附件：葡萄糖檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則（2024年第19號）.doc

葡萄糖檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對葡萄糖檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對葡萄糖檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中的具體內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特征對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。

本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導(dǎo)文件，不包括審評審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細的研究資料和驗證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)、國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則適用于采用葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法、葡萄糖脫氫酶法等酶學(xué)方法，利用全自動、半自動生化分析儀或分光光度計，在醫(yī)學(xué)實驗室進行人血清、血漿或尿液中葡萄糖定量檢測的臨床化學(xué)體外診斷試劑。

本指導(dǎo)原則不適用于：擬自測用血糖監(jiān)測系統(tǒng)（包括血糖試紙、質(zhì)控品等），擬用于新生兒的葡萄糖檢測試劑。

對基于其他方法學(xué)的試劑，可能部分要求不完全適用或本文所述內(nèi)容不夠全面，申請人可以參照本指導(dǎo)原則，根據(jù)產(chǎn)品特性對適用部分進行評價或補充其他的評價資料進行相應(yīng)驗證。

二、注冊審查要點

注冊申報資料的撰寫應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊申報資料要求及說明》的相關(guān)要求。

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》及相關(guān)法規(guī)的要求，如葡萄糖測定試劑盒（葡萄糖氧化酶法）。

產(chǎn)品名稱一般由三部分組成。第一部分：被測物名稱為葡萄糖；第二部分：用途，如測定試劑（盒）；第三部分：方法或者原理，如葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法等。

2.分類依據(jù)

根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》和《體外診斷試劑分類子目錄》，葡萄糖測定試劑管理類別為Ⅱ類，分類編碼為6840。

3.其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監(jiān)管機構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

應(yīng)按《體外診斷試劑注冊申報資料要求及說明》的要求提交概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報產(chǎn)品上市歷史等資料。其中，需注意以下內(nèi)容：

1.概述

應(yīng)描述葡萄糖測定試劑名稱及其確定依據(jù)；該產(chǎn)品是用于糖類檢測的試劑；描述申報產(chǎn)品預(yù)期用途；描述有關(guān)申報產(chǎn)品的背景信息概述或特別細節(jié)（如適用），如申報產(chǎn)品的歷史概述、歷次提交的信息，與其他經(jīng)批準(zhǔn)上市產(chǎn)品的關(guān)系等。

2.產(chǎn)品描述

2.1產(chǎn)品綜述

描述產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，產(chǎn)品組成，原材料的來源及制備方法，主要生產(chǎn)工藝，檢驗方法，質(zhì)控品的制備方法及賦值情況等。產(chǎn)品檢測需要進行校準(zhǔn)，應(yīng)描述校準(zhǔn)品的制備方法及溯源情況。技術(shù)原理包括反應(yīng)原理，方法學(xué)，測量方法，信號處理方法，數(shù)據(jù)獲取和解讀方式，分析前處理步驟等。

描述產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價,包括分析性能評估、參考區(qū)間、穩(wěn)定性以及臨床評價等。

描述不同包裝規(guī)格之間的差異。

描述產(chǎn)品中使用的生物材料或衍生物（如己糖激酶、葡萄糖氧化酶、葡萄糖脫氫酶、校準(zhǔn)品原材料、質(zhì)控品原材料等）的生物學(xué)來源（如人、動物、重組或發(fā)酵產(chǎn)物）和組織來源（如血液）。人源性材料須對有關(guān)傳染病（HIV、HBV、HCV等）病原體檢測予以說明；其他動物源及微生物來源的材料，應(yīng)當(dāng)說明其在產(chǎn)品運輸、使用過程中對使用者和環(huán)境是安全的，并提供相關(guān)的文件。

2.2包裝描述

提供有關(guān)產(chǎn)品包裝信息，包括包裝形狀和材料等。

2.3研發(fā)歷程

闡述申請注冊產(chǎn)品的研發(fā)背景和目的。如有參考的同類產(chǎn)品或前代產(chǎn)品，應(yīng)當(dāng)提供同類產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品的信息，并說明選擇其作為研發(fā)參考的原因。

2.4與同類和/或前代產(chǎn)品的比較

應(yīng)著重從技術(shù)原理、預(yù)期用途、主要組成成分、量值溯源、主要性能指標(biāo)、參考區(qū)間等方面寫明擬申報產(chǎn)品與境內(nèi)、外已上市同類產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。

3 預(yù)期用途

3.1預(yù)期用途

說明產(chǎn)品用于體外定量檢測人體樣本中的葡萄糖濃度（或含量），明確具體的樣本類型如血清、血漿、尿液，適用的樣本類型應(yīng)結(jié)合實際的分析性能研究及臨床研究情況進行確認。應(yīng)明確適用儀器及使用方法（自動/半自動），樣本采集及保存裝置和/或添加劑（如抗凝劑）使用情況。

3.2臨床適應(yīng)證

說明臨床適應(yīng)證的發(fā)生率、易感人群、分析物的詳細介紹及與臨床適應(yīng)證的關(guān)系，相關(guān)的臨床或?qū)嶒炇以\斷方法。

葡萄糖是存在于人體血液中最主要的碳水化合物，血液中的葡萄糖俗稱血糖，它主要來源于食物經(jīng)消化吸收生成。正常人血液中的葡萄糖由腎小球濾過到腎小管，腎小管能夠重吸收全部的葡萄糖，所以尿液中不含有葡萄糖。

血液葡萄糖測定在評估機體糖代謝狀態(tài)、診斷糖代謝紊亂相關(guān)疾病，指導(dǎo)臨床醫(yī)師制定并適時調(diào)整治療方案等方面具有重要價值。其升高主要見于生理性血糖升高（如攝入高糖食物、情緒激動等）、糖尿病、內(nèi)分泌疾?。ㄈ缂谞钕俟δ芸哼M癥等）、胰腺病變、嚴重的肝臟病變和藥物影響等；降低主要見于生理性低血糖（如饑餓及劇烈運動后等）、胰島素分泌過多、升高血糖的激素（如腎上腺素等）分泌不足。臨床一般將空腹血糖及口服葡萄糖耐量試驗結(jié)果作為診斷糖尿病的標(biāo)準(zhǔn)。

尿液葡萄糖俗稱尿糖，如果血糖濃度超過腎閾，則出現(xiàn)糖尿。尿糖升高主要見于糖尿病、腎性糖尿病、甲狀腺功能亢進等，內(nèi)服或注射大量葡萄糖、情緒激動及藥物影響等。因所受影響因素較多，尿糖測定一般為糖尿病診斷提供輔助信息。

體液葡萄糖測定目前廣泛應(yīng)用的為酶法，常用的酶法包括葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法和葡萄糖脫氫酶法。

3.3適用人群

適用于糖尿病、內(nèi)分泌紊亂等病理性變化狀態(tài)下以及妊娠期等健康狀態(tài)下需評估血糖水平、尿糖水平的人群。

3.4預(yù)期使用者

使用者為經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的醫(yī)務(wù)人員或?qū)嶒炇覍I(yè)技術(shù)人員。

4.預(yù)期使用環(huán)境

預(yù)期使用地點為醫(yī)學(xué)檢驗實驗室或醫(yī)院、醫(yī)療/臨床實驗室，其檢測過程中的環(huán)境條件應(yīng)符合適用儀器正常工作環(huán)境條件，并且試劑儲存需滿足說明書規(guī)定的儲存條件及有效期。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品風(fēng)險管理資料

申請人應(yīng)考慮產(chǎn)品壽命周期的各個環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預(yù)見的危害等方面的判定以及對患者風(fēng)險的估計進行風(fēng)險分析，應(yīng)符合GB/T 42062《醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。

應(yīng)當(dāng)提供風(fēng)險分析、風(fēng)險評價、風(fēng)險控制、任何一個或多個剩余風(fēng)險的可接受性評定、與產(chǎn)品受益相比，綜合評價產(chǎn)品風(fēng)險可接受等內(nèi)容，并說明對于每項已判定危害的各個過程的可追溯性。

應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的實際情況充分考慮影響檢測結(jié)果的各種因素，并采用合理的控制措施，綜合評估風(fēng)險是否可接受。比如，抗凝劑（草酸鉀-氟化鈉等）可能對檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾；葡萄糖氧化酶法試劑易受氧氣的干擾，需分析不同海拔等環(huán)境因素造成氧氣含量不同可能對檢測結(jié)果產(chǎn)生的干擾，且需分析還原物質(zhì)（如尿素、維生素C、膽紅素等）對檢測結(jié)果產(chǎn)生的干擾；葡萄糖脫氫酶法試劑需分析其是否能區(qū)別麥芽糖、半乳糖、木糖與葡萄糖，是否會導(dǎo)致葡萄糖檢測結(jié)果假性升高等。

2.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單

說明產(chǎn)品符合《體外診斷試劑安全和性能基本原則清單》各項適用要求所采用的方法，以及證明其符合性的文件。對于其中不適用的各項要求，應(yīng)當(dāng)說明理由。

對于包含在產(chǎn)品注冊申報資料中的文件，應(yīng)當(dāng)說明其在申報資料中的具體位置；對于未包含在產(chǎn)品注冊申報資料中的文件，應(yīng)當(dāng)注明該證據(jù)文件名稱及其在質(zhì)量管理體系文件中的編號備查。

3.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告

3.1產(chǎn)品技術(shù)要求

申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評價等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻資料，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的有關(guān)要求，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求。

主要包括以下性能指標(biāo)：外觀、裝量、試劑空白吸光度、線性、準(zhǔn)確度、分析靈敏度、重復(fù)性、批間差、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品均勻性（如適用）、質(zhì)控品可接受區(qū)間（如適用）等。

產(chǎn)品技術(shù)要求建議不低于YY/T 1200《葡萄糖測定試劑盒（酶法）》的要求。若申報產(chǎn)品結(jié)構(gòu)特征、技術(shù)原理、預(yù)期用途、使用方式等與標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍不一致，申請人應(yīng)當(dāng)提出不適用標(biāo)準(zhǔn)的說明，并提供經(jīng)驗證的證明性資料。

3.2檢驗報告

應(yīng)提供符合《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》及產(chǎn)品技術(shù)要求規(guī)定要求的檢驗報告。目前該產(chǎn)品無相應(yīng)國家標(biāo)準(zhǔn)品發(fā)布，如有，則優(yōu)先采用國家標(biāo)準(zhǔn)品對其進行檢測。

可提交以下任一形式的檢驗報告：

3.2.1具有自檢能力的注冊申請人出具的自檢報告。

3.2.2委托有資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗機構(gòu)出具的檢驗報告。

如產(chǎn)品提交自檢報告，還需按照《醫(yī)療器械注冊自檢管理規(guī)定》的要求提交相應(yīng)資料。

4.分析性能研究

申請人應(yīng)提交在有效質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)產(chǎn)品的所有分析性能評估資料，對于每項分析性能的研究都應(yīng)包括研究目的、試驗設(shè)計、研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法等詳細資料。分析性能研究的試驗方法，可以參考《定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導(dǎo)原則》。

分析性能評估時應(yīng)將試劑、儀器和所選用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品作為一個整體進行評價，評估整個系統(tǒng)的性能是否符合要求。有關(guān)分析性能評估的背景信息也應(yīng)在申報資料中有所體現(xiàn)，包括試驗時間、地點、檢驗人員、適用儀器、試劑規(guī)格和批號、所選用的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品、樣本來源等。

用于分析性能評估的樣本，應(yīng)盡量與預(yù)期適用的真實臨床樣本一致，并按照說明書描述的方式進行樣本采集、處理、運輸和保存。如特定濃度的樣本難以獲得，可采用不同濃度的樣本進行混合。

如申報產(chǎn)品適用不同的機型，需要提交在不同機型上進行評估的資料。應(yīng)采用一個或多個機型，進行充分的試劑分析性能建立研究，對于其他機型，應(yīng)分析各適用機型的工作原理、檢測方法、反應(yīng)條件控制、信號處理等，如基本相同，可基于風(fēng)險分析對已建立的分析性能指標(biāo)進行合理驗證。如試劑包含不同包裝規(guī)格，需對各包裝規(guī)格間的差異進行分析或驗證。如不同規(guī)格間存在性能差異，需采用每個包裝規(guī)格產(chǎn)品進行分析性能評估；如不同規(guī)格間不存在性能差異，需要詳細說明各規(guī)格間的差別及可能產(chǎn)生的影響，采用具有代表性的包裝規(guī)格進行分析性能評估。

對于本試劑，建議著重對以下分析性能進行研究：

4.1樣本穩(wěn)定性

為防止血液樣本中葡萄糖降解，血液樣本采集后應(yīng)及時分離血清或血漿，血漿樣本應(yīng)使用抗凝劑抗凝，尿液樣本應(yīng)采集24小時尿。

申請人應(yīng)充分考慮實際使用過程中樣本采集、處理、運輸及保存等各個階段的條件，對適用的不同類型樣本的穩(wěn)定性分別進行評價并提交研究資料，內(nèi)容包括建議的保存條件、添加劑（如抗凝劑）和運輸條件（如涉及）等。

樣本穩(wěn)定性應(yīng)考慮在不同儲存條件（室溫保存、冷藏和冷凍）下對不同類型樣本進行有效期驗證，建議申請人選擇合理溫度范圍/溫度點，每間隔一定的時間段對儲存樣本進行穩(wěn)定性驗證，從而確認樣本在不同溫度下儲存的有效期。冷凍儲存的樣本需考慮凍融次數(shù)對穩(wěn)定性的影響并進行驗證。

4.2適用的樣本類型

血清、血漿、尿液是葡萄糖檢測的適宜樣本，如果試劑適用于多種樣本類型，應(yīng)采用合理方法評價每種樣本類型的適用性。

其中，針對血清、血漿樣本，可選擇具有統(tǒng)計學(xué)意義數(shù)量的樣本進行樣本一致性的同源比對研究。

血液樣本與尿液樣本不具有可比性，應(yīng)對每種樣本類型分別進行分析性能評估。

4.3空白限（LOB）、檢出限（LOD）和定量限（LOQ）研究

4.3.1空白限

4.3.1.1 空白限建立

LOB的建立建議使用儀器在多天內(nèi)使用多個試劑批次對多個獨立的空白樣本進行重復(fù)檢測不少于2次，并滿足最少測試結(jié)果要求，其中血清、血漿空白樣本不易獲得，可使用樣本稀釋劑、緩沖液、生理鹽水、純水和類似的基質(zhì)等替代物作為空白樣本。每個試劑批次至少需要獲得60個空白樣本測定結(jié)果，對測試結(jié)果進行統(tǒng)計分析，判斷測試結(jié)果是否為正態(tài)分布，進而確定使用參數(shù)分析或非參數(shù)分析法計算空白限。

4.3.1.2 空白限驗證

LOB的驗證需選擇至少2個空白樣本（不同于建立的樣本），采用建立方式在使用儀器上多天內(nèi)使用多個試劑批次對空白樣本進行試驗。每個試劑批次至少需要獲得20個檢測結(jié)果，計算符合要求的檢測結(jié)果比例是否滿足預(yù)設(shè)的臨界值，則4.3.1.1建立的空白限得到驗證。

4.3.2檢出限

4.3.2.1檢出限建立

LOD一般由多個獨立的低濃度（含有分析物）樣本的檢測結(jié)果，結(jié)合LOB進行計算獲得。LOD的建立建議使用儀器在多天內(nèi)使用多個試劑批次對多個獨立的低濃度樣本進行重復(fù)檢測不少于2次，并滿足最少測試結(jié)果要求。每個試劑批次至少需要獲得60個低濃度樣本測定結(jié)果，對測試結(jié)果進行統(tǒng)計分析，判斷測試結(jié)果是否為正態(tài)分布，進而確定使用參數(shù)分析或非參數(shù)分析法計算檢出限。

4.3.2.2檢出限驗證

LOD的驗證需選擇至少2個樣本（檢出限濃度樣本），在多天內(nèi)進行試驗。每個試劑批次至少需要獲得20個檢測結(jié)果，計算符合要求的檢測結(jié)果比例，如果比例符合統(tǒng)計學(xué)要求/預(yù)設(shè)的臨界值，則建立的LOD得到驗證。

4.3.3定量限

4.3.3.1定量限建立

LOQ應(yīng)滿足預(yù)設(shè)準(zhǔn)確度指標(biāo)，即考慮偏倚和精密度的要求。可使用4.4.1中所述參考物質(zhì)作為樣本，如涉及將樣本稀釋至低濃度水平，應(yīng)確保稀釋液不引起明顯的基質(zhì)效應(yīng)，且在低濃度區(qū)間呈線性。LOQ的建立建議使用儀器在多天內(nèi)使用多個試劑批次對多個獨立的已知濃度的低濃度樣本進行重復(fù)檢測不少于3次，并滿足最少測試結(jié)果要求。每個試劑批次至少需要獲得36個已知濃度生物低濃度樣本測定結(jié)果，對測試結(jié)果進行統(tǒng)計分析，根據(jù)臨床需求和室間質(zhì)量評價的允許誤差設(shè)定總誤差目標(biāo)值（TE目標(biāo)值），計算總誤差TE，滿足TE＜TE目標(biāo)值的最低樣本濃度被作為該批號的LOQ。

4.3.3.2定量限驗證

LOQ的驗證需選擇至少2個定量限濃度樣本，在多天內(nèi)進行試驗。每個試劑批次至少需要獲得20個檢測結(jié)果，計算符合要求的檢測結(jié)果比例，如果比例符合統(tǒng)計學(xué)要求/預(yù)設(shè)的臨界值，則4.3.3.1建立的LOQ得到驗證。

4.4正確度

對正確度的評價包括參考物質(zhì)檢測、方法學(xué)比對、回收試驗等方法，申請人可根據(jù)實際情況選擇下述方法之一進行研究：

4.4.1參考物質(zhì)檢測

參考物質(zhì)包括具有互換性的有證參考物質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、參考測量程序賦值的臨床樣本等。目前血糖有已發(fā)布的有證參考物質(zhì)，有檢驗醫(yī)學(xué)溯源聯(lián)合委員會（The Joint Committee for Traceability in Laboratory Medicine，JCTLM）列表推薦的ID LC-MS/MS葡萄糖參考測量程序、美國疾病控制與預(yù)防中心（Communicable Disease Center，CDC）葡萄糖己糖激酶參考方法等；尿糖暫無有證參考物質(zhì)，有JCTLM列表推薦的葡萄糖德國臨床化學(xué)會（Deutsche Vereinte Gesellschaft ftir Klinische Chemie und Laboratoriumsmedizin，DGKL）參考方法等。

建議采用2～3個水平的參考物質(zhì)，代表試劑測量區(qū)間內(nèi)的不同濃度，其中應(yīng)盡量包括醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上/下限附近的濃度。進行多次重復(fù)檢測，采用檢測結(jié)果平均值與參考量值計算偏倚。

4.4.2方法學(xué)比對

采用申報試劑與合理的比較測量程序同時檢測臨床樣本，通過兩者的比對研究和偏倚估計，進行申報試劑的準(zhǔn)確度評價。比較測量程序可選擇同類試劑或者參考測量程序。臨床樣本的濃度水平應(yīng)覆蓋申報試劑的測量區(qū)間。在性能建立時，建議對每個樣本重復(fù)檢測，以平均值或中位數(shù)進行回歸分析，并評價醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上/下限濃度的偏倚。

在實施方法學(xué)比對前，應(yīng)分別對擬申報試劑和比較測量程序進行初步評估，只有在確認兩者質(zhì)量都分別符合各自成品質(zhì)量檢驗標(biāo)準(zhǔn)后方可進行比對試驗。方法學(xué)比對時應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。

4.4.3回收試驗

目前有葡萄糖純品。

在人源樣本中加入一定體積純品配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液（標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積不超過總體積10%，加入標(biāo)準(zhǔn)溶液后樣本總濃度必須在試劑測定范圍內(nèi)），每個濃度重復(fù)測定3次，按公式計算回收率，回收率應(yīng)在申請人給定范圍內(nèi)。

R=[C×（V0+V）－C0×V0）]/（V×CS）×100%

式中：

R —回收率；

V —加入標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積；

V0 —人源樣本的體積；

C —人源樣本加入標(biāo)準(zhǔn)溶液后的測定濃度；

C0 —人源樣本的測定濃度；

Cs —標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。

4.5精密度研究

精密度由隨機測量誤差決定，通常用標(biāo)準(zhǔn)差、方差或變異系數(shù)表示。應(yīng)根據(jù)各測量條件對檢測結(jié)果影響程度的分析，設(shè)計合理的精密度試驗方案進行評價，包括重復(fù)性、實驗室內(nèi)精密度、實驗室間精密度和批間（lot-to-lot）精密度。

針對本產(chǎn)品的精密度評價提出以下要求：

4.5.1對可能影響檢測精密度的主要變量進行驗證，除檢測試劑本身的影響外，還應(yīng)對操作者、測量儀器、測量程序、試劑批次(lot)、校準(zhǔn)（校準(zhǔn)品批次，校準(zhǔn)周期）、運行（run）、時間、地點、環(huán)境條件（實驗室溫度、濕度、空氣質(zhì)量、管理等）等要素進行相關(guān)的驗證。

4.5.2合理的精密度評價周期，例如：為期至少20天的檢測，每天運行2次，每次運行2個重復(fù)樣本，從而對批內(nèi)/批間、日內(nèi)/日間的精密度進行綜合評價；或采用3×5×5試驗?zāi)Ｐ停?個實驗室，在5天對同一樣本進行測試，每天運行1個分析批，每個分析批重復(fù)5次測試，從而對重復(fù)性、實驗室內(nèi)精密度、室間精密度、批間精密度進行評估。

4.5.3精密度研究用樣本一般應(yīng)為臨床實際檢測樣本或其混合物，必要時可進行稀釋、添加高濃度物質(zhì)或采用基質(zhì)合理的質(zhì)控品。樣本濃度一般包括測量區(qū)間高、中、低在內(nèi)的至少3個水平，濃度水平應(yīng)在試劑盒的測量范圍內(nèi)且有一定的臨床意義，應(yīng)包含醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上/下限濃度附近的樣本。

4.6分析特異性

應(yīng)評估分析待測樣本中和試劑使用過程中潛在的交叉反應(yīng)和干擾物質(zhì)，并對干擾和交叉的程度進行量化。

應(yīng)充分考慮干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響。申請人可參考《定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導(dǎo)原則》并結(jié)合實際情況選擇適用的干擾物質(zhì)進行評價。

常見的內(nèi)源性干擾物質(zhì)包括膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等，常見的外源性干擾物質(zhì)包括樣本添加劑（如抗凝劑等）、常用藥物（如抗壞血酸等）及其代謝物、患者群體使用的藥物及其代謝物、膳食物質(zhì)、樣本收集或處理過程中接觸到的物質(zhì)，樣本污染物；亦應(yīng)考慮文獻中已報道的對類似試劑或測量程序存在干擾的物質(zhì)。

研究的干擾物濃度應(yīng)覆蓋臨床樣本中的最高濃度（最差情形），并對干擾的程度進行量化。待評價的葡萄糖樣本濃度建議采用至少2個分析物水平的樣本，其濃度應(yīng)在醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上/下限附近。葡萄糖氧化酶法產(chǎn)品需要考慮還原性物質(zhì)干擾，如還原性藥物維生素C、對乙酰氨基酚、多巴胺、布洛芬，以及樣本中尿酸、膽紅素、谷胱甘肽等還原性物質(zhì)產(chǎn)生競爭性抑制，導(dǎo)致測定結(jié)果偏低。此外，因該方法學(xué)的反應(yīng)過程需要氧氣參與，如產(chǎn)品使用校準(zhǔn)曲線代替校準(zhǔn)品進行校準(zhǔn)，還需考慮海拔高度試驗（氧分壓）的影響。

葡萄糖脫氫酶法產(chǎn)品需要考慮麥芽糖、半乳糖、木糖干擾。

4.7線性區(qū)間、測量區(qū)間、擴展測量區(qū)間及可報告區(qū)間

4.7.1線性區(qū)間

線性區(qū)間的研究，需采用高值和零濃度/低值濃度的樣本按比例精確配制的一系列不同濃度的樣本。線性區(qū)間建立時，需配制出較預(yù)期線性區(qū)間更寬的至少9個左右不同濃度的樣本（不包括零濃度樣本），每個樣本進行多次重復(fù)檢測，根據(jù)可接受線性偏差和各濃度的重復(fù)性，確定檢測次數(shù)。采用重復(fù)檢測均值和預(yù)期值進行直線回歸分析，建議采用加權(quán)最小二乘回歸等分析方法，提供散點圖、線性回歸方程、線性相關(guān)系數(shù)（r）及線性偏差，判斷結(jié)果是否滿足可接受標(biāo)準(zhǔn)。優(yōu)先采用真實臨床樣本進行試驗。當(dāng)高濃度臨床樣本無法獲得時，可以采用添加的方式獲得高濃度樣本，添加體積不得超過總體積的10%。 當(dāng)?shù)蜐舛?零濃度臨床樣本無法獲得時，可采用稀釋的方法獲得低濃度樣本，但稀釋不應(yīng)對樣本產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)，可通過回收、線性或其他適當(dāng)?shù)姆椒ㄓ枰宰C明。

驗證線性區(qū)間時，可將接近線性區(qū)間上限的高值樣本按一定比例稀釋至少為5個不同濃度，每一濃度的樣本至少重復(fù)測定2次，計算其平均值，求出線性方程。

4.7.2測量區(qū)間

測量區(qū)間，也稱分析測量區(qū)間，在該區(qū)間內(nèi)，臨床樣本在未經(jīng)稀釋、濃縮，或非常規(guī)測量程序中步驟的其他前處理情況下，檢測結(jié)果的線性偏差、不精密度和偏倚均在可接受范圍內(nèi)。測量區(qū)間下限為定量限，線性區(qū)間包含測量區(qū)間。

4.7.3擴展測量區(qū)間和可報告區(qū)間

如對超出測量區(qū)間濃度的樣本可進行稀釋后檢測，應(yīng)研究合適的稀釋液和稀釋倍數(shù)，從而確定試劑的擴展測量區(qū)間和可報告區(qū)間。兩者上限均為測量區(qū)間上限×稀釋倍數(shù)，擴展測量區(qū)間的下限為測量區(qū)間上限，可報告區(qū)間下限為檢出限。

4.8試劑空白吸光度

用純化水或空白樣本測試試劑（盒），重復(fù)測定2次，求出均值即為試劑空白吸光度，應(yīng)符合企業(yè)規(guī)定要求，且己糖激酶法試劑應(yīng)不大于0.6，氧化酶法試劑應(yīng)不大于0.2。

4.9分析靈敏度

用已知濃度的樣本測試試劑（盒），記錄在試劑盒規(guī)定參數(shù)下產(chǎn)生的吸光度改變。換算為n單位的吸光度差值（△A），應(yīng)符合企業(yè)規(guī)定要求。

4.10校準(zhǔn)品/質(zhì)控品

申請人應(yīng)對校準(zhǔn)品的溯源情況進行詳細描述，提供溯源鏈，并對溯源的具體步驟，溯源鏈逐級的量值傳遞的方式、不確定度、互換性等進行詳細描述。

目前血糖參考方法有JCTLM列表推薦的ID LC-MS/MS葡萄糖參考測量程序、CDC葡萄糖己糖激酶參考方法等；目前尿糖參考方法有JCTLM列表推薦的葡萄糖DGKL參考方法等。建議校準(zhǔn)品溯源至參考方法或參考物質(zhì)。

質(zhì)控品參照《質(zhì)控品注冊審查指導(dǎo)原則——質(zhì)控品賦值研究》提交在所有適用機型上進行的賦值和驗證資料。

校準(zhǔn)品、質(zhì)控品還需參照YY/T 1549《生化分析儀用校準(zhǔn)物》、YY/T 1662《生化分析儀用質(zhì)控物》，對質(zhì)控品的可接受區(qū)間/值以及校準(zhǔn)品/質(zhì)控品的均勻性進行評價。

如校準(zhǔn)品/質(zhì)控品的基質(zhì)不同于臨床常用樣本類型，還應(yīng)提交基質(zhì)效應(yīng)研究資料。

5.穩(wěn)定性研究資料

一般應(yīng)包含研究方案、報告和數(shù)據(jù)三部分內(nèi)容。

5.1實時穩(wěn)定性（貨架有效期）

提交至少三批申報產(chǎn)品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的實時穩(wěn)定性研究資料。明確儲存的環(huán)境條件（如溫度、濕度和光照）及有效期。如產(chǎn)品中包含校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，應(yīng)提交被測量漂移（被測量隨時間的變化）的研究。

5.2使用穩(wěn)定性

提交申報產(chǎn)品實際使用期間穩(wěn)定性的研究資料，應(yīng)包括所有組成成分的開封穩(wěn)定性。適用時提交復(fù)溶穩(wěn)定性、機載穩(wěn)定性及凍融次數(shù)研究資料等。如產(chǎn)品中包含校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，應(yīng)提交被測量漂移（被測量隨時間的變化）的研究，還應(yīng)提交校準(zhǔn)頻率或校準(zhǔn)穩(wěn)定性研究資料。明確產(chǎn)品使用的溫度、濕度條件等。

5.3運輸穩(wěn)定性

提交申報產(chǎn)品可在特定或者預(yù)期的條件下運輸?shù)难芯抠Y料，應(yīng)說明產(chǎn)品正確運輸?shù)沫h(huán)境條件（如溫度、濕度、光照和機械保護等）。同時說明產(chǎn)品的包裝方式以及暴露的最差運輸條件。運輸穩(wěn)定性研究可結(jié)合于實時穩(wěn)定性研究中。試劑的穩(wěn)定性研究應(yīng)注意選取代表性包裝規(guī)格進行研究。

試劑穩(wěn)定性內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)按照《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則（2023年修訂版）》在說明書【儲存條件及有效期】中進行詳細描述。

6.參考區(qū)間確定資料

根據(jù)適用樣本類型（血清/血漿、尿液），給出以下情況下的參考區(qū)間：

早餐前（空腹）血糖的正常值

尿液葡萄糖的正常值

除以上參考區(qū)間，申報產(chǎn)品也可根據(jù)已發(fā)布實施的診療指南，提供餐后2小時血糖、口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）的參考區(qū)間。申報產(chǎn)品可以通過建立或驗證的方法確定產(chǎn)品的參考區(qū)間，可參照《體外診斷試劑參考區(qū)間確定注冊審查指導(dǎo)原則》的要求。

無論是建立自己的參考區(qū)間或驗證參考區(qū)間，都要確保參考區(qū)間的可溯源性，記錄確定參考區(qū)間的所有步驟，包括參考個體的選擇、分析前因素、樣本檢測以及統(tǒng)計分析方法等。

7.其他資料

7.1 三批產(chǎn)品的生產(chǎn)及自檢記錄。

7.2 證明產(chǎn)品安全性、有效性的其他非臨床研究資料。

（四）臨床評價資料

葡萄糖檢測試劑已列入《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》，申請人可按照《免于臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價技術(shù)指導(dǎo)原則》提交臨床評價資料。應(yīng)注意樣本采集、處理、保存等環(huán)節(jié)是否符合申報產(chǎn)品和對比產(chǎn)品說明書要求。應(yīng)針對血清/血漿、尿液樣本分別開展臨床研究。

如預(yù)期用途超出《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》中的描述，應(yīng)進行臨床試驗。臨床試驗的倫理、方案的制定以及報告的撰寫等臨床試驗資料均應(yīng)符合《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》、《醫(yī)療器械臨床試驗質(zhì)量管理規(guī)范》的要求。

當(dāng)待評價試劑與對比試劑結(jié)果不一致時，可能源于待評價試劑或?qū)Ρ仍噭┑恼`差，不一致結(jié)果可通過“診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)”或其他合理方法進行確認并分析原因，確認結(jié)果不應(yīng)納入統(tǒng)計分析。

（五）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿

產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進行標(biāo)注，并單獨列明參考文獻的相關(guān)信息。

以下僅對葡萄糖檢測試劑說明書的重點內(nèi)容進行詳細說明，說明書其他內(nèi)容應(yīng)根據(jù)《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》要求進行編寫。

1.【產(chǎn)品名稱】

通用名稱，試劑名稱由三部分組成：被測物名稱、用途、方法或原理。

例如：葡萄糖測定試劑盒（己糖激酶法）。

2.【預(yù)期用途】

首段說明試劑盒用于體外定量測定人血清、血漿或尿液等樣本中的葡萄糖。

第二段應(yīng)詳細說明試劑盒適用于糖尿病、內(nèi)分泌紊亂等病理性變化狀態(tài)下以及妊娠期、體檢等健康狀態(tài)下人群評估血糖水平、尿糖水平。

其余段落對葡萄糖進行背景介紹、說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒炇以\斷方法；說明與預(yù)期用途相關(guān)的臨床背景情況；說明被測分析物與臨床適應(yīng)證的關(guān)系。明確與葡萄糖檢測相關(guān)的臨床適應(yīng)證背景情況。說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒炇以\斷方法。

3.【檢驗原理】

應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要成分簡要說明檢驗的原理、方法，必要時可采取圖示方法表示，檢驗原理的描述應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要組成成分、被測物和產(chǎn)物的關(guān)系進行描述。

例如：葡萄糖和三磷酸腺苷（ATP）在己糖激酶（HK）的催化作用下發(fā)生磷酸化反應(yīng)，生成葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）和二磷酸腺苷（ADP）。G-6-P在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PD）催化下脫氫，氧化生成6-磷酸葡萄糖酸（6-PG），同時使煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+) 或煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD+ )分別還原成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）或還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）。

反應(yīng)式如下：

4.【主要組成成分】

4.1對于產(chǎn)品中包含的試劑組分：

4.1.1說明各組分的名稱、數(shù)量、裝量。

4.1.2說明各組分中的核心反應(yīng)成分（如酶等）、基質(zhì)、防腐劑。生物活性材料應(yīng)提供其生物學(xué)來源和特性。應(yīng)明確酶組分在基質(zhì)中的濃度、比例等信息。

4.1.3多組分試劑盒應(yīng)明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。

4.1.3如盒中包含耗材，應(yīng)列明耗材名稱、數(shù)量等信息。

4.2需要但未提供的試劑：

對于產(chǎn)品中不包含，但對檢測必需的試劑如單獨注冊的校準(zhǔn)品/質(zhì)控品等應(yīng)列明各試劑的產(chǎn)品名稱、注冊人（備案人）、貨號及其注冊證編號（備案編號）

4.3需要但未提供的軟件

若有配合使用的單獨注冊的軟件，列明軟件名稱、發(fā)布版本號、注冊人、注冊證號等信息。

4.4對于校準(zhǔn)品和質(zhì)控品

4.4.1說明濃度水平、核心反應(yīng)成分及其生物學(xué)來源，明確基質(zhì)、防腐劑等。

4.4.2注明校準(zhǔn)品的定值及其溯源性。

4.4.3注明質(zhì)控品的靶值和靶值范圍。

4.4.4若校準(zhǔn)品或質(zhì)控品的值為批特異，可注明批特異，并附單獨的靶值。

4.5如配合使用試劑或軟件正在進行注冊（備案），注冊證編號（備案編號）可先留空，在完成注冊（備案）后由注冊人（備案人）自行添加。

5.【儲存條件及有效期】

首段明確貨架保存條件和有效期，如2～8℃保存，有效期12個月。同時明確特殊保存條件，如禁止冷凍、光線和濕度要求等。

其他段落描述以下內(nèi)容：

明確各組分的使用穩(wěn)定性，包括開封保存條件和保存時長、凍融次數(shù)、機載穩(wěn)定性等。

明確生產(chǎn)日期、使用期限/失效日期/有效期至見標(biāo)簽。

若各組分的保存條件不一致，應(yīng)分別描述。

若各組分的有效期不同，則試劑盒的有效期為最短保存時間。

6.【適用儀器】

應(yīng)明確可適用的具體品牌、型號的儀器。

7.【樣本要求】

重點明確以下內(nèi)容：樣本類型、處理方式、樣本收集過程中的注意事項、保存期限及保存條件等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否須恢復(fù)室溫，可凍融次數(shù)。血漿樣本應(yīng)注明對抗凝劑的要求。尿液樣本還應(yīng)詳細描述對采集條件等可能影響檢測結(jié)果的要求。

8.【檢驗方法】

詳細說明試驗操作的各個步驟，包括：

8.1試劑配制方法、注意事項。

8.2試驗條件：溫度、時間、測定波長、試劑用量、樣本用量反應(yīng)時間等以及試驗過程中的注意事項。

8.3校準(zhǔn)程序：校準(zhǔn)品的使用方法、注意事項、校準(zhǔn)曲線的繪制。校準(zhǔn)有效期及需要重新校準(zhǔn)的情況，推薦的校準(zhǔn)周期等。

8.4質(zhì)量控制程序：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋等。

8.5檢驗結(jié)果的計算：應(yīng)明確檢驗結(jié)果的計算或表達方法

9.【參考區(qū)間】

明確參考區(qū)間，并簡要說明建立和驗證參考區(qū)間的基本信息，包括：樣本量、人群特征（如性別、年齡、種族等）和采用的統(tǒng)計學(xué)方法。

10.【檢驗結(jié)果的解釋】

應(yīng)根據(jù)其臨床意義對可能出現(xiàn)的結(jié)果進行合理的解釋。

說明在何種情況下應(yīng)對樣本進行重復(fù)測試，以及在重復(fù)測試時需要采取的樣本處理方式。

若超過線性區(qū)間上限的高濃度樣本可稀釋后測定，則應(yīng)說明樣本的最大可稀釋倍數(shù)、稀釋溶液等信息并提供經(jīng)確認的稀釋程序。

11.【檢驗方法的局限性】

綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測方法等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進行相關(guān)說明，申請人選擇適用的條款在產(chǎn)品說明書中予以闡述。至少應(yīng)包括以下內(nèi)容：

說明檢測結(jié)果僅供臨床參考，不能單獨作為確診或排除病例的依據(jù)。

12.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

此項內(nèi)容為分析性能研究資料和臨床評價資料的總結(jié)，應(yīng):

12.1概括描述每項分析性能研究如準(zhǔn)確度/正確度、精密度、靈敏度、測量區(qū)間及可報告區(qū)間、分析特異性、高劑量鉤狀效應(yīng)、包容性等適用項目的研究方法和結(jié)果。

12.2概括描述臨床評價包括免于臨床試驗的臨床評價和臨床試驗的方法和結(jié)果。

13.【注意事項】

13.1注明必要的注意事項，如本品僅用于體外診斷等。

13.2采用不同方法學(xué)的試劑檢測所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較，以免造成錯誤的醫(yī)學(xué)解釋；建議實驗室在發(fā)給臨床醫(yī)生的檢測報告注明所用試劑特征。

13.3如該產(chǎn)品含有人源或動物源、微生物源性物質(zhì)，應(yīng)給出具有潛在感染性的警告。如：試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他人源組分， 雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab 等項目的測定，但截至目前，沒有任何一項測定可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

13.4廢棄物的處理方式。對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源進行處理。

（六）質(zhì)量管理體系文件

應(yīng)按《體外診斷試劑注冊申報資料要求及說明》的要求提交質(zhì)量管理體系文件。

三、參考文獻

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[11]國家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械技術(shù)審評中心.定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導(dǎo)原則:國家藥監(jiān)局器審中心通告2022年第32號[Z].

[12]國家市場監(jiān)督管理總局.體外診斷試劑注冊與備案管理辦法:國家市場監(jiān)督管理總局令第48號[Z].

[13]國家藥品監(jiān)督管理局.體外診斷試劑分類規(guī)則:國家藥監(jiān)局公告2021年第129號[Z].

[14]國家藥品監(jiān)督管理局.醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則:國家藥監(jiān)局公告2022年第8號[Z].

[15]中華人民共和國國務(wù)院.醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例:中華人民共和國國務(wù)院令第739號[Z].

[16]國家藥品監(jiān)督管理局.免于臨床試驗體外診斷試劑目錄:國家藥監(jiān)局通告2021年第70號[Z].

[17]國家藥品監(jiān)督管理局.免于臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價技術(shù)指導(dǎo)原則:國家藥監(jiān)局通告2021年第74號[Z].

[18]國家藥品監(jiān)督管理局.體外診斷試劑注冊申報資料要求及說明:國家藥監(jiān)局通告2021年第122號[Z].