附件：新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗體檢測試劑注冊審查指導原則（2023年第2號）.doc

新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗體檢測試劑
注冊審查指導原則（2023年修訂版）

本指導原則旨在指導注冊申請人對新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗體檢測試劑注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術審評部門提供參考。

本指導原則是對新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗體檢測試劑的一般要求，注冊申請人應依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用。若不適用，需具體闡述理由及相應的科學依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。

本指導原則是供注冊申請人和技術審評人員使用的指導性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，應在遵循相關法規(guī)的前提下使用本指導原則。如果有能夠滿足相關法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細的研究資料和驗證資料。

本指導原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標準體系以及當前認知水平下制定，隨著法規(guī)和標準的不斷完善，以及科學技術的不斷發(fā)展，相關內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、適用范圍

新型冠狀病毒（2019-nCoV）屬于β屬冠狀病毒，有包膜，顆粒呈圓形或橢圓形，直徑約為60~140nm。具有5個必需基因，分別針對核殼蛋白（N）、包膜蛋白（E）、膜蛋白（M）和刺突蛋白（S）4種結構蛋白及RNA依賴性的RNA聚合酶（RdRp）。核殼蛋白（N）包裹RNA基因組構成核衣殼，外面圍繞著病毒包膜蛋白（E），病毒包膜包埋有膜蛋白（M）、刺突蛋白（S）。

新冠病毒侵入人體后，人體會產(chǎn)生相應的特異性抗體進行防御。其中特異性抗體IgM最早產(chǎn)生并進行早期防御，但該抗體維持時間短，消失快，在血中持續(xù)數(shù)日至數(shù)周；隨后產(chǎn)生IgG抗體，在IgM接近消失時，IgG的含量達到高峰，并在血中持續(xù)較長時間。在臨床應用中，因新冠病毒特異性IgG在病毒感染早期檢出率較低，因此該標志物不單獨用于新冠病毒感染的輔助診斷，應與新冠病毒特異性IgM抗體檢測聯(lián)合使用。

新冠病毒疫苗的接種會刺激人體產(chǎn)生保護性抗體，隨著大規(guī)模人群新冠病毒疫苗接種率的提高，在新冠病毒血清學檢測過程中，應充分考慮疫苗接種對檢測結果的影響，新冠病毒特異性抗體檢測不適用于近期接種過新冠病毒疫苗的人群。在新冠病毒抗體臨床應用上，我國新冠病毒疫苗接種技術指南明確規(guī)定，接種后不建議常規(guī)檢測抗體作為免疫成功與否的依據(jù)。

本指導原則適用的新冠病毒抗體檢測試劑預期用途為體外定性檢測人體血清、血漿、全血等樣本中新冠病毒特異性IgM抗體/IgG抗體/總抗體。預期適用人群如下：新冠病毒特異性抗體檢測預期適用于近期（六個月以內(nèi)）未接種過新冠病毒疫苗且未感染過新冠病毒的有新冠感染相關癥狀人群。申報產(chǎn)品僅用作新冠感染診斷中與病原學檢測協(xié)同使用，不能作為新型冠狀病毒感染確診的依據(jù)，不適用于一般人群的篩查。本指導原則不適用于檢測新冠病毒IgA抗體以及中和抗體相關產(chǎn)品。

本指導原則適用于新冠病毒抗體檢測試劑注冊申請和變更注冊申請的情形。本指導原則針對新冠病毒抗體檢測試劑注冊申報資料中的部分內(nèi)容進行撰寫，其他未盡事宜應當符合《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號）等相關法規(guī)要求。

二、注冊審查要點

（一）監(jiān)管信息

1. 產(chǎn)品名稱及分類編碼

產(chǎn)品名稱應符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）及相關法規(guī)的要求，如新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗體檢測試劑盒（膠體金法）。根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，該產(chǎn)品按照第三類體外診斷試劑管理，分類編碼為6840。

2. 其他信息還包括產(chǎn)品列表、關聯(lián)文件、申報前與監(jiān)管機構的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

綜述資料主要包括概述、產(chǎn)品描述、預期用途、申報產(chǎn)品上市歷史及其他需說明的內(nèi)容。其中，產(chǎn)品描述中應詳述檢測原理、產(chǎn)品主要研究結果的總結和評價、與同類和/或前代產(chǎn)品的比較等。與同類和/或前代產(chǎn)品的比較，應著重從方法學、檢驗原理、產(chǎn)品主要性能等方面詳細說明申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。

（三）非臨床資料

1. 產(chǎn)品技術要求及檢驗報告

1.1 產(chǎn)品技術要求

注冊申請人應當在原材料質量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評價等結果，依據(jù)國家標準、行業(yè)標準及有關文獻資料，結合產(chǎn)品特性按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術要求編寫指導原則》（2022年第8號）的要求編寫。該類產(chǎn)品作為第三類體外診斷試劑，應當以附錄形式明確主要原材料以及生產(chǎn)工藝要求。

新型冠狀病毒IgM、IgG檢測試劑目前都發(fā)布了相應的國家標準品，技術要求中應體現(xiàn)國家標準品的相關要求，并使用國家標準品對三批產(chǎn)品進行檢驗。

如有適用的國家標準、行業(yè)標準，產(chǎn)品技術要求的相關要求應不低于相應的要求。

1.2 產(chǎn)品檢驗報告

新冠病毒抗體檢測試劑已有國家標準品，技術要求中應體現(xiàn)國家標準品的相關要求，并使用國家標準品對三批產(chǎn)品進行檢驗。

2. 分析性能研究

注冊申請人應采用在符合質量管理體系的環(huán)境下生產(chǎn)的試劑盒進行所有分析性能研究，提交具體研究方法、試驗方案、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細資料。

如申報產(chǎn)品適用不同的機型，需要提交采用不同機型進行性能評估的資料。如申報產(chǎn)品包含不同的包裝規(guī)格，需要對各包裝規(guī)格進行分析或驗證。

適用的不同樣本類型應分別進行分析性能研究。

分析性能評估所用樣本的基本信息均需明確，例如樣本來源、樣本類型、采集和處理方式、稀釋方式、定值過程及數(shù)據(jù)等。研究中采用的新冠病毒陽性樣本，應采用科學合理的方法確定其陰陽性和濃度水平，提交具體的試驗資料。分析性能評估用樣本一般應為真實樣本，如涉及稀釋后檢測，應采用與適用樣本類型一致的陰性基質。對于各項性能中采用的樣本，在下述各項性能研究資料中分別提供樣本信息列表。

2.1樣本穩(wěn)定性

樣本穩(wěn)定性研究應采用臨床真實樣本進行，通常應當至少包含一定數(shù)量陰性樣本、弱陽性樣本及陽性樣本，考察樣本在經(jīng)歷不同的儲存條件后，試劑能否穩(wěn)定輸出符合要求的結果。樣本穩(wěn)定性可以包含樣本凍融穩(wěn)定性和運輸穩(wěn)定性的研究，以及樣本經(jīng)過處理后（如滅活）穩(wěn)定性的研究。

2.2適用的樣本類型

描述適用的樣本類型，如：血清、血漿或全血等，血漿和全血需考察不同抗凝劑的適用性。

如產(chǎn)品適用于血清和血漿，可采用同源比對驗證樣本的可比性。

如產(chǎn)品適用于全血，可采用該樣本類型進行全性能評估，亦可至少進行檢出限、不同區(qū)域病毒樣本的包容性和精密度研究，同時進行同源比對試驗。

研究樣本采集時間點的選擇：是否受病程、臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。

2.3校準品的量值溯源和質控品的賦值

描述校準品的的量值溯源（如適用）。

描述質控品的賦值（如適用）。需至少進行三批產(chǎn)品分別在不同適用機型的賦值研究。

2.4精密度

應對精密度指標，如標準差或變異系數(shù)等的評價標準做出合理要求（如適用）。精密度研究應采用臨床樣本。

應考慮運行、時間、操作者、儀器、試劑批次和地點等影響精密度的條件，設計合理的精密度試驗方案進行評價。

設定合理的精密度評價周期，例如：為期至少20天的檢測，具體方案可參考性能評價相關文件進行。

用于精密度評價的臨床樣本應至少包含4個水平：陰性樣本、臨界陽性樣本、（中和強）陽性樣本，并根據(jù)產(chǎn)品特性設定適當?shù)木芏纫蟆?/p>

陰性樣本：待測物濃度為零，其檢測為陰性的比率應為100%（n≥20）。

臨界陽性樣本：待測物濃度略高于試劑盒的檢出限，陽性檢出率應≥95%（n≥20）。

中陽性樣本：待測物濃度呈中等陽性，陽性檢出率為100%且CV≤15%（n≥20），或條帶結果顯色均一。

強陽性樣本：待測物濃度呈強陽性，陽性檢出率為100%且CV≤15%（n≥20），或條帶結果顯色均一。

2.5包容性

提供具有時間和區(qū)域特征性的不同來源的患者真實臨床樣本進行驗證。IgM抗體、IgG抗體檢測試劑分別研究各10個不同患者樣本，驗證內(nèi)容應包括檢出限、重復性等，提供樣本及濃度的確認方法、試驗數(shù)據(jù)。其中應注意，包容性研究樣本和檢出限研究樣本不能重復。

2.6檢出限

檢出限的確定：建議選取特定滴度的特異性抗體陽性樣本梯度稀釋進行檢出限確定，每個梯度的稀釋液重復3～5份，每份稀釋液重復檢測不少于20次，將具有95%陽性檢出率的抗體水平作為檢出限。

IgM抗體、IgG抗體應分別選擇不同來源具有代表性的5個臨床樣本進行檢出限的確定。

檢出限的驗證：選擇具有時間和區(qū)域特征性的至少5個臨床樣本（與檢出限確定不同樣本）在檢出限濃度水平進行驗證，應達到95%陽性檢出率。

采用的稀釋液應與適用樣本類型的基質一致，可采用陰性樣本進行稀釋?？贵w檢測試劑應提供詳細的抗體類型和滴度的確認方法及驗證結果。

2.7分析特異性

2.7.1交叉反應驗證（IgM抗體、IgG抗體檢測試劑應分別驗證）

地方性人類冠狀病毒（HKU1，OC43，NL63和229E）。

H1N1（新型甲型H1N1流感病毒（2009）、季節(jié)性H1N1流感病毒）、H3N2、H5N1、H7N9，乙型流感Yamagata、Victoria，呼吸道合胞病毒，鼻病毒A、B、C組，腺病毒1、2、3、4、5、7、55型，腸病毒A、B、C、D組，EB病毒、麻疹病毒、人巨細胞病毒、輪狀病毒、諾如病毒、腮腺炎病毒、水痘-帶狀皰疹病毒。

肺炎支原體。

高濃度新型冠狀病毒特異性IgG抗體與特異性IgM抗體的交叉反應驗證。

驗證不少于20份正常人樣本。

提供所有用于交叉反應驗證的病原體抗體陽性樣本的來源、和濃度/滴度確認等詳細的試驗資料。

2.7.2內(nèi)源/外源物質干擾：

不同樣本類型其潛在干擾物質可能不同，應根據(jù)具體采集的樣本類型，選擇適用的干擾物質進行研究。建議申請人在每種干擾物質的潛在最大濃度（“最差條件”）條件下進行評價，在病毒抗體臨界陽性水平進行干擾試驗驗證。

2.8 高劑量鉤狀效應

申請人應評估高劑量鉤狀效應并提交研究資料。

2.9 IgM抗體破壞試驗（IgM抗體檢測試劑適用）：對至少5份含有病原體特異性IgM抗體的樣本進行IgM破壞試驗研究，方法為采用特定的化學制劑（如2－巰基乙醇或二硫蘇糖醇）處理樣本后，重新進行檢測，IgM檢測結果應為陰性。

2.10企業(yè)參考品性能：根據(jù)主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設置情況，采用三批產(chǎn)品對企業(yè)參考品進行檢驗并提供詳細的試驗數(shù)據(jù)。

2.11反應體系研究

2.11.1研究樣本采集時間點的選擇：是否受病程、臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。

2.11.2反應條件確定

申請人應考慮反應時間、判讀時間、反應溫度/濕度、洗滌液體積和洗滌次數(shù)（如涉及）等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述條件的最佳組合。

2.11.3反應體系中樣品加樣方式及加樣量確定：通過試驗確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進行處理后方可用于最終檢測，申請人還應對樣本稀釋液及其用量、其他必要的處理方法等進行研究。對于IgM抗體檢測試劑，如采用間接法，建議考慮高濃度特異性IgG對結果的影響，合理設置IgG去除相關樣本處理步驟，以降低特異性IgG可能造成的假陰性和假陽性。

應對樣本是否可以滅活，以及可采用的滅活方式、滅活時間進行研究確定。

3. 穩(wěn)定性研究

一般應包含研究方案，采用的樣本、儀器和試劑信息，數(shù)據(jù)（如檢驗結果、溫度記錄等）及試驗結果等。

3.1實時穩(wěn)定性（貨架有效期）

提交至少三批申報產(chǎn)品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的實時穩(wěn)定性研究資料。明確儲存的環(huán)境條件（如溫度、濕度和光照）及有效期。

3.2使用穩(wěn)定性

提交申報產(chǎn)品實際使用期間穩(wěn)定性的研究資料，應包括所有組成成分的開封穩(wěn)定性。適用時提交復溶穩(wěn)定性、機載穩(wěn)定性及凍融次數(shù)研究資料等。如涉及校準品，還應提交校準頻率或校準穩(wěn)定性研究資料。明確產(chǎn)品使用的溫度、濕度條件等。

3.3運輸穩(wěn)定性

提交申報產(chǎn)品可在特定或者預期的條件下運輸?shù)难芯抠Y料，應說明產(chǎn)品正確運輸?shù)沫h(huán)境條件（如溫度、濕度、光照和機械保護等）。同時說明產(chǎn)品的包裝方式以及暴露的最差運輸條件。注意應考察經(jīng)過運輸條件后實時穩(wěn)定性。

4. 陽性判斷值研究

陽性判斷值的確定：提交對申報試劑陰性/灰區(qū)/陽性等結果判斷的陽性判斷值（cut-off，CO）確定的研究資料，包括具體的試驗方案、人群樣本選擇、評價標準、統(tǒng)計學分析和研究數(shù)據(jù)等。確定陽性判斷值使用的樣本來源的選擇應考慮到不同的地理區(qū)域、不同的感染階段和生理狀態(tài)等因素的影響。

如適用，可采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve, ROC）的分析方式來選擇確定合理的陽性判斷值；如結果存在灰區(qū)（equivocal zone），應明確灰區(qū)建立的基礎。應重點考察對弱陽性樣本的區(qū)分能力，研究中應包含有統(tǒng)計學意義的弱陽性樣本例數(shù)。

如采用其他方法對陽性判斷值進行確認研究，應說明這種方法的合理性。

陽性判斷值的驗證：應搜集采用分布均勻的真實樣本對所確定的陽性判斷值進行驗證。

提交陽性判斷值所用樣本信息列表，至少包括性別、年齡、種族、臨床診斷信息、樣本來源機構、抗體檢測結果等。注意，陽性判斷值的驗證樣本不應與陽性判斷值的確定樣本以及臨床試驗樣本重復。

如果產(chǎn)品適用不同樣本類型，需要對所有樣本類型進行陽性判斷值的驗證。

5.其他資料

5.1主要原材料研究資料

此產(chǎn)品的主要原材料包括抗原、抗體、質控品、參考品等。應提供主要原材料的選擇與來源、制備過程、質量控制標準等相關研究資料。如主要原材料為企業(yè)自制，應提供其詳細制備過程；如主要原材料源于外購，應提供資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及對比篩選試驗資料、供應商提供的質量標準、出廠檢驗報告，以及該原材料到貨后的質量檢驗資料，供應商應固定，不得隨意更換。

5.1.1新型冠狀病毒特異的抗原、抗體

病原體特異的抗原、抗體是該類產(chǎn)品的關鍵原材料。由于新型冠狀病毒不同地域、不同人群感染的毒株之間存在的差異尚未明確，因此在選擇抗原、抗體原料時，應注重抗原表位的選擇，避免毒株間差異造成的假陰性，亦應考慮抗原在其他冠狀病毒的表達情況，避免存在交叉反應出現(xiàn)假陽性。抗原、抗體原材料研究資料中應詳述該方面的考慮。

5.1.1.1新型冠狀病毒抗體檢測試劑所用特異性抗原

首先應詳述抗原表位及選擇依據(jù)，此外應提交抗原來源、制備、篩選、純化、鑒定及質量標準（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、功能性試驗等）詳細試驗資料。

主要包括以下兩種情況：

5.1.1.1.1企業(yè)自制抗原

如為天然抗原，則應對毒株選擇、培養(yǎng)、抗原提取、純化、鑒定等試驗過程予以詳述。如為重組抗原，則應提交有關特定基因選擇、序列信息、克隆構建及轉化、抗原表達及純化、鑒定等詳細資料，重組抗原應明確與天然抗原結構的異同。

5.1.1.1.2企業(yè)外購抗原

應詳述抗原的名稱、抗原生物學來源、供應商名稱、提交供應商選擇的研究資料及供應商出具的抗原性能指標及檢驗報告。重組抗原應描述關特定基因選擇、序列信息，克隆構建及轉化，抗原表達及純化、鑒定等資料，重組抗原應明確與天然抗原結構的異同。

5.1.1.2其他主要原材料

除上述主要原材料外，產(chǎn)品中包含的其他主要原材料，如小鼠抗人IgM/IgG單克隆抗體、酶、抗體、膠體金等標記物、硝酸纖維素膜、微孔板、樣本稀釋液等，均應進行選擇及驗證，并提交相關資料。明確主要原材料的供應商和質量控制標準。免疫層析方法學的產(chǎn)品如適用于全血，應介紹血細胞去除方式，并驗證去除效果。

5.1.2試劑盒質控品/質控線

產(chǎn)品應設置合理的質控品/質控線。質控品應至少包含陰性和陽性兩個水平?？贵w檢測試劑陽性質控品可選擇臨床陽性樣本，陰性質控品可選擇臨床陰性樣本或陰性基質等。提交相關原料的來源、選擇和性能確認等相關研究資料，明確供應商和質量控制標準。企業(yè)應對質控品的檢測結果（如A值）做出明確的范圍要求（試驗有效性的判斷）。

5.1.3企業(yè)參考品

該類產(chǎn)品的企業(yè)參考品一般包括陽性參考品、陰性參考品、檢出限參考品和重復性參考品。應根據(jù)產(chǎn)品性能驗證的實際需要設置企業(yè)參考品。

應提交企業(yè)參考品的原料來源、選擇、制備、陰陽性及濃度/滴度確認方法或試劑等相關驗證資料。企業(yè)參考品的基質應與待測樣本相同。新型冠狀病毒抗體檢測試劑的企業(yè)參考品的設置建議如下：

5.1.3.1陽性參考品

陽性參考品應考慮覆蓋不同來源及特征的新型冠狀病毒感染樣本，可選擇至少各5份確認為陽性的臨床樣本，并設置不同滴度水平。

5.1.3.2陰性參考品

陰性參考品應考慮檢測特異性的評價，應納入正常臨床樣本、含類風濕因子等干擾因素的樣本及其他病原體特異性抗體、抗原陽性樣本，建議包括冠狀病毒（HKU1、OC43、NL63、229E）、流感病毒、腸道病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等抗體陽性樣本。

5.1.3.3檢出限參考品

可設置臨床陽性樣本的系列稀釋樣本，其中應包含檢出限水平。

5.1.3.4重復性參考品

建議包括高、低兩個濃度的臨床樣本，其中一個濃度應為檢出限附近的濃度。

5.2生產(chǎn)工藝研究資料

5.2.1產(chǎn)品基本反應原理介紹。

5.2.2生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并提交研究資料說明每一步驟生產(chǎn)工藝的研究確定資料。

5.2.3包被/標記工藝研究，申請人應考慮如包被/標記液量、濃度、時間、條件等指標對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述指標的最佳組合。

5.2.4顯色系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹以及最適條件研究。

（四）臨床評價資料

該類試劑應通過臨床試驗路徑進行臨床評價。臨床試驗應滿足《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》（國家藥品監(jiān)督管理局通告2021年第72號）的要求，如相關法規(guī)、文件有更新，臨床試驗應符合更新后的要求。下面僅說明該類產(chǎn)品臨床試驗中應關注的重點問題。

新冠病毒抗體檢測試劑臨床試驗應按要求在三家及以上臨床試驗機構進行，開展臨床試驗的機構應按要求經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械臨床試驗機構備案系統(tǒng)備案。采用試驗體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品進行比較研究，從而對產(chǎn)品臨床性能進行確認。

1. 臨床試驗設計

新冠病毒抗體檢測試劑臨床試驗設計與產(chǎn)品預期用途相關，該類產(chǎn)品預期用途一般為新冠病毒感染的輔助診斷，臨床試驗為觀察性研究。臨床試驗中可選擇與已上市同類產(chǎn)品進行臨床檢測結果的一致性比對。

如臨床試驗選擇試驗體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品進行一致性比對，在同類產(chǎn)品選擇的過程中應注意產(chǎn)品適用樣本類型、檢測方法學、檢測性能等方面應與試驗體外診斷試劑具有較好的可比性。

2. 受試者選擇

臨床試驗的入組人群應為產(chǎn)品的預期適用人群，新冠病毒特異性抗體檢測試劑臨床試驗入組人群應為于近期（六個月以內(nèi)）未接種過新冠病毒疫苗且近期已知未感染過新冠病毒的有新冠感染相關癥狀人群；

臨床試驗的入組人群應能夠代表產(chǎn)品適用人群的各種類型，包括新型冠狀病毒感染病例、未感染病例等。

其中感染病例應包括不同疾病進程的患者（如發(fā)病早期、中期、恢復期患者等）。

3. 臨床試驗樣本要求

新型冠狀病毒抗體檢測試劑適用的樣本類型一般包括血清、血漿、靜脈全血、毛細血管全血等，試劑盒樣本采集建議按照新冠病毒樣本采集和檢測技術相關指南的要求進行。

對于不同的樣本類型，如臨床前研究證實檢測性能沒有差異（如血清、血漿樣本檢測性能沒有差異），則臨床試驗中可匯總統(tǒng)計，但應注意臨床試驗應保證每種樣本類型均有試驗體外診斷試劑檢測陽性與陰性的樣本。臨床試驗中亦可進行兩種樣本類型的同源比對。

如產(chǎn)品適用的不同樣本類型差異較大（如：血清與靜脈全血、靜脈全血與毛細血管全血），建議針對不同樣本類型進行同源比對，亦可分別按照臨床試驗設計與已上市同類產(chǎn)品或臨床參考標準進行比對。

4. 臨床試驗樣本量

臨床試驗過程中建議根據(jù)產(chǎn)品性能及相關的統(tǒng)計學參數(shù)采用合理的統(tǒng)計模型對最低樣本量進行估算。其中臨床評價指標的確定應依據(jù)該產(chǎn)品前期研究情況。

臨床試驗采用試驗用體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品進行比對的試驗設計，建議對比試劑檢測陽性樣本不少于200例，陰性樣本不少于300例。

臨床試驗樣本量除需滿足上述最低樣本量要求外，還應保證入組病例覆蓋受試者的各種特征；如針對感染病例應涵蓋疾病感染的各個進程，病毒感染早期、中期病例應分別不低于所有陽性病例的25%。

如申報產(chǎn)品適用于不同樣本類型，臨床試驗需進行不同樣本類型的同源比對時，每種樣本類型的陽性和陰性樣本例數(shù)建議均不少于70例。

5. 臨床試驗結果的統(tǒng)計分析

臨床試驗目的為驗證申報產(chǎn)品與已上市同類產(chǎn)品的一致性，統(tǒng)計分析一般以2×2表的形式總結兩種分析方法的檢測結果，并據(jù)此計算陽性符合率、陰性符合率、總符合率、Kappa值等指標及其可信區(qū)間。除此之外，還應同時進行假設檢驗評價兩種分析方法的一致性。

如產(chǎn)品臨床試驗采用其他統(tǒng)計學模型進行統(tǒng)計分析，如優(yōu)效性試驗等，應充分說明其合理性。

臨床試驗如涉及確認不同樣本類型同源比對的臨床性能，統(tǒng)計分析一般以2×2表的形式總結兩種樣本類型的檢測結果，并據(jù)此計算陽性符合率、陰性符合率、總符合率、Kappa值等指標及其可信區(qū)間。除此之外，還應同時進行假設檢驗評價兩種樣本類型檢測結果的一致性。

6. 境外臨床試驗數(shù)據(jù)的認可

境外臨床試驗數(shù)據(jù)應符合《接受醫(yī)療器械境外臨床試驗數(shù)據(jù)技術指導原則》和《使用體外診斷試劑境外臨床試驗數(shù)據(jù)的注冊審查指導原則》的相關要求。提交完整的臨床試驗方案、報告和倫理審查意見，以及該數(shù)據(jù)適用于中國患者人群的論證資料、境內(nèi)外臨床試驗質量管理差異的對比資料和臨床試驗質量管理差異對于臨床試驗結果影響的論證資料。

注冊申請人應根據(jù)上述臨床試驗技術審評要求，論證境外臨床試驗數(shù)據(jù)的充分性。

7. 臨床評價資料的形式要求

申請人應按照《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》等法規(guī)文件要求提交臨床評價綜述、各機構倫理審查意見、臨床試驗方案和臨床試驗小結以及臨床試驗總結報告。

臨床試驗數(shù)據(jù)匯總表作為臨床試驗小結的附件提交。數(shù)據(jù)表中應包括檢測病例的編號、年齡、性別、樣本類型、采集時間、臨床診斷背景信息、新型冠狀病毒感染診斷結果、本產(chǎn)品檢測結果、對比試劑檢測結果等，臨床應用的數(shù)據(jù)集中每一病例編號應能夠溯源。鑒于抗體的產(chǎn)生與病原體感染病程密切相關，建議在臨床背景信息中詳述患者發(fā)病時間、癥狀變化、疾病轉歸等，為了確認入組病例是否為產(chǎn)品預期適用人群，建議提供病例的疫苗接種情況（具體要求參見附表）。

（五）產(chǎn)品說明書和標簽樣稿

產(chǎn)品說明書格式應滿足《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》的要求。產(chǎn)品說明書中技術內(nèi)容應與注冊申報資料中的相關研究結果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻，應以規(guī)范格式進行標注，并單獨列明文獻的相關信息。新型冠狀病毒抗體檢測試劑說明書編寫應重點關注以下內(nèi)容：

1.【預期用途】

產(chǎn)品預期用途的描述應符合現(xiàn)行的疾病診療指南，其臨床試驗入組病例應能夠覆蓋產(chǎn)品適用人群。建議產(chǎn)品預期用途包括如下內(nèi)容：

針對新冠病毒特異性抗體檢測試劑，其預期用途為用于體外定性檢測近期未接種新冠病毒疫苗且近期未感染過新冠病毒人群的血清、血漿、靜脈全血、毛細血管全血（樣本類型根據(jù)產(chǎn)品驗證與確認情況而定）樣本中新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗體。如針對該預期用途產(chǎn)品為IgM抗體、IgG抗體未在一個注冊單元，建議分別在兩個產(chǎn)品中明確聯(lián)合檢測的要求。

本產(chǎn)品僅用作新冠感染診斷中與病原學檢測協(xié)同使用，不能作為新型冠狀病毒感染確診的依據(jù)，不適用于一般人群的篩查。本試劑盒檢測結果僅供臨床參考，不得作為臨床診斷的唯一標準。檢測結果為陽性還需進一步確認，檢測結果陰性不能排除感染的可能性。建議結合流行病學史、臨床表現(xiàn)、實驗室檢查等綜合分析。不能用于免疫狀態(tài)的評估。

開展新型冠狀病毒抗體檢測，應符合新冠病毒樣本采集和檢測技術相關指南的要求，做好生物安全工作。

該產(chǎn)品僅限醫(yī)療機構使用。

2.【樣本要求】重點明確以下內(nèi)容：

2.1樣本采集：明確采集時間、采集順序、采集量等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。說明采集方法及樣本類型，對于血漿、全血樣本，應注明對抗凝劑的要求。

2.2干擾物的影響：明確常見干擾物對實驗結果是否產(chǎn)生影響，明確可接受的最大干擾物濃度。

2.3樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件（如冷藏、冷凍等）及不同保存條件下的保存時限和運輸條件等。冷藏、冷凍樣本檢測前是否需要恢復室溫，冷凍樣本的凍融次數(shù)限制等。

2.4應包括樣本應采用的滅活方式，采用該方式的依據(jù)，以及滅活需要的時間等。

3.【檢驗方法】

詳細說明試驗操作的各個步驟：

3.1實驗環(huán)境：實驗室的溫度、濕度要求，檢測試劑及樣本的復溫要求等。

3.2試劑配制方法，試劑開封后使用方法等。

3.3高濃度樣本稀釋的方法。

3.4試驗條件：操作步驟、溫度、時間、儀器波長等。

3.5質量控制：操作步驟，質控結果的要求（試驗有效性的判斷），質控結果不符合要求的處理方式。

3.6對于膠體金法檢測試劑可以圖示形式顯示正確的檢驗操作方法、程序等。特別注意應強調(diào)操作溫度及濕度條件、讀取結果的時間。

3.7特別說明檢驗操作過程中的注意事項。

4.【陽性判斷值】

建議將陽性判斷值確定與驗證的方法，采用的樣本及例數(shù)總結至該項下。

5.【檢驗結果的解釋】

結合質控線/對照品/質控品/校準品以及樣本的檢測結果，對所有可能出現(xiàn)的結果組合及相應的解釋進行詳述。對于膠體金法檢測試劑可采用圖示形式顯示檢測結果。檢驗結果的解釋應以陽性判斷值的研究結論為依據(jù)。如有適用的臨床診療指南，則應在此項下引用，相應檢驗結果的解釋應符合相關指南的要求。如有灰區(qū)判定，詳細說明灰區(qū)樣本的處理方法。

6.【檢驗方法的局限性】

綜合產(chǎn)品的預期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進行相關說明，建議包括以下內(nèi)容：

6.1本產(chǎn)品檢測結果僅供臨床參考，不應作為臨床診治的唯一依據(jù)，對患者的臨床管理應結合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢測（尤其是病原學檢測）、治療反應及流行病學等信息綜合考慮。

6.2針對定性檢測產(chǎn)品，應明確本產(chǎn)品檢測結果不提供抗體滴度定量結果，不能作為定量試劑使用。

6.3不合理的樣本采集、轉運、處理及不當?shù)膶嶒灢僮骱蛯嶒灜h(huán)境均有可能導致假陰性或假陽性結果。

6.4根據(jù)機體被病毒感染后產(chǎn)生抗體的基礎理論，特異性IgM抗體產(chǎn)生較早，持續(xù)時間較短；IgG抗體產(chǎn)生較晚，持續(xù)時間較IgM抗體長。另外，由于病毒感染到機體產(chǎn)生特異性抗體需經(jīng)一定時間、抗體的強度存在個體差異，與感染抗原的量及抗原的抗原性強度相關。所以應將IgM抗體檢測結果、IgG抗體檢測結果、采樣時間、臨床指征及出現(xiàn)時間等綜合考慮?？贵w檢測陽性者也應結合其他臨床指征綜合判斷。

6.5感染初期，抗體可能未產(chǎn)生或者產(chǎn)生水平低于產(chǎn)品檢出限，而產(chǎn)生陰性結果。檢測陰性不能排除急性感染，對于可疑的樣本建議進行病原學檢測，或至少間隔7天再次檢測。

6.6評價血清學檢測結果時需要結合患者的臨床病程、基礎狀況以及年齡等因素綜合考慮，如：免疫功能低下、缺陷或免疫功能受抑制的人群、產(chǎn)生抗體能力較低的嬰幼兒，可能不產(chǎn)生或產(chǎn)生低滴度的抗體，其血清學抗體檢測的參考價值有限，可能會導致錯誤的醫(yī)學解釋。

6.7 對于曾經(jīng)感染過新冠病毒的人群，體內(nèi)產(chǎn)生的新冠病毒特異性IgG抗體可能持續(xù)時間較長，IgG抗體檢測陽性不一定代表目前處于感染狀態(tài)，應合理解釋。

6.8注射過新冠病毒疫苗的人群，其抗體水平可能為陽性，其IgM、IgG抗體檢測的參考價值有限，可能會導致錯誤的醫(yī)學解釋。

6.9新冠病毒抗體檢測的結果不能用于評估人體是否已經(jīng)對新冠病毒具備免疫力，特別是不能用于評估新冠病毒疫苗的作用和功效。

6.10在近幾個月內(nèi)接受過輸血或其他血液制品治療的人群，對其陽性檢測結果的分析應慎重。

6.11該產(chǎn)品為定性分析產(chǎn)品，結果并不能準確反映新型冠狀病毒（2019-nCoV）IgM/IgG抗體的滴度。

6.12其他需要說明的局限性等。

7.【產(chǎn)品性能指標】

簡述以下性能指標：

7.1國家標準品和企業(yè)參考品符合率。

7.2檢出限：簡要介紹評價方法、所用樣本情況以及評價結果。

7.3對包容性的研究情況進行總結。

7.4對精密度的研究情況進行總結。

7.5分析特異性

7.5.1交叉反應：詳述交叉反應驗證的病原體種類，及有/無交叉反應的濃度水平。

7.5.2干擾試驗：說明驗證的干擾物質種類及有/無干擾反應的濃度水平。

7.6臨床試驗：簡要介紹試驗方法、受試者及樣本、試驗結果和結論等。

8.【注意事項】

8.1本產(chǎn)品僅用于體外診斷。

8.2明確本試劑盒所采用的生物學來源的組分，雖經(jīng)滅活，但不能保證其不具有潛在傳染性，需要嚴格按照生物安全有關規(guī)定操作，遵循實驗室操作的常規(guī)規(guī)定。所有樣品、洗滌液（如適用）和各種廢棄物均應按污染物處理。

8.3試劑操作的注意事項，如是否需要平衡至室溫再使用，是否需要搖勻等。不同批號的試劑是否可以混用。

8.4有關實驗操作、樣本保存及處理等其他注意事項。

三、參考文獻

1.《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）[Z].

2.《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號）[Z].

3. 中華人民共和國衛(wèi)生健康委員會. 新型冠狀病毒感染診療方案（第十版）[Z]. 2023-01-06.

4. 中華人民共和國衛(wèi)生健康委員會.新型冠狀病毒感染“乙類乙管”檢測方案 [Z].2022-12-27.

5. 中華人民共和國衛(wèi)生健康委員會疾病預防控制局. 新冠病毒疫苗接種技術指南（第一版）[Z].2021-03-29.

附表

臨床試驗數(shù)據(jù)匯總表