附件：C-肽測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2018年第8號）.doc

C-肽測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對C-肽測定試劑注冊申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評部門審評注冊申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對C-肽測定試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

C-肽測定試劑是指利用抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)方法對人血清、血漿或其他體液中的C-肽（C-Peptide）進(jìn)行體外定量檢測的試劑。本指導(dǎo)原則適用于以酶標(biāo)記、（電）化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、（時(shí)間分辨）熒光標(biāo)記等標(biāo)記方法標(biāo)記抗體，以微孔板、管、磁顆粒、微珠和塑料珠等為載體包被抗體，定量檢測C-肽的免疫分析試劑，不適用于以膠體金或其他方法標(biāo)記的定性或半定量測定的C-肽試劑、用放射性同位素標(biāo)記的各類放射免疫或免疫放射測定試劑。

根據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）和《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號），C-肽測定試劑的管理類別為二類，分類代碼為6840。本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行首次注冊申報(bào)和相關(guān)許可事項(xiàng)變更的產(chǎn)品。

二、注冊申報(bào)資料要求

（一）綜述資料

C-肽（C-Peptide）又稱連接肽，是胰島β細(xì)胞的分泌產(chǎn)物，它與胰島素有一個(gè)共同的前體─胰島素原。一個(gè)分子的胰島素原經(jīng)酶切后，裂解成一個(gè)分子的胰島素和一個(gè)分子的C-肽。正常情況下，人胰島細(xì)胞主要分泌產(chǎn)生并釋放到血液中的是胰島素，在產(chǎn)生胰島素的一系列的過程中，胰島細(xì)胞首先合成胰島素原。胰島素原是一條很長的蛋白質(zhì)鏈，胰島素原在酶的作用下被分解為三段，前后兩段又重新聯(lián)接，成為有A鏈和B鏈組成的胰島素，中間一段獨(dú)立出來，稱為C-肽。C-肽是由31個(gè)氨基酸組成的連接肽，分子量約3021道爾頓。

C-肽本身無生物活性，由于胰島素和C-肽是以等摩爾濃度分泌的，進(jìn)入血液后，大部分胰島素經(jīng)肝臟被滅活，而C-肽被肝臟攝取很少，加上C-肽降解速度比胰島素慢，所以血液中C-肽濃度比胰島素高，一般在5倍以上，故C-肽更能準(zhǔn)確反映胰島β細(xì)胞的功能。因此測定血液中C-肽水平可作為胰島β細(xì)胞分泌功能的重要指標(biāo)，特別對用外源性胰島素治療的糖尿病人更需要測定其C-肽，因胰島素制劑中不含C-肽，不影響患者血液中C-肽的水平。

C-肽水平測定可應(yīng)用于糖尿病分型及了解糖尿病患者胰島β細(xì)胞的功能。無論1型或2型糖尿病患者，初病時(shí)都應(yīng)通過檢測C-肽或胰島素水平以判斷胰島β細(xì)胞功能。由于外周血中C-肽被肝細(xì)胞攝取少，更能反映胰島β細(xì)胞分泌時(shí)濃度，加之其基礎(chǔ)清除率穩(wěn)定，不受多種因素影響，故C-肽釋放試驗(yàn)曲線下面積優(yōu)于胰島素釋放試驗(yàn)，更能代表胰島β細(xì)胞功能。另外，對于應(yīng)用外源性胰島素的測定，由于C-肽與胰島素抗體無交叉反應(yīng)，不受胰島素抗體干擾，外源性胰島素又不含C-肽，故C-肽測定顯得更為重要，對了解胰島β細(xì)胞功能情況、指導(dǎo)治療有積極作用。

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性方面的說明、研究結(jié)果的總結(jié)評價(jià)以及同類產(chǎn)品在國內(nèi)外上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、臨床應(yīng)用情況、申報(bào)注冊產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的異同方面進(jìn)行介紹。應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的相關(guān)要求。

（二）主要原材料研究資料（如需提供）

1.測定試劑所用抗體的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細(xì)試驗(yàn)資料。如抗體為申請人自制，則應(yīng)詳述抗體的名稱及生物學(xué)來源，申請人對該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求（如外觀、純度、蛋白濃度、效價(jià)等），且其生產(chǎn)工藝必須相對穩(wěn)定，并對其工藝有相關(guān)的驗(yàn)證。同時(shí)確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；如為申請人外購，則應(yīng)詳述其名稱及生物學(xué)來源，外購方名稱，提交外購方出具的抗體性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書，詳述申請人對該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請人確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)。

2.校準(zhǔn)品、質(zhì)控品（如有）的原料選擇、制備、定值過程及試驗(yàn)資料。

3.申請人應(yīng)根據(jù)GB/T 21415—2008/ISO 17511：2003《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》提供所用校準(zhǔn)品的來源、賦值過程和相應(yīng)指標(biāo)、以及不確定度等內(nèi)容。明確校準(zhǔn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)并提供校準(zhǔn)品的溯源性文件，校準(zhǔn)品應(yīng)溯源至現(xiàn)行的國家標(biāo)準(zhǔn)品或國際標(biāo)準(zhǔn)品。

（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

生產(chǎn)工藝主要包括：各組分制備工藝的研究，包括試劑的配方及工藝關(guān)鍵參數(shù)的確定依據(jù)等。反應(yīng)體系主要包括：反應(yīng)條件、樣本用量、試劑用量等確定的依據(jù)。

1.主要生產(chǎn)工藝介紹，可以流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

2.產(chǎn)品反應(yīng)原理介紹。

3.抗體包被工藝研究：申請人應(yīng)考慮如包被緩沖液及添加量、濃度、時(shí)間、溫度等指標(biāo)對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗(yàn)確定上述指標(biāo)的最佳組合。

4.體系反應(yīng)條件確定：申請人應(yīng)考慮反應(yīng)模式、反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)溫度、洗滌次數(shù)等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗(yàn)確定上述條件的最佳組合。

5.體系中樣本及試劑的加樣方式及添加量確定：申請人應(yīng)考慮樣本加樣方式、加樣量以及試劑添加順序、添加量對產(chǎn)品檢測結(jié)果的影響，通過實(shí)驗(yàn)確定最佳的樣本及試劑的添加方式和添加量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測，申請人還應(yīng)對可用于樣本稀釋的基質(zhì)或處理方法進(jìn)行研究，通過試驗(yàn)確定樣本稀釋基質(zhì)或處理方法。確定反應(yīng)所需其他試劑用量（校準(zhǔn)品、標(biāo)記物、底物等）的研究資料。固相載體、信號放大系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹及研究資料。

6.樣本類型的研究（如適用）

如果試劑盒適用樣本類型包括血漿樣本，應(yīng)采用各種抗凝劑抗凝的血漿樣本分別與血清樣本進(jìn)行對比實(shí)驗(yàn)研究。方法為對比線性范圍內(nèi)的同一病人的血清和血漿樣本，應(yīng)包含醫(yī)學(xué)決定水平以及低值濃度樣本進(jìn)行檢測以驗(yàn)證申報(bào)試劑對于血清和血漿樣本檢測結(jié)果的一致性。如同一病人的不同抗凝劑抗凝的低值血漿樣本難以獲得，可采用高值血清樣本分別添加到健康人的不同抗凝劑抗凝的血漿樣本中進(jìn)行驗(yàn)證。

（四）分析性能評估資料

企業(yè)應(yīng)提交產(chǎn)品研制階段進(jìn)行的所有性能驗(yàn)證的研究資料，包括具體研究方法、質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。建議選擇不少于3批產(chǎn)品對以下分析性能進(jìn)行研究，包括空白限、線性、準(zhǔn)確度、精密度、特異性等指標(biāo)，具體研究方法建議參考相關(guān)的美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會批準(zhǔn)指南（CLSI—EP）或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件進(jìn)行。

對于適用多個(gè)機(jī)型的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說明書【適用儀器】項(xiàng)中所列的所有型號儀器的性能評估資料（主要性能）。如產(chǎn)品涉及不同包裝規(guī)格，則需要提供每個(gè)包裝規(guī)格在不同型號儀器上的評估資料；如不同包裝規(guī)格之間不存在性能上的差異，需要提交包裝規(guī)格間不存在性能差異的說明。

1.準(zhǔn)確度

對準(zhǔn)確度的評價(jià)通常采用與參考物質(zhì)（國家標(biāo)準(zhǔn)品或國際標(biāo)準(zhǔn)品）的偏差分析。將參考物質(zhì)配制成指定濃度的準(zhǔn)確度樣品進(jìn)行檢測，計(jì)算相對偏差。

2.空白限

空白限的確定常使用同批號試劑對零濃度校準(zhǔn)品（或校準(zhǔn)品稀釋液）進(jìn)行至少20次重復(fù)檢測，計(jì)算所得信號值均值和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），將（+2SD）帶入劑量—反應(yīng)曲線，計(jì)算出的濃度值即為空白限。

3.線性

建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實(shí)際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的混合人血清，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。建立一種定量測定方法的線性范圍時(shí)，需在預(yù)期測定范圍內(nèi)選擇7—11個(gè)濃度水平。例如，將預(yù)期測定范圍加寬至130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點(diǎn)直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，確定線性范圍。

劑量—反應(yīng)曲線的線性可使用試劑盒校準(zhǔn)品進(jìn)行驗(yàn)證，用雙對數(shù)或其他適當(dāng)?shù)臄?shù)學(xué)模型擬合，計(jì)算劑量—反應(yīng)曲線的線性相關(guān)系數(shù)r。對于未配備校準(zhǔn)品的試劑盒，取C-肽國家（或國際）標(biāo)準(zhǔn)品（或其他高濃度樣本），按照試劑盒說明書聲稱的線性范圍，配制適當(dāng)?shù)模ㄒ话銘?yīng)不少于5個(gè)）濃度點(diǎn)，建立相應(yīng)的劑量—反應(yīng)曲線，計(jì)算線性相關(guān)系數(shù)r。

也可以采用高濃度樣本稀釋的方法驗(yàn)證線性，將接近線性區(qū)間上限的高值樣本按一定比例稀釋為至少5個(gè)濃度，其中低值濃度的樣本須接近線性區(qū)間的下限。將測定濃度的平均值與理論濃度或稀釋比例用最小二乘法進(jìn)行直線擬合，并計(jì)算線性相關(guān)系數(shù)r。

4.精密度     

精密度的評估應(yīng)使用3個(gè)濃度水平的質(zhì)控品或樣本進(jìn)行測定，濃度包括參考區(qū)間附近的濃度值、中濃度值、高濃度值。

一般包括批內(nèi)、批間精密度的評價(jià)。

（1）批內(nèi)精密度：同一批次的測定試劑對線性范圍內(nèi)的3個(gè)濃度的質(zhì)控品或樣本進(jìn)行重復(fù)檢測10次，計(jì)算10次測量結(jié)果的平均值（x）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），根據(jù)公式CV=SD/x×100%得出變異系數(shù)。

（2）批間精密度：用不少于3個(gè)批次的測定試劑對線性范圍內(nèi)的3個(gè)濃度的質(zhì)控品或樣本各重復(fù)檢測10次，計(jì)算3批測量結(jié)果的平均值（x）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），根據(jù)公式CV=SD/x×100%得出變異系數(shù)。

5.特異性

（1）交叉反應(yīng)：易產(chǎn)生交叉反應(yīng)的其他蛋白質(zhì)激素等的驗(yàn)證情況，應(yīng)至少驗(yàn)證與人胰島素原和人胰島素樣本的交叉反應(yīng)情況。如無法獲得單純高濃度的人胰島素原或人胰島素樣本，可采用純品物質(zhì)分別添加到健康人樣本、參考區(qū)間附近樣本、中濃度值樣本中的方式進(jìn)行驗(yàn)證。

（2）干擾物質(zhì)：樣本中常見干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響，如高脂、黃疸、類風(fēng)濕因子、嗜異性抗體等干擾因子對檢測結(jié)果的影響。如無法獲得含有高濃度干擾物質(zhì)的樣本，可采用純品物質(zhì)分別添加到健康人樣本、參考區(qū)間附近樣本、中濃度值樣本中的方式進(jìn)行驗(yàn)證。建議將研究結(jié)果在說明書中進(jìn)行說明。

6.鉤狀（Hook）效應(yīng)（如有）：說明不會產(chǎn)生Hook效應(yīng)的濃度上限或相關(guān)研究，如需稀釋，應(yīng)注明對稀釋液的要求、最佳或最大稀釋比例。每個(gè)濃度重復(fù)3份，對鉤狀效應(yīng)進(jìn)行合理的驗(yàn)證。建議在產(chǎn)品說明書上明示對鉤狀效應(yīng)的研究結(jié)果。

7.方法學(xué)比對（如有）

采用參考方法或國內(nèi)外普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類試劑作為參比方法，與擬申報(bào)試劑同時(shí)檢測一批病人樣品，從測定結(jié)果間的差異了解擬申報(bào)試劑與參比方法間的偏倚。如偏倚很小或在允許的誤差范圍內(nèi)，說明兩檢測系統(tǒng)對病人標(biāo)本測定結(jié)果基本相符，對同一份臨床樣本的醫(yī)學(xué)解釋，擬申報(bào)試劑與參比方法相比不會產(chǎn)生差異結(jié)果。

在實(shí)施方法學(xué)比對前，應(yīng)分別對擬申報(bào)試劑和對比試劑進(jìn)行初步評估，只有在確認(rèn)兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方可進(jìn)行比對試驗(yàn)。方法學(xué)比對時(shí)應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

性能指標(biāo)的評價(jià)方法并無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)可依，可根據(jù)不同的試劑特征進(jìn)行，前提是必須保證研究的科學(xué)合理性。具體實(shí)驗(yàn)方法可以參考相關(guān)的CLSI—EP文件或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件進(jìn)行。

（五）參考區(qū)間確定資料

參考區(qū)間確定所采用的樣本來源、確定方法及詳細(xì)的試驗(yàn)資料。樣本來源覆蓋年齡、性別等因素，盡可能考慮樣本來源的多樣性、代表性。建議參考CLSI/NCCLS EP28—A3C進(jìn)行相應(yīng)研究。

（六）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報(bào)試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。試劑穩(wěn)定性主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性（有效期）、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性等研究，申請人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

C-肽在樣本中不穩(wěn)定，需對樣本穩(wěn)定性進(jìn)行研究，主要包括樣本在室溫、冷藏或冷凍保存條件下C-肽含量的穩(wěn)定性驗(yàn)證，可以在合理的溫度范圍內(nèi)選擇溫度點(diǎn)（溫度范圍），每間隔一定的時(shí)間段即對儲存樣本進(jìn)行穩(wěn)定性驗(yàn)證，從而確定不同類型樣本的保存條件及使用期限。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進(jìn)行研究。

試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項(xiàng)中分別進(jìn)行詳細(xì)說明。

（七）臨床評價(jià)資料

1.臨床試驗(yàn)研究方法

選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為對比試劑，采用試驗(yàn)用體外診斷試劑（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行比較研究試驗(yàn)，證明本產(chǎn)品與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。對比試劑盡量選擇方法學(xué)相同、線性范圍、參考區(qū)間及精密度等性能接近的同類產(chǎn)品作為對比試劑。

2.臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的選擇

（1）應(yīng)在至少兩家經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理總局備案的臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)。

（2）臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)有能力提供臨床試驗(yàn)所需的各類樣本，實(shí)驗(yàn)操作人員有足夠的時(shí)間熟悉檢測系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評價(jià)方案。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，考核試劑和對比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，定期對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。

3.臨床試驗(yàn)方案

臨床試驗(yàn)實(shí)施前，研究人員應(yīng)從臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床研究方案。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)基本一致，且保證在整個(gè)臨床試驗(yàn)過程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動。整個(gè)試驗(yàn)過程應(yīng)在臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)并由本實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員操作完成，申報(bào)單位的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的樣本納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的樣本再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗(yàn)操作過程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)采用盲法及樣本隨機(jī)分配以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀性。臨床試驗(yàn)中所涉及的樣本類型應(yīng)與產(chǎn)品說明書一致，且每種樣本類型例數(shù)的選擇應(yīng)符合基本的統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)選用的對比試劑應(yīng)一致，對比試劑的適用機(jī)型盡量相同，如不相同需評估不同機(jī)型間檢測結(jié)果的一致性后選用，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

4.研究對象選擇

4.1臨床試驗(yàn)樣本量的確定：在符合指導(dǎo)原則有關(guān)最低樣本要求的前提下，還應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。

4.1.1對于非同源性的樣本類型，每種樣本類型臨床試驗(yàn)的總樣本數(shù)至少為200例。對于同源的不同樣本類型，其中一種樣本類型臨床試驗(yàn)的樣本數(shù)至少為200例，其他樣本類型再做不少于100例的可比性驗(yàn)證，并在至少2家（含2家）臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)完成。

4.1.2應(yīng)考慮樣本量的分布，各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)樣本量和樣本分布應(yīng)相對均衡。

4.2樣本濃度應(yīng)覆蓋考核試劑線性范圍，盡可能均勻分布。盡可能使不少于30%樣本的測定值處于參考區(qū)間以外，但在線性范圍內(nèi)。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對臨床試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法，如相關(guān)分析、線性回歸等。對于對比實(shí)驗(yàn)的等效性研究，最常用是對考核試劑和對比試劑兩組檢測結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，以y=a+bx和R2的形式給出回歸分析的擬合方程，其中：y是考核試劑結(jié)果，x是對比試劑結(jié)果，b是方程斜率，a是y軸截距，R2是判定系數(shù)，r是相關(guān)系數(shù)，同時(shí)應(yīng)給出b的95%（或99%）置信區(qū)間。結(jié)合臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的對比情況，統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，應(yīng)可以證明兩種方法的檢測結(jié)果具有較好的相關(guān)性。

6.臨床試驗(yàn)總結(jié)報(bào)告撰寫

臨床試驗(yàn)總結(jié)報(bào)告應(yīng)對試驗(yàn)的整體設(shè)計(jì)及各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，對整個(gè)臨床試驗(yàn)實(shí)施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法。具體撰寫內(nèi)容應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）的要求。

（八）產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析資料

申請人應(yīng)考慮產(chǎn)品壽命周期的各個(gè)環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、可能的使用錯(cuò)誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預(yù)見的危害等方面的判定以及對患者風(fēng)險(xiǎn)的估計(jì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析，應(yīng)符合YY/T 0316—2016/ISO 14971：2007《醫(yī)療器械 風(fēng)險(xiǎn)管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》及附錄H的要求。

風(fēng)險(xiǎn)分析資料應(yīng)包含以下內(nèi)容：

1.概述：簡要介紹風(fēng)險(xiǎn)分析資料的編制依據(jù)、適用范圍、產(chǎn)品描述、風(fēng)險(xiǎn)管理計(jì)劃及實(shí)施情況等。

2.風(fēng)險(xiǎn)管理人員及其職責(zé)分工：明確風(fēng)險(xiǎn)管理小組成員及職責(zé)，制定風(fēng)險(xiǎn)管理流程圖，明確風(fēng)險(xiǎn)管理活動的評審要求等。

3.風(fēng)險(xiǎn)可接受準(zhǔn)則：明確風(fēng)險(xiǎn)可接受的準(zhǔn)則。

4.預(yù)期用途和安全性有關(guān)特征的判定：以YY/T 0316—2016附錄H為基礎(chǔ)，判定產(chǎn)品預(yù)期用途和與安全性有關(guān)的特性，判定已知和可預(yù)見的危害、對患者風(fēng)險(xiǎn)的評估，并形成問題清單。

5.風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)、風(fēng)險(xiǎn)控制和風(fēng)險(xiǎn)控制措施：對每一判定為危害的不正確結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評價(jià)，并制定相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)控制方案及措施。

6.綜合剩余風(fēng)險(xiǎn)的可接受性評價(jià)：對比采取風(fēng)險(xiǎn)控制措施前后的風(fēng)險(xiǎn)情況，對剩余風(fēng)險(xiǎn)的可接受性進(jìn)行評價(jià)。

7.風(fēng)險(xiǎn)控制措施驗(yàn)證：對風(fēng)險(xiǎn)控制措施的有效性進(jìn)行驗(yàn)證分析。

8.生產(chǎn)和生產(chǎn)后監(jiān)測：對產(chǎn)品生產(chǎn)和生產(chǎn)后的性能進(jìn)行內(nèi)部和外部的監(jiān)測。內(nèi)部監(jiān)測包括生產(chǎn)過程控制，外部監(jiān)測包括用戶投訴、不良事件、第三方性能評價(jià)等。本項(xiàng)內(nèi)容由產(chǎn)品上市后補(bǔ)充，產(chǎn)品注冊時(shí)提供監(jiān)測信息表格的設(shè)計(jì)內(nèi)容。

9.風(fēng)險(xiǎn)管理評審結(jié)論：風(fēng)險(xiǎn)管理小組下達(dá)風(fēng)險(xiǎn)評審結(jié)論。

（九）產(chǎn)品技術(shù)要求

產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）和《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的相關(guān)規(guī)定。

如果擬申報(bào)試劑已有相應(yīng)的國家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，則產(chǎn)品技術(shù)要求不得低于上述標(biāo)準(zhǔn)要求。

作為定量檢測試劑，產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)主要包括以下性能指標(biāo)：外觀、空白限、線性、準(zhǔn)確度、精密度、特異性等。

（十）產(chǎn)品注冊檢驗(yàn)報(bào)告

根據(jù)《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的要求，應(yīng)提供具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗(yàn)資質(zhì)和承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的產(chǎn)品注冊檢驗(yàn)報(bào)告和產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評價(jià)意見。

（十一）產(chǎn)品說明書

說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、樣本要求、檢驗(yàn)方法、檢測結(jié)果的解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)使用者正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報(bào)最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的編寫應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求，境外試劑的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。

根據(jù)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求并結(jié)合C-肽本身的特點(diǎn)，對C-肽測定試劑說明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明，以指導(dǎo)注冊申報(bào)人員更合理地完成說明書編制。

1.【預(yù)期用途】

產(chǎn)品的預(yù)期用途建議描述為：本產(chǎn)品用于定量檢測人血清或血漿或其他體液中C-肽的含量。適用的樣本類型應(yīng)結(jié)合實(shí)際的臨床研究情況進(jìn)行確認(rèn)。若用于特殊受試人群的檢測，應(yīng)明確說明。

簡要介紹C-肽及其評價(jià)胰島β細(xì)胞分泌功能的臨床意義。

2.【檢驗(yàn)原理】

詳細(xì)說明檢驗(yàn)原理、方法，必要時(shí)可采用圖示方法描述。

3.【主要組成成分】

（1）說明產(chǎn)品包含試劑組分的名稱、數(shù)量等信息，涉及的英文縮寫應(yīng)全部以中文表述。

（2）對于多組分試劑應(yīng)明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。

（3）如試劑盒中包含耗材，應(yīng)列明耗材名稱、數(shù)量等信息。如塑料滴管、封板膜、自封袋等。

（4）對于產(chǎn)品中不包含，但對該試驗(yàn)必需的試劑組分，應(yīng)列出此類試劑的名稱，提供稀釋或混合方法及其他相關(guān)信息。

（5）試劑盒中如包含校準(zhǔn)品和/或質(zhì)控品，應(yīng)說明其主要組成成分及其生物學(xué)來源，應(yīng)注明校準(zhǔn)品的定值及其溯源性，質(zhì)控品的靶值范圍。

4.【儲存條件及有效期】
    根據(jù)產(chǎn)品的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性等穩(wěn)定性研究結(jié)果，對產(chǎn)品的儲存條件及有效期做以下說明：

（1）說明產(chǎn)品的儲存條件及有效期，如：2℃—8℃、-18℃以下或其他溫度條件保存的有效期限。

（2）如果打開包裝后產(chǎn)品或組分的穩(wěn)定性不同于原包裝產(chǎn)品，則打開包裝后產(chǎn)品或組分的儲存條件也必須注明。

5.【適用儀器】

說明可適用的儀器及型號。如適用儀器為酶標(biāo)儀則只需寫明對儀器配置的要求，其他儀器則需寫明廠家及型號（對于同一個(gè)注冊單元的適用儀器可不寫明具體型號，用系列表示）。如不同包裝規(guī)格適用于不同的機(jī)型，可寫明適用關(guān)系。

6.【樣本要求】

重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：

（1）明確本產(chǎn)品適用的樣本類型，血液樣本應(yīng)當(dāng)說明對采血管及抗凝劑的要求，其他樣本應(yīng)說明樣本采集、處理及保存方式。

（2）樣本采集：采集時(shí)間點(diǎn)是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響，盡量減少由于樣本采集或處理不當(dāng)對實(shí)驗(yàn)造成的影響。

（3）樣本處理、運(yùn)送及保存：明確樣本處理方法、樣本的保存條件及期限（短期、長期）等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)的要求。如有需要應(yīng)對高于檢測范圍樣本的稀釋方法進(jìn)行規(guī)定。

7.【檢驗(yàn)方法】

詳細(xì)說明實(shí)驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，包括：
    （1）實(shí)驗(yàn)條件：實(shí)驗(yàn)環(huán)境的溫度、濕度等注意事項(xiàng)，檢驗(yàn)試劑及樣本復(fù)溫等要求。
    （2）試劑準(zhǔn)備及配制方法、注意事項(xiàng)。
    （3）待測樣本的預(yù)處理方法、步驟及注意事項(xiàng)。
    （4）明確樣本檢測的操作步驟。

（5）校準(zhǔn)：校準(zhǔn)品的使用方法、注意事項(xiàng)、校準(zhǔn)曲線的繪制方法。對適用于具有校準(zhǔn)曲線保存功能檢測儀器的產(chǎn)品，應(yīng)注明校準(zhǔn)周期。

（6）質(zhì)量控制：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等；建議在本部分注明以下字樣：如果質(zhì)控結(jié)果與預(yù)期不符，應(yīng)分析原因并采取糾正措施。

（7）結(jié)果計(jì)算：說明校準(zhǔn)曲線擬合方式及結(jié)果計(jì)算方法。

8.【參考區(qū)間】

應(yīng)注明常用樣本類型的正常參考區(qū)間，簡單介紹設(shè)定該參考區(qū)間所選人群的特征，建議注明以下字樣“建議各實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)際條件及接觸人群建立自己的參考區(qū)間”。

9.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
    對所有可能出現(xiàn)的結(jié)果進(jìn)行合理的解釋：

（1）本試劑的檢測結(jié)果僅供臨床參考，不得作為患者病情評價(jià)的唯一指標(biāo)，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

（2）分析異常值出現(xiàn)的可能因素，明確說明何種情況下需要進(jìn)行重復(fù)檢測，以及在重復(fù)檢測時(shí)對待測樣本可能采取的優(yōu)化條件等進(jìn)行詳述。

（3）超出檢測范圍的樣本怎樣報(bào)告結(jié)果，如要得到準(zhǔn)確的結(jié)果需怎樣處理，如需稀釋，應(yīng)注明稀釋方法、最佳或最大稀釋比例等。

（4）由于方法學(xué)或抗體特異性等原因，使用不同生產(chǎn)商的試劑對同一份樣本進(jìn)行檢測可能會得到不同的檢測結(jié)果，因此，在監(jiān)測過程中，用不同試劑檢測所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較，以免造成錯(cuò)誤的醫(yī)學(xué)解釋；建議實(shí)驗(yàn)室在發(fā)給臨床醫(yī)生的檢測報(bào)告注明所用試劑特征。系列監(jiān)測中如果改變試劑類型，則應(yīng)進(jìn)行額外的連續(xù)性檢測并與原有試劑結(jié)果進(jìn)行平行比較以重新確定基線值。

10.【檢驗(yàn)方法的局限性】

（1）內(nèi)源性干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響。

（2）嗜異性抗體或類風(fēng)濕因子等對檢測結(jié)果的影響。

（3）有關(guān)假性升高或降低結(jié)果的可能性分析。

（4）抗凝劑對檢測結(jié)果的影響（如適用）。

11.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

根據(jù)產(chǎn)品技術(shù)要求及分析性能評估資料對性能指標(biāo)進(jìn)行描述。

12.【注意事項(xiàng)】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

（1）有關(guān)人源組分（如有）的警告，如：試劑內(nèi)質(zhì)控品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過了HBsAg、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等項(xiàng)目的檢測，但截至目前，沒有任何一項(xiàng)檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

（2）建議實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境要求，如溫度、濕度、電磁環(huán)境等。

（3）對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都視為傳染源進(jìn)行處理。

（4）有關(guān)實(shí)驗(yàn)操作、樣本保存及處理等其他注意事項(xiàng)。

13.【標(biāo)識的解釋】

如有圖形或符號，請解釋其代表的意義。如沒有，本項(xiàng)可以缺省。

14.【參考文獻(xiàn)】

注明引用的參考文獻(xiàn)，并在說明書相應(yīng)內(nèi)容處標(biāo)注參考文獻(xiàn)編號。參考文獻(xiàn)的格式參考論文規(guī)范要求。

15.【基本信息】

根據(jù)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求編寫。

16.【醫(yī)療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】

注明該產(chǎn)品的注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號。

17.【說明書核準(zhǔn)日期及修改日期】

注明該產(chǎn)品說明書的核準(zhǔn)日期。如曾進(jìn)行過說明書的變更申請，還應(yīng)該同時(shí)注明說明書的修改日期。

三、審查關(guān)注點(diǎn)

（一）技術(shù)要求中性能指標(biāo)的設(shè)定及檢驗(yàn)方法是否符合相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求；技術(shù)要求的格式是否符合《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的相關(guān)規(guī)定。

（二）產(chǎn)品說明書的編寫內(nèi)容及格式是否符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求。

（三）分析性能評估指標(biāo)及結(jié)果是否滿足產(chǎn)品技術(shù)要求的規(guī)定；是否滿足本指導(dǎo)原則中分析性能評估的要求。

（四）參考區(qū)間確定使用的方法是否合理，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)是否符合統(tǒng)計(jì)學(xué)的相關(guān)要求，結(jié)論是否與說明書聲稱一致。

（五）產(chǎn)品穩(wěn)定性研究方法是否合理，穩(wěn)定性結(jié)論是否與說明書聲稱一致。

（六）臨床試驗(yàn)采用的樣本類型是否滿足產(chǎn)品聲稱的預(yù)期用途，樣本量及臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的選擇、對比試劑的選擇、統(tǒng)計(jì)方法及研究結(jié)果、臨床方案及報(bào)告撰寫的格式等是否符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）對相關(guān)內(nèi)容的規(guī)定。

（七）產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析資料的撰寫是否符合YY/T 0316—2016《醫(yī)療器械 風(fēng)險(xiǎn)管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。

四、編寫單位

河南省食品藥品監(jiān)督管理局。