨床試驗(yàn)總樣本數(shù)。

（八）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料

1.產(chǎn)品主要風(fēng)險：體外診斷試劑產(chǎn)品的風(fēng)險管理報告應(yīng)符合YY/T 0316—2008《醫(yī)療器械 風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》的有關(guān)要求，審查要點(diǎn)包括：

（1）與安全性有關(guān)特征的判定可參考YY/T 0316—2008附錄C。

（2）危害分析是否全面可參考YY/T 0316—2008附錄E。

（3）風(fēng)險控制的方案與實(shí)施、綜合剩余風(fēng)險的可接受性評價及生產(chǎn)和生產(chǎn)后監(jiān)視相關(guān)方法可參考YY/T 0316—2008附錄F、G、J、H。

白蛋白測定試劑（盒）的初始可預(yù)見性危害主要存在于產(chǎn)品的設(shè)計(jì)開發(fā)、生產(chǎn)和使用環(huán)節(jié)。如產(chǎn)品設(shè)計(jì)開發(fā)方面的初始可預(yù)見危害主要有：關(guān)鍵原材料選擇、配方各組分適宜的濃度等；生產(chǎn)方面的初始可預(yù)見危害主要有：水質(zhì)的控制、準(zhǔn)確稱量、配制過程的控制（交叉污染）等；使用的初始可預(yù)見危害主要有：未限制非預(yù)期使用，未限制使用環(huán)境及人員，未告知正確使用，與生化分析儀檢測系統(tǒng)匹配使用參數(shù)不當(dāng)?shù)?。可能的風(fēng)險及其控制清單詳見表1。

2.產(chǎn)品的安全性是否符合安全要求。

當(dāng)產(chǎn)品成分中含有人源或動物源性材料時適用，應(yīng)將此部分內(nèi)容體現(xiàn)在注冊的技術(shù)資料中，如綜述資料和/或原材料研究。生物安全性應(yīng)滿足企業(yè)規(guī)定的要求，如包括但不限于HBs抗原、HIV-1/2抗體、HCV抗體及梅毒抗體檢測為陰性。

（九）產(chǎn)品技術(shù)要求

申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下,根據(jù)申請人產(chǎn)品研制、前期臨床評價等結(jié)果,依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)，按照《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的有關(guān)要求，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求，內(nèi)容主要包含產(chǎn)品性能指標(biāo)和檢驗(yàn)方法。

1.產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

（1）GB/T 191—2008 包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志

（2）GB/T 21415—2008 體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性

（3）GB/T 26124—2011 臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）

（4）YY/T 0316—2008 醫(yī)療器械 風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用

（5）YY 0466—2003 醫(yī)療器械 用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和提供信息的符號

（6）YY/T 1228—2014白蛋白測定試劑（盒）

注：以上標(biāo)準(zhǔn)適用最新版本。

2.主要性能指標(biāo)

2.1外觀：至少應(yīng)符合如下要求：

2.1.1試劑（盒）各組分應(yīng)齊全、完整、液體無滲漏、無破損；

2.2.2中英文包裝標(biāo)簽、標(biāo)識字跡應(yīng)清晰。

2.2裝量：應(yīng)不少于標(biāo)識量。

2.3試劑空白吸光度：應(yīng)符合生產(chǎn)企業(yè)宣稱的要求。

2.4分析靈敏度：用已知濃度或活性的樣品進(jìn)行測試，記錄在試劑（盒）規(guī)定參數(shù)下產(chǎn)生的吸光度改變。換算為n單位吸光度差值（ΔA）或吸光度變化（ΔA/min）。應(yīng)符合生產(chǎn)企業(yè)給定范圍。

2.5線性范圍：

用達(dá)到線性區(qū)間下限的低濃度樣本稀釋達(dá)到線性區(qū)間上限的高濃度樣本，混合成至少5個稀釋濃度（xi）。用試劑（盒）分別測試以上樣本，每個稀釋濃度測試3次，分別求出每個稀釋濃度檢測結(jié)果的均值（yi）。以稀釋濃度（xi）為自變量，以檢測結(jié)果均值（yi）為因變量求出線性回歸方程y=a+bx。計(jì)算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（r）。

稀釋濃度（xi）代入求出線性回歸方程，計(jì)算yi的估計(jì)值及yi與估計(jì)值的相對偏差或絕對偏差。

試劑（盒）線性在[10.0，60.0]g/L區(qū)間內(nèi)：

2.5.1相關(guān)系數(shù)r值≥0.990。

2.5.2[10.0，20.0]g/L區(qū)間內(nèi)，線性偏差應(yīng)不超過±4.0g/L；[20.1，60.0]g/L區(qū)間內(nèi)，線性偏差應(yīng)不超過±10％。

2.6精密度

2.6.1重復(fù)性：在重復(fù)性實(shí)驗(yàn)條件下，同一批次試劑對檢測范圍內(nèi)某個濃度的白蛋白樣本進(jìn)行重復(fù)檢測10次，變異系數(shù)CV（%）≤2.0%。

2.6.2批間差：三個批次的檢測試劑對檢測范圍內(nèi)某個濃度的白蛋白樣本進(jìn)行重復(fù)性檢測，其變異系數(shù)CV（%）值應(yīng)≤5.0%。檢測結(jié)果計(jì)算公式如下：

式中：

2.7準(zhǔn)確度：用可用評價常規(guī)方法的有證參考物質(zhì)(CRM)對試劑（盒）進(jìn)行測試，重復(fù)檢測3次，取測試結(jié)果均值（M），按公式（3）計(jì)算相對偏差（B%）。相對偏差應(yīng)不大于±6.0%。

B%＝(M－T)／T×100%  ………………………………（3）

式中：M為測試結(jié)果均值；

T為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)示值，或各濃度人血清定值。

2.8穩(wěn)定性

2.8.1開瓶穩(wěn)定性：試劑（盒）在規(guī)定的貯存條件下保存至規(guī)定的時間，產(chǎn)品的性能應(yīng)至少符合線性、準(zhǔn)確度和重復(fù)性的要求。

2.8.2復(fù)溶穩(wěn)定性（干粉或凍干試劑適用）：干粉試劑開瓶后（復(fù)溶后）在規(guī)定的貯存條件下保存至預(yù)期時間內(nèi)，產(chǎn)品的性能應(yīng)至少符合線性、準(zhǔn)確度和重復(fù)性。

2.8.3效期穩(wěn)定性：試劑（盒）在規(guī)定的貯存條件下保存至有效期末，產(chǎn)品的性能應(yīng)至少符合線性、重復(fù)性和準(zhǔn)確度的要求。

2.9校準(zhǔn)品和質(zhì)控品（如適用）

若試劑盒配套校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，應(yīng)參照GB/T 21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》的要求溯源至國家或國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，并提供校準(zhǔn)品溯源性文件及質(zhì)控品定值說明。溯源性文件中應(yīng)有賦值程序、溯源鏈和不確定度及其評定要求。

（十）產(chǎn)品注冊檢驗(yàn)報告

根據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》要求，首次申請注冊的第二類產(chǎn)品應(yīng)提供具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗(yàn)資質(zhì)和承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的注冊檢驗(yàn)報告和產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評價意見。

（十一）產(chǎn)品說明書

產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致,下面對白蛋白測定試劑(盒)說明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明，以指導(dǎo)注冊申報人員更合理地完成說明書編制。

1.【預(yù)期用途】

白蛋白測定試劑盒用于體外定量檢測血清和/或血漿中白蛋白濃度，適用的樣本類型應(yīng)結(jié)合實(shí)際的臨床研究情況進(jìn)行確認(rèn)。臨床上主要用于肝臟功能及營養(yǎng)狀況等疾病的輔助評價等。

2.【檢測原理】

白蛋白在一定pH值緩沖液中（pH4.2—5.2）帶正電荷，在有非離子型表面活性劑存在時，可與帶負(fù)電荷的染料（溴甲酚綠或溴甲酚紫）結(jié)合產(chǎn)生有色（藍(lán)綠色或綠色）復(fù)合物，在一定波長（600—630nm）處比色，顏色的深度與白蛋白濃度成正比。與同樣處理的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)比較，可求得白蛋白含量。

3.【主要組成成分】

（1）說明試劑包含主要組分的名稱、數(shù)量、比例或濃度等信息。

（2）試劑中不包含但對該項(xiàng)檢測必須的組分，企業(yè)應(yīng)列出相關(guān)試劑/耗材的名稱、貨號及其他相關(guān)信息。

（3）試劑盒中不包含質(zhì)控品或其他耗材，應(yīng)說明經(jīng)驗(yàn)證后推薦配合使用的商品化質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他耗材的生產(chǎn)企業(yè)、產(chǎn)品名稱以及產(chǎn)品貨號等詳細(xì)信息；如包含校準(zhǔn)品和/或質(zhì)控品，應(yīng)說明其主要組成成分及其生物學(xué)來源，校準(zhǔn)品應(yīng)注明其定值及溯源性，質(zhì)控品應(yīng)明確靶值范圍。

4.【儲存條件及有效期】

    試劑的開封穩(wěn)定性、效期穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性等信息做詳細(xì)介紹。并對開封后未使用產(chǎn)品允許暴露于空氣中的溫度、濕度及有效期等條件予以明確。

5.【樣本要求】重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：

（1）樣本采集：采集時間點(diǎn)是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響，具體采集部位及類型，詳述具體的操作方法或列出相關(guān)操作指南文件以指導(dǎo)使用者（最好能夠給出具體圖示），盡量減少由于樣本采集或處理不當(dāng)對實(shí)驗(yàn)造成的影響。

（2）若待測樣本為血漿應(yīng)說明所采用的抗凝劑類型。

（3）樣本處理及保存：樣本的保存條件及期限（短期、長期）、運(yùn)輸條件等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)限制。

6.【適用儀器】所有適用的儀器型號，并提供與儀器有關(guān)的重要信息以指導(dǎo)用戶操作。

7.【檢驗(yàn)方法】詳細(xì)說明實(shí)驗(yàn)操作的各個步驟，包括：

（1）實(shí)驗(yàn)條件：實(shí)驗(yàn)環(huán)境的溫度、濕度等注意事項(xiàng)，檢驗(yàn)試劑及樣本復(fù)溫等要求。

（2）試劑使用方法（手工/半自動/全自動）、注意事項(xiàng)。

（3）詳述待測樣品的預(yù)處理方法、步驟及注意事項(xiàng)。

（4）明確樣本檢測加樣量及反應(yīng)時間。

（5）詳述配套儀器設(shè)置過程。

（6）質(zhì)量控制過程以及注意事項(xiàng)。

8.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

結(jié)合質(zhì)控品對所有可能出現(xiàn)的結(jié)果進(jìn)行合理的解釋。本試劑的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。明確有可能存在的數(shù)值升高因素及數(shù)值降低因素，說明對何種條件下需要進(jìn)行重復(fù)檢測，以及在重復(fù)檢測時對待測樣本可能采取的優(yōu)化條件等進(jìn)行詳述。

9.【檢驗(yàn)方法的局限性】

（1）明確干擾物質(zhì)及濃度范圍對檢測結(jié)果的影響；

（2）操作時必須嚴(yán)格按照操作規(guī)程，精心操作才能得到正確結(jié)果，對操作程序作任何修改都可能影響結(jié)果。

（3）檢測結(jié)果超出試劑盒線性范圍的處理方法。

（4）不同方法pH值要求對測定結(jié)果的影響

10.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

說明該產(chǎn)品主要性能指標(biāo)，應(yīng)至少包括：外觀、裝量、試劑空白吸光度、分析靈敏度、線性范圍、精密度、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性等。產(chǎn)品性能指標(biāo)應(yīng)不低于YY/T 1228—2014 《白蛋白測定試劑（盒）》標(biāo)準(zhǔn)要求。

11.【注意事項(xiàng)】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

（1）有關(guān)人源組分（如有）的警告，如：試劑內(nèi)校準(zhǔn)品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等生物傳染性項(xiàng)目的檢測，但截至目前，沒有任何一項(xiàng)檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

（2）建議實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境要求，如環(huán)境溫度、濕度等。

（3）對采集樣本的要求，建議使用新鮮血清或血漿，勿使用溶血樣本，明確樣本的處理辦法。

（4）對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都視為傳染源進(jìn)行處理。

（5）不同方法應(yīng)說明對檢測結(jié)果的影響因素；使用不同生產(chǎn)商的試劑對同一份樣本進(jìn)行檢測可能會存在差異。

（6）本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

12.【參考文獻(xiàn)】

注明引用的參考文獻(xiàn)。

13.【基本信息】

（1）注冊人與生產(chǎn)企業(yè)為同一企業(yè)的，按以下格式標(biāo)注基本信息：

注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱

住所

聯(lián)系方式

售后服務(wù)單位名稱

聯(lián)系方式

生產(chǎn)地址

生產(chǎn)許可證編號

（2）委托生產(chǎn)的按照以下格式標(biāo)注基本信息：

注冊人名稱

住所

聯(lián)系方式

售后服務(wù)單位名稱

聯(lián)系方式

受托企業(yè)的名稱

住所

生產(chǎn)地址

生產(chǎn)許可證編號

三、審查關(guān)注點(diǎn)

（一）產(chǎn)品名稱的要求

試劑（盒）的命名應(yīng)參考食品藥品監(jiān)管部門發(fā)布的醫(yī)療器械分類目錄或國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)上的通用名稱，一般為“白蛋白測定試劑（盒）（溴甲酚綠法）、白蛋白測定試劑（盒）（溴甲酚紫法）”。

（二）試劑（盒）組成（見注冊申報資料要求）

（三）反應(yīng)機(jī)理或工作原理（見注冊申報資料要求）

（四）試劑主要性能指標(biāo)及其計(jì)算方法（見注冊申報資料要求）

（五）產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

產(chǎn)品適用及引用標(biāo)準(zhǔn)的審查可以分兩步來進(jìn)行。首先對引用標(biāo)準(zhǔn)的齊全性和適宜性進(jìn)行審查，也就是在編寫注冊產(chǎn)品技術(shù)要求時與產(chǎn)品相關(guān)的國家、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)是否進(jìn)行了引用，以及引用是否準(zhǔn)確。

其次對引用標(biāo)準(zhǔn)的采納情況進(jìn)行審查。即所引用標(biāo)準(zhǔn)中的條款要求，是否在產(chǎn)品技術(shù)要求中進(jìn)行了實(shí)質(zhì)性的條款引用。這種引用通常采用兩種方式，文字表述繁多內(nèi)容復(fù)雜的可以直接引用標(biāo)準(zhǔn)及條文號，比較簡單的也可以直接引述具體要求。

產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合相關(guān)的強(qiáng)制性國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和有關(guān)法律、法規(guī)的規(guī)定，并按國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的要求編制。

（六）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿

應(yīng)符合《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號）和《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，同時應(yīng)符合YY/T 0466.1 《醫(yī)療器械 用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和提供信息的符號 第1部分：通用要求》（ISO15223-1）。

四、名詞解釋

（一）準(zhǔn)確度（Accuracy）：一個測量值與可接受的參考值間的一致程度。

（二）分析靈敏度（Analytical Sensitivity）：樣品中以一定概率可被聲明與零有差異的被測量的最低值。本指導(dǎo)原則中的分析靈敏度是指測定規(guī)定濃度樣本，在試劑盒規(guī)定參數(shù)讀數(shù)點(diǎn)下的吸光度值（A）或差值（ΔA）為檢測系統(tǒng)的分析靈敏度。

（三）精密度（Precision）：在規(guī)定條件下，相互獨(dú)立的測試結(jié)果之間的一致程度。精密度的程度是用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法得到的測量不精密度的數(shù)字形式表示，如標(biāo)準(zhǔn)差（SD）和變異系數(shù)（CV）。

五、參考文獻(xiàn)

（一）《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）

（二）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第44號）

（三）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）

（四）《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號）

（五）《臨床檢驗(yàn)質(zhì)量管理技術(shù)基礎(chǔ)》，馮仁豐，第二版，上海科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2007年4月

（六）臨床化學(xué)體外診斷試劑(盒)產(chǎn)品技術(shù)審評規(guī)范（2011版）

（七）GB/T 21415—2008 體外診斷醫(yī)療器械－生物樣品中量的測量－校準(zhǔn)物和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性（ISO 17511:2003，IDT）

（八）WS/T 404.2—2012 臨床常用生化檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間 第2部分：血清總蛋白、白蛋白

（九）定性檢測體外診斷試劑(盒)產(chǎn)品技術(shù)審評規(guī)范（2012版）

（十）YY/T 1228—2014 白蛋白測定試劑（盒）

白蛋白測定試劑（盒）注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則
編制說明

一、指導(dǎo)原則編寫目的

（一）本指導(dǎo)原則編寫的目的是用于指導(dǎo)和規(guī)范白蛋白檢測試劑（盒）產(chǎn)品注冊申報過程中審查人員對注冊材料的技術(shù)審評；同時也可指導(dǎo)生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品注冊工作。

（二）本指導(dǎo)原則旨在讓初次接觸該類產(chǎn)品的注冊審查人員對產(chǎn)品機(jī)理、結(jié)構(gòu)、主要性能、預(yù)期用途等各個方面有所了解，同時讓技術(shù)審查人員在產(chǎn)品注冊技術(shù)審評時把握基本的尺度，對產(chǎn)品安全性、有效性作出系統(tǒng)評價。

二、指導(dǎo)原則編寫依據(jù)

本指導(dǎo)原則編寫主要依據(jù)如下：

（一）《醫(yī)療器械監(jiān)督管理?xiàng)l例》（國務(wù)院令第650號）

（二）《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）

（三）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第44號）

（四）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）

（五）YY/T 1228—2014《白蛋白測定試劑（盒）》

（六）《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第三版）

（七）國家食品藥品監(jiān)督管理部門發(fā)布的其他規(guī)范性文件

（八）現(xiàn)行的國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

三、指導(dǎo)原則部分內(nèi)容編寫考慮

（一）產(chǎn)品的主要技術(shù)指標(biāo)制定主要參考相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1228—2014《白蛋白測定試劑（盒）》、GB/T 26124—2011《臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）》。

（二）為了提高本指導(dǎo)原則的通用性，編寫中明確本指導(dǎo)原則適用于BCG和BCP法。由于其他樣本類型測定方法（比濁法、酶標(biāo)法和其他染料和化學(xué)試劑等），如胸腹水、腦脊液、尿液樣本中白蛋白測定方法在制定國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的性能指標(biāo)上不一致，如果擬申報試劑已有相應(yīng)的專用國家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或相應(yīng)方法學(xué)的通用標(biāo)準(zhǔn)要求發(fā)布，則企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求不得低于上述標(biāo)準(zhǔn)要求。

四、指導(dǎo)原則編寫單位和人員

本指導(dǎo)原則的編寫成員由江西省食品藥品監(jiān)督管理局、江西省藥品審評中心、江西省醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心等專家共同組成。