附件：C反應(yīng)蛋白測(cè)定試劑盒注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2016年修訂版）（2016年第28號(hào)）.doc

C反應(yīng)蛋白測(cè)定試劑盒注冊(cè)
技術(shù)審查指導(dǎo)原則
（2016年修訂版）

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)C反應(yīng)蛋白測(cè)定試劑盒，包括常規(guī)C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒/超敏（高敏）C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒/全量程C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門審評(píng)注冊(cè)申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對(duì)C反應(yīng)蛋白測(cè)定試劑盒的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供申請(qǐng)人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊(cè)審批等行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則適用于基于分光光度法原理，利用手工和半自動(dòng)、全自動(dòng)生化分析儀，在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行對(duì)人血清或血漿中的C-反應(yīng)蛋白進(jìn)行定量檢測(cè)所使用的臨床化學(xué)體外診斷試劑(盒)。

本指導(dǎo)原則不適用于：

1.對(duì)C反應(yīng)蛋白校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的評(píng)價(jià)。

2.各類膠體金標(biāo)記試紙。

二、注冊(cè)申報(bào)資料要求

（一）綜述資料

C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）由肝細(xì)胞合成，在胎兒期產(chǎn)生，非母體胎盤傳遞。其產(chǎn)生機(jī)理是：當(dāng)機(jī)體受感染或組織受損傷時(shí)巨噬細(xì)胞和其他白細(xì)胞等被激活，產(chǎn)生白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-1（IL-1）、腫瘤壞死因子TNF-a等細(xì)胞因子及其他介導(dǎo)物，這些細(xì)胞因子和介導(dǎo)物到達(dá)肝臟，刺激肝細(xì)胞和上皮細(xì)胞合成CRP。在結(jié)構(gòu)上，CRP含5個(gè)多肽鏈亞單位，非共價(jià)地結(jié)合為盤形多聚體，分子量為11.5萬—14萬，CRP是一種典型的急性時(shí)相蛋白。全程C反應(yīng)蛋白包括常規(guī)C反應(yīng)蛋白（常規(guī)CRP）和超敏C反應(yīng)蛋白（超敏CRP）。一次性檢測(cè)常規(guī)CRP和超敏CRP，這種方法被稱為全程C反應(yīng)蛋白檢測(cè)。常規(guī)CRP和超敏CRP在化學(xué)本質(zhì)上無區(qū)別，是同一種物質(zhì)，只是檢測(cè)方法的定量下限不同。

常規(guī)CRP測(cè)定包括定性、半定量和定量分析，可用于評(píng)價(jià)感染，組織損傷和炎癥性疾病。對(duì)于常規(guī)的CRP測(cè)定，參考值通常被認(rèn)為是臨床上含量高于10毫克/升。在健康人群血液中CRP水平低于5毫克/升，而在各種條件下，急性炎癥4—8小時(shí)內(nèi)，CRP值達(dá)到約20至500毫克/升。常規(guī)CRP作為急性炎癥評(píng)估指標(biāo)比紅細(xì)胞沉降率（ESR）和白細(xì)胞計(jì)數(shù)更敏感、更可靠。

超敏C反應(yīng)蛋白線性范圍低端低于常規(guī)CRP，這種較低的范圍可擴(kuò)大使用適應(yīng)癥，C反應(yīng)蛋白是非特異性的，必須結(jié)合臨床癥狀綜合評(píng)估，不能作為特定的疾病或疾病的風(fēng)險(xiǎn)的確診依據(jù)。

超敏C反應(yīng)蛋白常見的用途可作為心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別的輔助手段。配合傳統(tǒng)的急性冠脈綜合征臨床診斷使用，可作為冠狀動(dòng)脈疾病或急性冠脈綜合征復(fù)發(fā)的預(yù)警指示物。

綜述資料主要包括CRP的代謝、產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、參考品的詳細(xì)溯源性、有關(guān)生物安全性的說明、研究結(jié)果的總結(jié)評(píng)價(jià)以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、臨床應(yīng)用情況、性能指標(biāo)等方面寫明擬申報(bào)產(chǎn)品與目前市場(chǎng)上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的異同。應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號(hào)）和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號(hào)）的相關(guān)要求。

人源性材料須對(duì)有關(guān)傳染病（HIV、HBV、HCV、梅毒等）病原體檢測(cè)予以說明，并提供相關(guān)的證明文件。其他動(dòng)物源及微生物來源的材料，應(yīng)當(dāng)提供相應(yīng)的說明文件，證明其在產(chǎn)品運(yùn)輸、使用過程中對(duì)使用者和環(huán)境是安全的，并對(duì)上述原材料所采用的滅活等試驗(yàn)方法予以說明。

（二）主要原材料研究資料（如需提供）

1.試劑盒所用抗體的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細(xì)試驗(yàn)資料。如抗體為申請(qǐng)人自制，則應(yīng)詳述抗體的名稱及生物學(xué)來源，申請(qǐng)人對(duì)該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求（如外觀、純度、蛋白濃度、效價(jià)等），確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)；如抗體為申請(qǐng)人外購(gòu)，則應(yīng)詳述抗體的名稱及生物學(xué)來源，外購(gòu)方名稱，提交外購(gòu)方出具的抗體性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書，詳述申請(qǐng)人對(duì)該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請(qǐng)人確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)。

2.其他主要原輔料的選擇及驗(yàn)證資料，如包被板、反應(yīng)緩沖液等，申請(qǐng)人應(yīng)詳述每一原輔料技術(shù)指標(biāo)的要求以及確定該原輔料作為主要原輔料的依據(jù)。若為外購(gòu)，應(yīng)詳述每一原輔料的外購(gòu)方名稱并提交外購(gòu)方出具的每一原輔料性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書。

3.企業(yè)內(nèi)部參考品的原料選擇、制備、定值過程及試驗(yàn)資料。

4.添加上述原材料、輔料的詳細(xì)信息請(qǐng)以附錄的形式呈現(xiàn)。

（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

1.主要生產(chǎn)工藝介紹，可以流程圖方式表示，并簡(jiǎn)要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

2.產(chǎn)品反應(yīng)原理介紹。

3.抗體包被/致敏工藝研究：申請(qǐng)人應(yīng)考慮如包被液量、濃度、時(shí)間、溫度等指標(biāo)對(duì)產(chǎn)品性能的影響，通過試驗(yàn)確定上述指標(biāo)的最佳組合。

4.實(shí)驗(yàn)體系反應(yīng)條件確定：申請(qǐng)人因考慮反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)溫度、pH值等條件對(duì)產(chǎn)品性能的影響，通過試驗(yàn)確定上述條件的最佳組合。

5.體系中樣品加樣方式及加樣量確定：申請(qǐng)人應(yīng)考慮樣品加樣方式、加樣量對(duì)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果的影響，通過實(shí)驗(yàn)確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測(cè)，申請(qǐng)人還應(yīng)對(duì)可用于樣本稀釋的物質(zhì)或處理方法進(jìn)行研究，通過試驗(yàn)確定最終選擇的用于樣本稀釋的物質(zhì)或處理方法。確定反應(yīng)所需其他物質(zhì)用量（標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)物、底物等）的研究資料。固相載體、顯色(發(fā)光)系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹。

6.不同適用機(jī)型的反應(yīng)條件如果有差異應(yīng)分別詳述。

（四）分析性能評(píng)估資料

企業(yè)應(yīng)提交原廠在產(chǎn)品研制階段對(duì)試劑盒進(jìn)行的所有性能驗(yàn)證的研究資料，包括具體研究方法、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。對(duì)于C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒建議多批產(chǎn)品對(duì)以下分析性能進(jìn)行研究：分析靈敏度、準(zhǔn)確度、特異性、線性范圍、精密度（批間、批內(nèi)）等指標(biāo)，具體研究方法建議參考相關(guān)指導(dǎo)原則。

對(duì)于適用多個(gè)機(jī)型的產(chǎn)品，應(yīng)提供如產(chǎn)品說明書【適用機(jī)型】項(xiàng)中所列的所有型號(hào)儀器的性能評(píng)估資料。

1.試劑空白吸光度

適用時(shí)，用純化水作為樣本重復(fù)測(cè)定2次，計(jì)算試劑空白吸光度（A），測(cè)定結(jié)果均值應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求。

2.分析靈敏度

測(cè)定一份濃度接近40 mg/L的樣品，重復(fù)測(cè)定2次，計(jì)算該樣本產(chǎn)生的吸光度改變與空白吸光度改變的差值（△A），取2次結(jié)果的均值，等比換算出濃度為40mg/L的CRP所產(chǎn)生的吸光度差值（△A），結(jié)果應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求。

測(cè)定一份濃度接近5 mg/L的樣品，重復(fù)測(cè)定2次，計(jì)算該樣本產(chǎn)生的吸光度改變與空白吸光度改變的差值（△A），取2次結(jié)果的均值，等比換算出濃度為5mg/L的CRP所產(chǎn)生的吸光度差值（△A），結(jié)果應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求。

3.檢出限

生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)提供CRP試劑盒的空白限、檢出限及參考區(qū)間等相關(guān)信息。根據(jù)生產(chǎn)企業(yè)提供信息，對(duì)5份濃度近似最低檢出限（LOD）的低值樣本進(jìn)行檢測(cè)，每份樣本檢測(cè)5次，對(duì)檢測(cè)結(jié)果按照大小進(jìn)行排序，符合如下條件，即可認(rèn)為生產(chǎn)企業(yè)提供的空白限和檢出限的設(shè)置基本合理，結(jié)果符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求。

（1）低于生產(chǎn)企業(yè)提供的空白限數(shù)值的檢測(cè)結(jié)果的數(shù)量應(yīng)小于等于3個(gè)；

（2）適用時(shí)，無高于生產(chǎn)企業(yè)提供的參考區(qū)間下限的檢測(cè)結(jié)果。

4.準(zhǔn)確度

（1）總則

可采用相對(duì)偏差、企業(yè)參考品測(cè)試和比對(duì)試驗(yàn)之一測(cè)試試劑（盒）的準(zhǔn)確度，應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求； 如適用，優(yōu)先采用相對(duì)偏差的方法。

（2）相對(duì)偏差

根據(jù)生產(chǎn)企業(yè)提供的試劑盒線性區(qū)間，將能用于評(píng)價(jià)常規(guī)方法的參考物質(zhì)作為樣本，合理設(shè)置2—3個(gè)濃度，將其作為樣本按照待測(cè)試劑盒說明書的步驟進(jìn)行檢測(cè)，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次，測(cè)試結(jié)果記為（Xi），按公式（1）分別計(jì)算相對(duì)偏差（Bi），如果3次結(jié)果都符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求，即判為合格。如果大于等于2次的結(jié)果不符合，即判為不合格。如果有1次結(jié)果不符合要求，則應(yīng)重新連續(xù)測(cè)試20次，并分別按照公式（1）計(jì)算相對(duì)偏差，如果大于等于19次測(cè)試的結(jié)果符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求，即判為合格，準(zhǔn)確度符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求。

Bi=(Xi-T)/T×100%                     (1)

式中：

Bi—相對(duì)偏差；

Xi—測(cè)量濃度；

T—標(biāo)定濃度。

（3）企業(yè)參考品測(cè)試

由生產(chǎn)企業(yè)提供企業(yè)參考品，按照常規(guī)樣本進(jìn)行檢測(cè)，每份樣本測(cè)定3次，測(cè)試結(jié)果記為（Xi），按公式（1）分別計(jì)算相對(duì)偏差（Bi），結(jié)果應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求。

5.線性

將接近線性區(qū)間上限的高值樣本按一定比例稀釋為至少5個(gè)濃度，其中低值濃度的樣本須接近線性區(qū)間的下限。對(duì)每一濃度的樣本至少重復(fù)測(cè)定2次，計(jì)算其平均值，將測(cè)定濃度的平均值與理論濃度或稀釋比例用最小二乘法進(jìn)行直線擬合，得到線性回歸方程，并計(jì)算線性相關(guān)系數(shù)r及絕對(duì)偏差或相對(duì)偏差，結(jié)果應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求。

6.重復(fù)性

用同一批號(hào)試劑盒，對(duì)2—3個(gè)不同濃度的樣品分別重復(fù)測(cè)定10次，計(jì)算10次測(cè)定結(jié)果的平均值（M）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），根據(jù)公式（2）得出變異系數(shù)（CV），結(jié)果應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求。

CV=SD/M×100%                   (2)

式中：

CV—變異系數(shù)；

SD—10次測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差；

M—10次測(cè)量結(jié)果的平均值。

7.批間差

用三個(gè)不同批號(hào)試劑盒，對(duì)2—3個(gè)不同濃度的樣品分別重復(fù)測(cè)定10次，計(jì)算每個(gè)濃度樣本每批號(hào)10次測(cè)量結(jié)果的平均值（Xi，i=1、2、3）及每個(gè)濃度樣本三個(gè)批號(hào)30次測(cè)量結(jié)果的總平均值（XT），根據(jù)公式（3）得出批間相對(duì)極差（R），結(jié)果應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求。

R=(Xmax-Xmin)/XT×100%               (3)

式中：

R—批間相對(duì)極差；

Xmax—Xi的最大值，i=1、2、3；

Xmin—Xi的最小值，i=1、2、3；

XT—每個(gè)濃度樣本30次測(cè)量結(jié)果的平均值。

8.分析特異性

（1）交叉反應(yīng)：易產(chǎn)生交叉反應(yīng)的其他抗原、抗體及嗜異性抗體等的驗(yàn)證情況；

（2）干擾物質(zhì)：樣本中常見干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，如高脂、黃疸、類風(fēng)濕因子、抗凝劑等干擾因子的研究（結(jié)果應(yīng)量化表示，禁用輕度、嚴(yán)重的模糊表述）；

（3）藥物影響：常見相關(guān)治療藥物對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。

9.鉤狀（Hook）效應(yīng)（如有）：說明不會(huì)產(chǎn)生Hook效應(yīng)的濃度上限或相關(guān)研究，如需稀釋，應(yīng)注明對(duì)稀釋液的要求、最佳或最大稀釋比例。 

10.質(zhì)控品性能要求（如有）

（1）定值質(zhì)控品測(cè)量準(zhǔn)確度

應(yīng)至少給出一種用校準(zhǔn)品校準(zhǔn)測(cè)量程序后測(cè)定該定值質(zhì)控品的試驗(yàn)方法。

（2）均一性

通常取同批號(hào)的一定數(shù)量最小包裝單元的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，每包裝單元測(cè)試1次，按下面的公式計(jì)算測(cè)試結(jié)果的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差S1；另用上述校準(zhǔn)品、質(zhì)控品中的1個(gè)最小包裝單元連續(xù)測(cè)試相同次數(shù)，計(jì)算測(cè)試結(jié)果的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差S2；按下列各公式計(jì)算瓶間重復(fù)性CV%，所有參數(shù)的瓶間重復(fù)性結(jié)果均應(yīng)符合要求。最小裝量不夠完成瓶間差檢測(cè)的可只進(jìn)行批內(nèi)精密度檢測(cè)。

當(dāng)S1<S2時(shí)，令CV瓶間=0

式中：

----平均值；

S----標(biāo)準(zhǔn)差；

n----測(cè)量次數(shù)；

xi----指定參數(shù)第i 次測(cè)量值。

11.生物安全性（如適用）

校準(zhǔn)品、質(zhì)控品如含人源性成分，用經(jīng)過國(guó)家批檢合格的以下四種體外診斷試劑盒對(duì)該試劑盒的校準(zhǔn)品、質(zhì)控分別進(jìn)行檢測(cè)：a)人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒；b)丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒；c)乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒，HIV抗體、HCV抗體和HBsAg應(yīng)為陰性；d）梅毒螺旋抗體診斷試劑盒，HIV抗體、HCV抗體、HBsAg和TP抗體應(yīng)為陰性。

（五）參考區(qū)間確定資料

陽性判斷值或參考區(qū)間確定所采用的樣本來源、確定方法及詳細(xì)的試驗(yàn)資料。建議參考CLSI/NCCLS C28-A2。

（六）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報(bào)試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。前者主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性（有效期）、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性及凍融次數(shù)限制等研究，申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對(duì)于實(shí)時(shí)、運(yùn)輸及開瓶穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果均應(yīng)在說明書【儲(chǔ)存條件及有效期】和【樣本要求】?jī)身?xiàng)中進(jìn)行詳細(xì)說明。

（七）生產(chǎn)及自檢記錄

提供連續(xù)三批產(chǎn)品生產(chǎn)及自檢記錄的復(fù)印件。

（八）臨床評(píng)價(jià)資料

1.研究方法

選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為參比試劑，采用擬申報(bào)產(chǎn)品（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。建議企業(yè)盡量選擇方法學(xué)相同、線性范圍及精密度等性能接近的同類試劑作為參比試劑。同時(shí)應(yīng)充分了解所選擇產(chǎn)品的技術(shù)信息，包括方法學(xué)、臨床預(yù)期用途、主要性能指標(biāo)、校準(zhǔn)品的溯源情況、推薦的陽性判斷值或參考區(qū)間等，以便對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行科學(xué)的分析。且臨床試驗(yàn)必須符合赫爾辛基宣言的倫理學(xué)準(zhǔn)則，必須獲得臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)倫理委員會(huì)的同意。

2.臨床研究單位的選擇

申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)選定不少于2家（含2家）獲得國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局資質(zhì)認(rèn)可的臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)，按照有關(guān)規(guī)定開展臨床試驗(yàn)。

申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)及其預(yù)期用途，綜合不同地區(qū)人種、流行病學(xué)背景、病原微生物的特性等因素選擇臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)。臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)必須具有與試驗(yàn)用體外診斷試劑相適應(yīng)的專業(yè)技術(shù)人員及儀器設(shè)備，并能夠確保該項(xiàng)試驗(yàn)的實(shí)施。

申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)在臨床試驗(yàn)前制定文件明確各方的職責(zé)分工，與各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)協(xié)商制定統(tǒng)一的臨床試驗(yàn)方案，按照臨床試驗(yàn)方案組織制定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，并組織對(duì)參加試驗(yàn)的所有研究者進(jìn)行臨床試驗(yàn)方案和試驗(yàn)用體外診斷試劑使用的培訓(xùn)，以確保臨床試驗(yàn)方案和試驗(yàn)用體外診斷試劑操作的一致性，并在臨床試驗(yàn)過程中促進(jìn)各研究者之間的溝通。

在臨床試驗(yàn)開始前，申請(qǐng)人應(yīng)與臨床試驗(yàn)工作人員進(jìn)行臨床試驗(yàn)的預(yù)試驗(yàn)，使其熟悉并掌握該產(chǎn)品所適用的儀器、操作方法、技術(shù)性能等，以最大限度地控制試驗(yàn)誤差。

在臨床試驗(yàn)過程中，申請(qǐng)人應(yīng)考慮吸收流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等方面專業(yè)人員（或知識(shí)），以保證臨床試驗(yàn)科學(xué)、合理地開展。

臨床研究單位應(yīng)有能力提供臨床評(píng)價(jià)所需的各類樣本，實(shí)驗(yàn)操作人員有足夠的時(shí)間熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評(píng)價(jià)方案。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，考核試劑和參比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，定期對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。

不同的臨床單位應(yīng)使用同一批考核試劑進(jìn)行臨床試驗(yàn)，以便對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行科學(xué)客觀的統(tǒng)計(jì)分析。

3.臨床試驗(yàn)方案

臨床試驗(yàn)實(shí)施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床研究方案。各臨床研究機(jī)構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)基本一致，且保證在整個(gè)臨床試驗(yàn)過程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動(dòng)。整個(gè)試驗(yàn)過程應(yīng)在臨床研究機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)并由本實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員操作完成，申報(bào)單位的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗(yàn)操作過程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)采用盲法及樣本隨機(jī)分配以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀性。對(duì)于新試劑的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)研究，應(yīng)在方案中明確前后兩次濃度變化有臨床意義的標(biāo)準(zhǔn)。臨床試驗(yàn)中所涉及的樣本類型應(yīng)與產(chǎn)品說明書一致，且每種樣本類型例數(shù)的選擇應(yīng)符合基本的統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。各研究單位選用的參比試劑及所用機(jī)型應(yīng)一致，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

開展體外診斷試劑臨床試驗(yàn)，申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)按照試驗(yàn)用體外診斷試劑的類別、風(fēng)險(xiǎn)、預(yù)期用途等特性，組織制定科學(xué)、合理的臨床試驗(yàn)方案。一般應(yīng)當(dāng)包括以下內(nèi)容：

（1）一般信息（包括產(chǎn)品信息、臨床試驗(yàn)開展的時(shí)間和人員等相關(guān)信息、申請(qǐng)人相關(guān)信息等）；

（2）臨床試驗(yàn)的背景資料；

（3）試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

（4）試驗(yàn)設(shè)計(jì)；

（5）評(píng)價(jià)方法；

（6）統(tǒng)計(jì)方法；

（7）對(duì)臨床試驗(yàn)方案修正的規(guī)定；

（8）臨床試驗(yàn)涉及的倫理問題和說明、《知情同意書》文本（如有）；

（9）數(shù)據(jù)處理與記錄保存;

（10）其他需要說明的內(nèi)容。

4.研究對(duì)象的選擇

（1）臨床試驗(yàn)樣本量的確定：申請(qǐng)人或臨床研究者應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品臨床使用目的，與該改產(chǎn)品相關(guān)疾病的臨床發(fā)生率確定臨床研究的樣本量。在符合指導(dǎo)原則有關(guān)最低樣本要求的前提下，還應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。

①臨床研究的總樣本數(shù)至少為200例。

②應(yīng)考慮樣本量的分布。樣本量的選擇應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)及相關(guān)指導(dǎo)原則的要求。

③樣本濃度應(yīng)覆蓋考核試劑檢測(cè)范圍，盡可能均勻分布。盡可能使40%樣本的測(cè)定值處于參考區(qū)間以外，但在測(cè)量范圍內(nèi)。

（2）變更事項(xiàng)相關(guān)的臨床試驗(yàn):涉及產(chǎn)品檢測(cè)條件優(yōu)化、增加與原樣本類型具有可比性的其他樣本類型等變更事項(xiàng)，產(chǎn)品臨床試驗(yàn)總樣本數(shù)至少為100例,并在至少2家(含2家)臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)；變更抗原、抗體等主要原材料的供應(yīng)商、陽性判斷值或參考區(qū)間的變化及增加臨床適應(yīng)癥等變更事項(xiàng)，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品具體變更情況，酌情增加臨床試驗(yàn)總樣本數(shù)。

（3）建議在臨床試驗(yàn)中選擇部分含干擾物質(zhì)的標(biāo)本進(jìn)行對(duì)比研究，包括高脂、溶血、黃疸的樣本、類風(fēng)濕因子陽性樣本，易共存的其他急性炎癥時(shí)相因子同時(shí)升高的患者標(biāo)本，以從臨床角度驗(yàn)證試劑的特異性。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對(duì)臨床試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法，如相關(guān)分析、線性回歸、受試者工作特征（ROC）曲線分析等。對(duì)于對(duì)比實(shí)驗(yàn)的等效性研究，最常用是對(duì)考核試劑和參比試劑兩組檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，應(yīng)重點(diǎn)觀察相關(guān)系數(shù)（r值）或判定系數(shù)（R2）、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）等指標(biāo)。結(jié)合臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的正/偏態(tài)分布情況，建議統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測(cè)結(jié)果無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)假設(shè)，即評(píng)價(jià)考核試劑與參比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。

6.結(jié)果差異樣本的驗(yàn)證

對(duì)于比較研究試驗(yàn)中測(cè)定結(jié)果不符的樣本，應(yīng)采用“金標(biāo)準(zhǔn)”或其他合理的方法進(jìn)行復(fù)核，以便對(duì)臨床試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。如無需復(fù)核，應(yīng)詳細(xì)說明理由。

7.臨床試驗(yàn)總結(jié)報(bào)告撰寫

根據(jù)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號(hào)）的要求，臨床試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)該對(duì)試驗(yàn)的整體設(shè)計(jì)及各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對(duì)整個(gè)臨床試驗(yàn)實(shí)施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法。建議在臨床總結(jié)報(bào)告中對(duì)以下內(nèi)容進(jìn)行詳述。

申請(qǐng)人或臨床試驗(yàn)牽頭單位應(yīng)對(duì)各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的報(bào)告進(jìn)行匯總，并完成臨床試驗(yàn)總結(jié)報(bào)告。臨床試驗(yàn)報(bào)告的格式及內(nèi)容如下：

7.1首篇

首篇是每份臨床試驗(yàn)報(bào)告的第一部分，所有臨床試驗(yàn)報(bào)告均應(yīng)包含該部分內(nèi)容。

7.1.1封面標(biāo)題

包括試驗(yàn)用體外診斷試劑的通用名稱、試驗(yàn)開始日期、試驗(yàn)完成日期、主要研究者（簽名）、臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)（蓋章）、統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人簽名及單位蓋章、申請(qǐng)人（蓋章）、申請(qǐng)人的聯(lián)系人及聯(lián)系方式、報(bào)告日期、原始資料保存地點(diǎn)。

7.1.2目錄

列出整個(gè)臨床試驗(yàn)報(bào)告的內(nèi)容目錄和對(duì)應(yīng)頁碼。

7.1.3研究摘要

對(duì)臨床試驗(yàn)情況進(jìn)行簡(jiǎn)單的介紹。

7.1.4試驗(yàn)研究人員

列出臨床試驗(yàn)主要研究人員的姓名、單位、在研究中的職責(zé)及其簡(jiǎn)歷（列于附件中），主要研究人員包括主要研究者及各單位的主要參加人員、統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人、臨床試驗(yàn)報(bào)告的撰寫人。

7.1.5縮略語

臨床試驗(yàn)報(bào)告中所用的縮略語的全稱。

7.2正文內(nèi)容和報(bào)告格式

7.2.1基本內(nèi)容

7.2.1.1引言。

介紹與臨床試驗(yàn)產(chǎn)品有關(guān)的背景情況：包括（1）被測(cè)物的來源、生物及理化性質(zhì)；（2）臨床預(yù)期使用目的，所針對(duì)的目標(biāo)適應(yīng)癥人群，目前針對(duì)該適應(yīng)癥所采用的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法等；（3）所采用的方法、原理、技術(shù)要求等；（4）國(guó)內(nèi)外已批準(zhǔn)上市產(chǎn)品的應(yīng)用現(xiàn)狀等。說明申請(qǐng)人和臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)間的合作關(guān)系。

7.2.1.2研究目的。

說明本臨床試驗(yàn)所要達(dá)到的目的。

7.2.1.3試驗(yàn)管理。

對(duì)試驗(yàn)管理結(jié)構(gòu)的描述。

管理結(jié)構(gòu)包括主要研究者、主要參加人員、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制情況、統(tǒng)計(jì)/數(shù)據(jù)管理情況以及試驗(yàn)中發(fā)生的問題及其處理措施等。

7.2.1.4試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

7.2.1.4.1試驗(yàn)總體設(shè)計(jì)及方案的描述。

試驗(yàn)的總體設(shè)計(jì)和方案的描述應(yīng)清晰、簡(jiǎn)潔，必要時(shí)采用圖表等直觀的方式。試驗(yàn)進(jìn)行時(shí)方案修改的情況和任何方案以外的信息來源也應(yīng)詳細(xì)敘述。應(yīng)包括：

（1）臨床試驗(yàn)的整體管理情況、臨床研究單位選擇、臨床主要研究人員簡(jiǎn)介等基本情況介紹；

（2）病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)、不同年齡段人群的預(yù)期選擇例數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)；

（3）樣本類型，樣本的收集、處理及保存等；

（4）統(tǒng)計(jì)學(xué)方法、統(tǒng)計(jì)軟件、評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)

7.2.1.4.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)及試驗(yàn)方法選擇。

試驗(yàn)設(shè)計(jì)中應(yīng)包括以下內(nèi)容：

（1）樣本量及樣本量確定的依據(jù)。

（2）樣本選擇依據(jù)、入選標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn)和剔除標(biāo)準(zhǔn)。

（3）樣本采集、保存、運(yùn)輸方法等。

（4）對(duì)比試劑的確立。

（5）臨床試驗(yàn)用所有產(chǎn)品的名稱、規(guī)格、來源、批號(hào)、效期及保存條件，對(duì)比試劑的注冊(cè)情況。考核試劑和參比試劑的名稱、批號(hào)、有效期及所用機(jī)型等信息。

（6）質(zhì)量控制方法。對(duì)質(zhì)量控制方法進(jìn)行簡(jiǎn)要的闡述。試驗(yàn)人員培訓(xùn)、儀器日常維護(hù)、儀器校準(zhǔn)、質(zhì)控品運(yùn)行情況，對(duì)檢測(cè)精密度、質(zhì)控品回收（或測(cè)量值）、抽查結(jié)果評(píng)估；

（7）臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析方法。對(duì)各研究單位的病例數(shù)、病種分布情況進(jìn)行總合，建議以列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比。

①數(shù)據(jù)預(yù)處理、差異數(shù)據(jù)的重新檢測(cè)或第三方驗(yàn)證以及是否納入最終數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、對(duì)異常值或缺失值的處理、研究過程中是否涉及對(duì)方案的修改。

②定量值相關(guān)性和一致性分析

用回歸分析驗(yàn)證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，以y=a+bx和R2的形式給出回歸分析的擬合方程，其中：y是考核試劑結(jié)果，x是參比試劑結(jié)果，b是方程斜率，a是y軸截距，R2是判定系數(shù)，同時(shí)應(yīng)給出b的95%（或99%）置信區(qū)間，定量值結(jié)果應(yīng)無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

（8）具體試驗(yàn)過程，樣本檢測(cè)、數(shù)據(jù)收集、樣本長(zhǎng)期保存、結(jié)果不一致樣本的校驗(yàn)等。

（9）試驗(yàn)過程中方案的修改。

一般情況下，臨床試驗(yàn)方案不宜更改。試驗(yàn)過程中對(duì)方案的任何修改均應(yīng)說明，對(duì)更改的時(shí)間、理由、更改過程及有無備案進(jìn)行詳細(xì)闡述并論證其對(duì)整個(gè)研究結(jié)果評(píng)價(jià)的影響。

7.2.1.5臨床試驗(yàn)結(jié)果及分析。

7.2.1.6討論和結(jié)論。對(duì)總體結(jié)果進(jìn)行總結(jié)性描述并簡(jiǎn)要分析試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)本次臨床研究有無特別說明，最后得出臨床試驗(yàn)結(jié)論。

7.2.2有關(guān)臨床試驗(yàn)中特別情況的說明

7.2.3附件

7.2.3.1臨床試驗(yàn)中所采用的其他試驗(yàn)方法或其他診斷試劑產(chǎn)品的基本信息，如試驗(yàn)方法、診斷試劑產(chǎn)品來源、產(chǎn)品說明書及注冊(cè)批準(zhǔn)情況。

7.2.3.2臨床試驗(yàn)中的所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)，需由臨床試驗(yàn)操作者、復(fù)核者簽字，臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)蓋章（封面蓋章和騎縫章）。

7.2.3.3主要參考文獻(xiàn)。

7.2.3.4主要研究者簡(jiǎn)歷。

7.2.3.5申請(qǐng)人需要說明的其他情況等。

（九）產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析資料

對(duì)體外診斷試劑產(chǎn)品壽命周期的各個(gè)環(huán)節(jié),從預(yù)期用途、可能的使用錯(cuò)誤、與安全性有關(guān)的特征、已知和可預(yù)見的危害等方面的判定以及對(duì)患者風(fēng)險(xiǎn)的估計(jì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)和相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)控制基礎(chǔ)上，形成風(fēng)險(xiǎn)管理報(bào)告。應(yīng)當(dāng)符合相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求。

（十）產(chǎn)品技術(shù)要求

擬定產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》、《體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式》、《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號(hào)）的相關(guān)規(guī)定。作為定量檢測(cè)試劑盒，C反應(yīng)蛋白產(chǎn)品的注冊(cè)檢測(cè)應(yīng)主要包括以下性能指標(biāo)：外觀檢查、物理檢查、準(zhǔn)確度、線性范圍、分析靈敏度/檢出限（空白限）、精密度（批間、重復(fù)性）、校準(zhǔn)品溯源性、質(zhì)控品測(cè)量準(zhǔn)確度及均一性、生物安全性（如適用）等。如果擬申報(bào)試劑已有相應(yīng)的專用國(guó)家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或相應(yīng)方法學(xué)的通用標(biāo)準(zhǔn)要求發(fā)布，則企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求不得低于上述標(biāo)準(zhǔn)要求。

1.產(chǎn)品性能指標(biāo)詳述以下性能指標(biāo)：

注1：由于C反應(yīng)蛋白目前尚無國(guó)家參考品，故選用國(guó)際約定、行業(yè)參考品或企業(yè)內(nèi)部參考品，以后國(guó)家參考品若建立，采用國(guó)家參考品。

注2：對(duì)線性范圍、分析靈敏度等的最低要求見表1。

1.1外觀

應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的包裝特點(diǎn)規(guī)定適當(dāng)?shù)耐庥^要求。一般應(yīng)有試劑盒各組份組成、性狀；內(nèi)、外包裝、標(biāo)簽清晰等的要求。

1.1.1試劑盒應(yīng)組分齊全，內(nèi)外包裝均應(yīng)完整，標(biāo)簽清晰；

1.1.2液體試劑無滲漏，凍干組分呈疏松體，復(fù)溶后液體均勻（無肉眼可見顆粒、無沉淀）。 

1.2試劑空白吸光度

適用時(shí)，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)規(guī)定試劑空白吸光度，并符合相應(yīng)要求。

1.3分析靈敏度

1.3.1常規(guī)C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒、全量程C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒，在生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定波長(zhǎng)（光徑1cm），對(duì)應(yīng)于濃度為40mg/L的CRP所引起的吸光度差值（△A）的絕對(duì)值應(yīng)在0.05—0.50的范圍內(nèi)。

1.3.2超敏（高敏）C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒,在生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定波長(zhǎng)（光徑1 cm），對(duì)應(yīng)于濃度為5mg/L的CRP所引起的吸光度差值（△A）的絕對(duì)值應(yīng)在0.05—0.50的范圍內(nèi)。

注：僅適用于免疫透射比濁法

1.4檢出限

生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)提供CRP試劑（盒）的檢出限，常規(guī)C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒檢出限不高于5mg/L，超敏（高敏）C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒、全量程C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒檢出限不高于0.5mg/L。

1.5準(zhǔn)確度

準(zhǔn)確度應(yīng)符合如下要求之一：

1.5.1相對(duì)偏差：用可用于評(píng)價(jià)常規(guī)方法的有證參考物質(zhì)(CRM)作為樣本進(jìn)行檢測(cè)，其測(cè)量結(jié)果的相對(duì)偏差應(yīng)不超過±15%。

1.5.2企業(yè)參考品測(cè)試：對(duì)具有溯源性的企業(yè)參考品進(jìn)行檢測(cè)，其測(cè)量結(jié)果的相對(duì)偏差應(yīng)不超過±10%。

1.6線性

生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)規(guī)定CRP試劑（盒）的線性區(qū)間,

1.6.1線性區(qū)間內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)|r|應(yīng)不小于0.990；

1.6.2超敏C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑（盒）線性區(qū)間不窄于 [0.5，10] mg/L；

1.6.3常規(guī)C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑（盒）線性區(qū)間不窄于 [5,80] mg/L；

1.6.4全量程C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒線性區(qū)間不窄于[0.5,80] mg/L。

1.6.5應(yīng)規(guī)定線性區(qū)間內(nèi)的線性偏差，可根據(jù)實(shí)際情況，在線性區(qū)間的不同分段以相對(duì)偏差或絕對(duì)偏差表達(dá)。

1.7重復(fù)性

在線性區(qū)間范圍內(nèi)，選擇2—3個(gè)不同濃度水平的樣本，濃度選擇可參考醫(yī)學(xué)決定水平，代表正常值和異常值水平。各重復(fù)檢測(cè)10次，其變異系數(shù)(CV)應(yīng)不大于10%。

1.8批間差

用三個(gè)批號(hào)試劑盒分別選擇2—3個(gè)不同濃度水平的樣本，則三個(gè)批號(hào)試劑盒之間的批間相對(duì)極差應(yīng)不大于15%。

1.9穩(wěn)定性

可對(duì)效期穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性進(jìn)行驗(yàn)證。

1.9.1效期穩(wěn)定性

生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)規(guī)定試劑（盒）的有效期。取效期末的試劑盒檢測(cè)其試劑空白吸光度、分析靈敏度、檢出限、準(zhǔn)確度、線性和重復(fù)性等符合相應(yīng)指標(biāo)的要求；

1.9.2熱穩(wěn)定性試驗(yàn)（如適用）

取有效期內(nèi)的試劑盒在37℃放置一定時(shí)間，檢測(cè)其試劑空白吸光度、分析靈敏度、檢出限、準(zhǔn)確度、線性和重復(fù)性等，應(yīng)符合相應(yīng)指標(biāo)的要求。

注1：熱穩(wěn)定性試驗(yàn)不能用于推導(dǎo)產(chǎn)品有效期，除非是采用基于大量的穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)建立的推導(dǎo)公式；

注2：一般地，效期為1年時(shí)選擇不超過1個(gè)月的產(chǎn)品，效期為半年時(shí)選擇不超過半個(gè)月的產(chǎn)品，以此類推。但如超過規(guī)定時(shí)間，產(chǎn)品符合要求時(shí)也可以接受；

注3：根據(jù)產(chǎn)品特性可選擇上述方法的任意組合，但所選用方法宜能驗(yàn)證產(chǎn)品的穩(wěn)定性，以保證在效期內(nèi)產(chǎn)品性能符合要求。

1.10質(zhì)控品性能要求（如有）

1.10.1定值質(zhì)控品測(cè)量準(zhǔn)確度

1.10.2均一性

1.11生物安全性（如適用）

2.檢驗(yàn)方法

檢驗(yàn)方法的制定應(yīng)與相應(yīng)的性能指標(biāo)相適應(yīng)。應(yīng)優(yōu)先考慮采用公認(rèn)的或已頒布的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法。檢驗(yàn)方法的制定需保證具有可重現(xiàn)性和可操作性，需要時(shí)明確樣品的制備方法，必要時(shí)可附相應(yīng)圖示進(jìn)行說明，文本較大的可以附錄形式提供。

對(duì)于體外診斷試劑類產(chǎn)品，檢驗(yàn)方法中還應(yīng)明確說明采用的參考品/標(biāo)準(zhǔn)品、樣本制備方法、使用的試劑批次和數(shù)量、試驗(yàn)次數(shù)、計(jì)算方法。

3.附錄

應(yīng)提供所用CRP校準(zhǔn)品的來源、賦值過程的詳細(xì)溯源性報(bào)告以及測(cè)量不確定度等內(nèi)容。

（十一）產(chǎn)品注冊(cè)檢驗(yàn)報(bào)告

根據(jù)《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》要求，首次申請(qǐng)注冊(cè)的第二類產(chǎn)品應(yīng)該在具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗(yàn)資質(zhì)和承檢范圍的醫(yī)療器械檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行注冊(cè)檢測(cè)。注冊(cè)檢驗(yàn)時(shí)優(yōu)先使用有證參考物質(zhì)，若無法獲取可以使用企業(yè)參考品。

（十二）產(chǎn)品說明書

說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、標(biāo)本采集及處理、實(shí)驗(yàn)方法、檢測(cè)結(jié)果解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號(hào)）的要求，境外試劑的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請(qǐng)人提交的注冊(cè)申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對(duì)此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。

結(jié)合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，下面對(duì)C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒說明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明，以指導(dǎo)注冊(cè)申報(bào)人員更合理地完成說明書編制。

1.【預(yù)期用途】

C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、全血中的C反應(yīng)蛋白濃度，適用的樣本類型應(yīng)結(jié)合實(shí)際的臨床研究情況進(jìn)行確認(rèn)。

第二段應(yīng)闡述與該注冊(cè)產(chǎn)品預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥及詳細(xì)背景資料。

注：C反應(yīng)蛋白包括常規(guī)C反應(yīng)蛋白（CRP）、超敏CRP（hsCRP），全程C反應(yīng)蛋白，具體根據(jù)臨床試驗(yàn)核定。

2.【主要組成成分】

（1）說明試劑包含主要組分及所用原材料的名稱、數(shù)量、比例或濃度等信息。

（2）試劑中不包含但對(duì)該項(xiàng)檢測(cè)必須的組分，申請(qǐng)人應(yīng)列出相關(guān)試劑/耗材的名稱、貨號(hào)及其他相關(guān)信息。

（3）試劑盒中不包含質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他耗材，應(yīng)說明經(jīng)驗(yàn)證后推薦配合使用的商品化質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他耗材的制造商、產(chǎn)品名稱以及產(chǎn)品貨號(hào)等詳細(xì)信息；如包含校準(zhǔn)品和/或質(zhì)控品，應(yīng)說明其主要組成成分及其生物學(xué)來源，校準(zhǔn)品應(yīng)注明其定值及溯源性，質(zhì)控品應(yīng)有合適的檢測(cè)范圍。

（4）應(yīng)注明不同批號(hào)試劑盒中各組分可否互換。

3.【儲(chǔ)存條件及有效期】

試劑的效期穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性等信息作詳細(xì)介紹。并對(duì)開封后未使用產(chǎn)品允許暴露于空氣中的溫度、濕度及效期等條件予以明確。

注：保存條件不應(yīng)有模糊表述，如“室溫”，應(yīng)明確貯存溫度，如2℃—8℃，有效期12個(gè)月。穩(wěn)定期限應(yīng)以月或日或小時(shí)為單位。

4.【樣本要求】重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：

（1）樣本采集：采集時(shí)間點(diǎn)是否受臨床癥狀、用藥及進(jìn)食情況等因素的影響，具體采集部位及類型，詳述具體的操作方法或列出相關(guān)操作指南文件以指導(dǎo)使用者（最好能夠給出具體圖示），盡量減少由于樣本采集或處理不當(dāng)對(duì)實(shí)驗(yàn)造成的影響。

（2）樣本處理及保存：樣本的保存條件及期限（短期、長(zhǎng)期）、運(yùn)輸條件等。冷藏/冷凍樣本檢測(cè)前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)限制。

（3）樣本的最大可稀釋倍數(shù)。

（4）樣本適用的抗凝劑類型及實(shí)驗(yàn)反應(yīng)溫度。

5.【適用機(jī)型】所有適用的儀器型號(hào)，并提供與儀器有關(guān)的重要信息以指導(dǎo)用戶操作。

6.【檢驗(yàn)方法】詳細(xì)說明實(shí)驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，包括：

（1）實(shí)驗(yàn)條件：實(shí)驗(yàn)環(huán)境的溫度、濕度等注意事項(xiàng)，檢驗(yàn)試劑及樣本復(fù)溫、試劑孵育溫度及試劑空白等要求。

（2）試劑使用方法（手工/半自動(dòng)/全自動(dòng)）、注意事項(xiàng)。

（3）詳述待測(cè)樣品的預(yù)處理方法、步驟及注意事項(xiàng)。

（4）明確樣本滿足臨床檢測(cè)需要的加樣量及觀察時(shí)間。

（5）質(zhì)量控制程序：質(zhì)控品的使用、質(zhì)量控制方法。

（6）校準(zhǔn)程序：校準(zhǔn)品的準(zhǔn)備和使用，校準(zhǔn)曲線的繪制方法。

（7）應(yīng)詳述實(shí)驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算方法，以及與國(guó)際單位的換算公式（如適用）。

7.【參考區(qū)間】

應(yīng)注明常用樣本類型的參考區(qū)間，簡(jiǎn)單介紹設(shè)定該參考區(qū)間所選健康人群的區(qū)域特征，建議注明以下字樣“由于地理、人種、性別及年齡等差異，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考值區(qū)間”。并簡(jiǎn)要說明參考區(qū)間的確定方法。

8.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

結(jié)合質(zhì)控品對(duì)所有可能出現(xiàn)的結(jié)果進(jìn)行合理的解釋。本試劑的檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，對(duì)患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。明確有可能存在的數(shù)值升高因素及數(shù)值降低因素，明確說明對(duì)何種條件下需要進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)，以及在重復(fù)檢測(cè)時(shí)對(duì)待測(cè)樣本可能采取的優(yōu)化條件等進(jìn)行詳述。

9.【檢驗(yàn)方法局限性】

（1）干擾物質(zhì)及鉤狀效應(yīng)（HOOK效應(yīng)，如適用）對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。

（2）操作時(shí)必須嚴(yán)格按照操作規(guī)程，精心操作才能得到正確結(jié)果，對(duì)操作程序作任何修改都可能影響結(jié)果。

（3）有關(guān)假陰性結(jié)果的可能性分析。

某些未知成分屏蔽了抗原決定簇使之無法與抗體結(jié)合；C反應(yīng)蛋白抗原隨著樣本放置時(shí)間的延長(zhǎng)和外界溫度上升逐漸降解無法被抗體識(shí)別；不合理的樣本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)及處理、樣本中被測(cè)物質(zhì)濃度過低等均有可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。

10.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

說明該產(chǎn)品的主要性能指標(biāo)。

11.【注意事項(xiàng)】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

（1）有關(guān)人源組分（如有）的警告，如：試劑內(nèi)質(zhì)控品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的檢測(cè)，但截至目前，沒有任何一項(xiàng)檢測(cè)可以確保絕對(duì)安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對(duì)待。

（2）建議實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境要求，如溫度、濕度、電磁環(huán)境等。

（3）對(duì)采集樣本的要求，建議使用新鮮血液，不建議使用高脂乳糜樣、黃疸、高類風(fēng)濕因子樣本，勿使用溶血樣本，明確樣本的處理辦法。明確特異性抗體有無干擾。

（4）對(duì)所有樣本和反應(yīng)廢棄物都視為傳染源進(jìn)行處理。

（5）其他有關(guān)C反應(yīng)蛋白定量檢測(cè)試劑盒的注意事項(xiàng)。

三、名詞解釋

（一）分析特異性（Analytical Specificity）：測(cè)量程序只測(cè)量被測(cè)量物的能力。分析特異性用于描述檢測(cè)程序在樣本中有其他物質(zhì)存在時(shí)只測(cè)量被測(cè)量物的能力。通常以一個(gè)被評(píng)估的潛在干擾物清單來描述，并給出在特定醫(yī)學(xué)相關(guān)濃度值水平的分析干擾程度。

注：潛在干擾物包括干擾物和交叉反應(yīng)物。

（二）精密度（Precision）：在規(guī)定條件下，相互獨(dú)立的測(cè)試結(jié)果之間的一致程度。精密度的程度是用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法得到的測(cè)量不精密度的數(shù)字形式表示，如標(biāo)準(zhǔn)差（SD）和變異系數(shù)（CV）。

四、參考文獻(xiàn)

（一）《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號(hào)）

（二）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號(hào)）

（三）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號(hào)）

（四）馮仁豐，《臨床檢驗(yàn)質(zhì)量管理技術(shù)基礎(chǔ)》，第二版，上?？茖W(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2007年4月

（五）Review Criteria for Assessment of  C-Reactive Protein (CRP), High Sensitivity C-Reactive Protein (hsCRP) and Cardiac C-Reactive Protein (cCRP) Assays，F(xiàn)DA

（六）How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory”; Approved Guideline, Second Edition 2000,CLSI/NCCLS C28-A2

C反應(yīng)蛋白測(cè)定試劑盒注冊(cè)
技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2016修訂版）編制說明

一、指導(dǎo)原則編寫目的

（一）本指導(dǎo)原則編寫的目的是用于指導(dǎo)和規(guī)范C反應(yīng)蛋白測(cè)定試劑盒產(chǎn)品注冊(cè)申報(bào)過程中審查人員對(duì)注冊(cè)材料的技術(shù)審評(píng)；同時(shí)也可指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人的產(chǎn)品注冊(cè)申報(bào)。

（二）本指導(dǎo)原則旨在讓初次接觸該類產(chǎn)品的注冊(cè)審查人員對(duì)產(chǎn)品機(jī)理、結(jié)構(gòu)、主要性能、預(yù)期用途等各個(gè)方面有所了解，同時(shí)讓技術(shù)審查人員在產(chǎn)品注冊(cè)技術(shù)審評(píng)時(shí)把握基本的尺度，對(duì)產(chǎn)品安全性、有效性作出系統(tǒng)評(píng)價(jià)。

二、指導(dǎo)原則編寫依據(jù)

（一）《醫(yī)療器械監(jiān)督管理?xiàng)l例》（國(guó)務(wù)院令第650號(hào)）

（二）《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號(hào)）

（三）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號(hào)）

（四）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號(hào)）

（五）《中國(guó)生物制品規(guī)程》

（六）國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理部門發(fā)布的其他規(guī)范性文件

（七）現(xiàn)行的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

三、指導(dǎo)原則部分內(nèi)容編寫考慮

（一）產(chǎn)品的主要技術(shù)指標(biāo)制定主要參考相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)GB/T 26124-2011臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）、YY/T 1183-2010《酶聯(lián)免疫吸附法試劑（盒）》。

（二）為了提高本指導(dǎo)原則的通用性，編寫中明確本指導(dǎo)原則包含了免疫比濁法、化學(xué)發(fā)光法、時(shí)間分辨法、免疫熒光法等基于抗原抗體反應(yīng)原理的免疫學(xué)方法。由于各種方法可能在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)性能要求上不一致，如果擬申報(bào)試劑已有相應(yīng)的專用國(guó)家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或相應(yīng)方法學(xué)的通用標(biāo)準(zhǔn)要求發(fā)布，則企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求不得低于上述標(biāo)準(zhǔn)要求。

（三）本指導(dǎo)原則參考了美國(guó)食品藥品管理局相關(guān)要求，但是對(duì)心臟CRP部分，考慮到國(guó)內(nèi)已合并至超敏CRP，故本指導(dǎo)原則未保留。同時(shí)國(guó)內(nèi)某些公司申請(qǐng)的全程CRP，在臨床上沒有相應(yīng)的稱謂，也未保留。

四、指導(dǎo)原則編寫單位和人員

本指導(dǎo)原則的編寫成員由廣東省醫(yī)療器械注冊(cè)技術(shù)審評(píng)人員、行政審批人員、廣東省醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心檢驗(yàn)人員、臨床專家及相關(guān)企業(yè)技術(shù)人員共同組成。