附件：凝血酶原時(shí)間/活化部分凝血活酶時(shí)間/凝血酶時(shí)間/纖維蛋白原檢測試劑產(chǎn)品注冊審查指導(dǎo)原則（2021年第104號(hào)）.doc

凝血酶原時(shí)間/活化部分凝血活酶時(shí)間/凝血酶時(shí)間/纖維蛋白原檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對凝血酶原時(shí)間/活化部分凝血活酶時(shí)間/凝血酶時(shí)間/纖維蛋白原（以下簡稱“凝血四項(xiàng)”）檢測試劑注冊申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評部門審評注冊申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是針對凝血四項(xiàng)試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

凝血四項(xiàng)包括凝血酶原時(shí)間（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（activated partial thromboplastintime，APTT）、凝血酶時(shí)間（thrombin time，TT）和纖維蛋白原（fibrinogen，F(xiàn)IB），是臨床上常用的凝血功能檢查的檢測指標(biāo)，主要用于凝血障礙性疾病的初步診斷、抗凝藥物的治療監(jiān)測以及常規(guī)凝血功能的評估等。

從方法學(xué)考慮，本指導(dǎo)原則適用于基于血液凝固法原理，利用手工法、半自動(dòng)以及全自動(dòng)凝血分析儀（光學(xué)法、磁珠法），對人血漿樣本中的凝血四項(xiàng)指標(biāo)，包括凝血酶原時(shí)間（Quick一期法）、活化部分凝血活酶時(shí)間、凝血酶時(shí)間、纖維蛋白原（Clauss法），進(jìn)行體外定量檢測的試劑。不適用于床旁快速檢測（POCT）及口服抗凝藥治療自測體外監(jiān)測的試劑。

二、注冊審查要點(diǎn)

注冊申報(bào)資料的撰寫應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求及說明》的相關(guān)要求。

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品名稱一般由三部分組成。第一部分：被測物質(zhì)的名稱，如凝血酶原時(shí)間;第二部分：用途，如測定試劑盒;第三部分：方法或者原理，如凝固法等，本部分應(yīng)當(dāng)在括號(hào)中列出。

2.分類依據(jù)

根據(jù)《體外診斷試劑分類子目錄》，凝血四項(xiàng)檢測試劑管理類別為二類，分類編碼為6840。

3.注冊單元?jiǎng)澐?/p>

從適用樣本類型及方法學(xué)考慮，本指導(dǎo)原則所述凝血四項(xiàng)檢測試劑的注冊單元原則上按照單個(gè)檢測項(xiàng)目進(jìn)行劃分。不建議不同檢測項(xiàng)目的組合作為同一注冊單元。

各單項(xiàng)檢測試劑如包含不同的包裝規(guī)格，不同規(guī)格間僅試劑組分裝量或檢測數(shù)有差異，原則上劃分為同一注冊單元;如包含不同的包裝規(guī)格，不同規(guī)格間除試劑裝量或檢測數(shù)的差異外，適用于不同的儀器機(jī)型，原則上劃分為同一注冊單元。

校準(zhǔn)品、質(zhì)控品可以與配合使用的凝血四項(xiàng)檢測試劑合并申請注冊，也可以單獨(dú)申請注冊。

（二）綜述資料

主要包括概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報(bào)產(chǎn)品上市歷史等內(nèi)容。其中，需注意以下內(nèi)容：

1.產(chǎn)品描述

1.1產(chǎn)品綜述

應(yīng)著重描述：1）產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理及適用儀器的檢測原理，如光學(xué)法（透射比濁法、散射比濁法）、磁珠法等;2）主要生物活性原料（如組織凝血活酶、激活劑、磷脂、凝血酶等）的生物學(xué)來源、供應(yīng)商名稱及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（同時(shí)附供應(yīng)商提供的出廠檢定報(bào)告）;3）組織凝血活酶的國際敏感指數(shù)（international sensitivity index，ISI）標(biāo)定情況;4）校準(zhǔn)品（如有）的量值溯源情況，質(zhì)控品（如有）的制備、賦值情況等。

1.2與同類和/或前代產(chǎn)品的比較

應(yīng)著重從預(yù)期用途、主要組成成分（原材料生物學(xué)來源、激活劑類型）、適用儀器檢測原理、標(biāo)準(zhǔn)化及溯源、主要性能指標(biāo)、參考區(qū)間等方面寫明擬申報(bào)產(chǎn)品與境內(nèi)、外已上市同類產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。

2.臨床適應(yīng)證

PT臨床上主要用于外源性凝血系統(tǒng)功能缺陷的篩查和口服抗凝劑治療監(jiān)測。PT對外源性和共同凝血途徑的凝血因子（Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ）的缺陷以及這些凝血因子抑制物的存在敏感，也是口服維生素K拮抗劑（如華法林）治療的首選監(jiān)測指標(biāo)。此外，PT還可用于彌散性血管內(nèi)凝血的檢測以及檢測肝臟的蛋白質(zhì)合成功能。臨床上PT結(jié)果的報(bào)告方式有：直接報(bào)告PT值（秒）、百分比活性（%）、凝血酶原時(shí)間比值（prothrombin time ratio，PTR）以及國際標(biāo)準(zhǔn)化比值（international normalized ratio，INR）。

APTT臨床上主要用于內(nèi)源性凝血系統(tǒng)功能缺陷的篩查和肝素抗凝治療監(jiān)測。APTT對內(nèi)源性凝血途徑（凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ，前激肽釋放酶和高分子量激肽原）和共同凝血途徑（因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ）的缺陷敏感，常用于臨床監(jiān)測普通肝素抗凝治療效果，還可用于其它病理類型的凝血抑制物的篩查（如狼瘡抗凝物）。

TT臨床上主要用于反映血漿纖維蛋白原含量或結(jié)構(gòu)異常，如低（無）FIB血癥和異常纖維蛋白血癥時(shí)TT延長或縮短，還可用于反映纖溶系統(tǒng)功能，如纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的增高。

FIB 臨床上主要用于彌散性血管內(nèi)凝血、原發(fā)性纖溶癥的輔助診斷以及溶栓療效的監(jiān)測。增高見于糖尿病和糖尿病酸中毒、動(dòng)脈血栓栓塞（急性心肌梗死發(fā)作期）、急性傳染病、結(jié)締組織病、急性腎炎和尿毒癥、放射治療后、燒傷、休克、老年人外科大手術(shù)后、妊娠晚期和妊娠期高血壓病、輕型肝炎、敗血癥和急性感染等。減少見于彌散性血管內(nèi)凝血和原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎和肝硬化等，也見于降纖藥治療和溶血治療。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析資料

申請人應(yīng)考慮產(chǎn)品壽命周期的各個(gè)環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、可能的使用錯(cuò)誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預(yù)見的危害等方面的判定以及對患者風(fēng)險(xiǎn)的估計(jì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析。（參照YY/T 0316《醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》）

2.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗(yàn)報(bào)告

2.1產(chǎn)品技術(shù)要求

應(yīng)符合《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的相關(guān)規(guī)定。申請人可參照已發(fā)布行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)對產(chǎn)品技術(shù)要求中性能指標(biāo)及檢驗(yàn)方法內(nèi)容進(jìn)行編寫，同時(shí)應(yīng)當(dāng)符合適用的強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)。（參照YY/T 1156《凝血酶時(shí)間檢測試劑（盒）》、YY/T 1157《活化部分凝血活酶時(shí)間檢測試劑（盒）》、YY/T 1158《凝血酶原時(shí)間檢測試劑（盒）》、YY/T 1159《纖維蛋白原檢測試劑（盒）》）

2.2產(chǎn)品檢驗(yàn)報(bào)告

應(yīng)提交按產(chǎn)品技術(shù)要求進(jìn)行檢驗(yàn)的檢驗(yàn)報(bào)告，可以是申請人的自檢報(bào)告，也可以是委托有資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的檢驗(yàn)報(bào)告。檢驗(yàn)用產(chǎn)品應(yīng)當(dāng)能夠代表申請注冊產(chǎn)品的安全性和有效性，其生產(chǎn)應(yīng)當(dāng)符合醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范的相關(guān)要求。有適用的國家標(biāo)準(zhǔn)品的，應(yīng)當(dāng)使用國家標(biāo)準(zhǔn)品對產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)。

3.分析性能研究

申請人應(yīng)提交在符合質(zhì)量管理體系的生產(chǎn)環(huán)境下生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行的所有性能評估驗(yàn)證的研究資料，對于每項(xiàng)分析性能的研究都應(yīng)包括研究目的、試驗(yàn)設(shè)計(jì)、研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)方法等詳細(xì)資料。有關(guān)研究背景信息也應(yīng)在資料中有所體現(xiàn)，包括試驗(yàn)地點(diǎn)、適用儀器、試劑規(guī)格、批號(hào)和臨床樣本來源等。分析性能評估的試驗(yàn)方法可以參考相關(guān)國內(nèi)或國外有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的指導(dǎo)原則進(jìn)行。

如申報(bào)產(chǎn)品適用不同的機(jī)型，需要提交在不同機(jī)型上進(jìn)行評估的資料。如申報(bào)產(chǎn)品包含不同的包裝規(guī)格，需要對各包裝規(guī)格進(jìn)行分析或驗(yàn)證。

3.1樣本穩(wěn)定性

樣本穩(wěn)定性研究主要包括室溫、冷藏和冷凍條件下的有效期驗(yàn)證。有關(guān)樣本采集、處理、運(yùn)輸及保存等的詳細(xì)內(nèi)容，申請人可參考WS/T 359《血漿凝固實(shí)驗(yàn)血液標(biāo)本的采集及處理指南》或CLSI H21等相關(guān)文件，合理選擇樣本保存條件并通過試驗(yàn)進(jìn)行分析驗(yàn)證，從而確認(rèn)樣本的效期穩(wěn)定性。

3.2適用的樣本類型

用于分析性能評估用樣本應(yīng)為枸櫞酸鈉抗凝血漿樣本。血漿抗凝劑濃度為105mmol/L～109mmol/L（3.13%～3.2%，通常定為3.2%），與實(shí)際臨床檢測中使用的抗凝劑保持一致，不能使用其他抗凝劑（如草酸鹽、肝素或EDTA等）。樣本類型包括新鮮樣本、冰凍血漿和凍干血漿。評估試驗(yàn)在樣本采集后規(guī)定時(shí)間內(nèi)不能完成時(shí)，推薦使用冰凍或者凍干血漿進(jìn)行評估，其中冰凍血漿又優(yōu)于凍干血漿。如果使用冰凍血漿，應(yīng)保存在-70℃以下，在-20℃保存超過2周即可使某些凝血因子失活，其結(jié)果不能和新鮮血漿比較。

3.3校準(zhǔn)品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值（如適用）

應(yīng)提供詳細(xì)的產(chǎn)品溯源性研究資料，且檢測結(jié)果的量值應(yīng)溯源至現(xiàn)行的國家或國際標(biāo)準(zhǔn)品。對于企業(yè)內(nèi)部參考血漿（制造商工作校準(zhǔn)品）、試劑盒產(chǎn)品校準(zhǔn)品應(yīng)提供詳細(xì)的賦值試驗(yàn)資料和溯源性文件等。如包含PT/INR標(biāo)定血漿，建議參照CLSI H54文件提供詳細(xì)的賦值和驗(yàn)證過程研究資料。質(zhì)控品應(yīng)提供在所有適用機(jī)型上的賦值及其靶值范圍確定的研究資料。

3.4 ISI標(biāo)定（PT適用）

對于PT試劑應(yīng)提供組織凝血活酶（適用于手工法）、組織凝血活酶/儀器特異性的ISI標(biāo)定的詳細(xì)研究資料，ISI應(yīng)通過與WHO凝血活酶國際參考品（international reference preparation，IRP）比較，并按照WHO指南標(biāo)準(zhǔn)測量程序進(jìn)行標(biāo)定。（注：通常，由WHO國際參考品標(biāo)定企業(yè)內(nèi)部參考試劑ISI，再由企業(yè)內(nèi)部參考試劑對每一批次試劑進(jìn)行ISI標(biāo)定）。

3.5準(zhǔn)確度

針對本類產(chǎn)品的準(zhǔn)確度評價(jià)方法主要包括：與國家或國際標(biāo)準(zhǔn)品的相對偏差、方法學(xué)比對等方法，申請人可根據(jù)實(shí)際情況選擇以下方法的一項(xiàng)或幾項(xiàng)進(jìn)行研究。

3.5.1相對偏差

用國家或國際標(biāo)準(zhǔn)品測試，重復(fù)測試多次，計(jì)算均值與標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)示值的相對偏差，所得結(jié)果應(yīng)符合相應(yīng)的接受標(biāo)準(zhǔn)。

3.5.2方法學(xué)比對

采用參考方法或國內(nèi)/國際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類試劑作為比對方法，與擬申報(bào)試劑同時(shí)檢測一批臨床樣本，通過兩者的比對研究和偏倚估計(jì)，進(jìn)行申報(bào)試劑的準(zhǔn)確度評價(jià)。其中，PT、APTT、TT評價(jià)樣本應(yīng)包含正常樣本及不同病理水平異常樣本，F(xiàn)IB樣本的選擇應(yīng)盡可能覆蓋其分析測量范圍并盡量均勻分布。PT試劑應(yīng)對聲稱的每一種可報(bào)告方式進(jìn)行方法學(xué)比對分析。

除進(jìn)行上述方法學(xué)比對外，PT、APTT試劑還需進(jìn)一步進(jìn)行試劑敏感性的評價(jià)，具體如下：

3.5.2.1 PT/INR

PT試劑預(yù)期用于口服抗凝劑的治療監(jiān)測時(shí)，應(yīng)選擇至少40例接受維生素K拮抗劑（如華法林）治療的患者樣本，其中INR2.0～4.5為30例，INR＜2.0為5例，INR＞4.5為5例，與已上市試劑或參考方法相比，位于治療區(qū)間（2.0～4.0）內(nèi)的85%樣本需滿足不超過±0.5INR單位的要求。

3.5.2.2 APTT

用于APTT試劑方法學(xué)比對的樣本包括正常樣本、接受普通肝素治療患者樣本、含狼瘡抗凝物樣本以及凝血因子缺乏的樣本。

APTT試劑預(yù)期用于普通肝素治療的監(jiān)測時(shí)，應(yīng)通過至少20例接受普通肝素治療的患者樣本進(jìn)行評價(jià)，樣本的選擇應(yīng)能覆蓋肝素的治療范圍，并注意避免使用體外模擬添加肝素的樣本。（注：申請人可參照CLSI H47文件推薦的方法建立監(jiān)測普通肝素治療的APTT參考區(qū)間。）

3.6精密度

影響精密度的條件包括：操作者、測量儀器、測量程序、試劑批次（lot）、校準(zhǔn)（校準(zhǔn)品批次，校準(zhǔn)周期）、運(yùn)行（run）、時(shí)間、地點(diǎn)、環(huán)境條件（實(shí)驗(yàn)室溫度、濕度、空氣質(zhì)量、管理等）等。

針對本類產(chǎn)品的精密度評價(jià)主要包括以下要求：

3.6.1根據(jù)各測量條件對檢測結(jié)果影響程度的分析設(shè)計(jì)試驗(yàn)方法，進(jìn)行重復(fù)性、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度、實(shí)驗(yàn)室間精密度、和批間精密度評價(jià)，應(yīng)對每項(xiàng)精密度指標(biāo)的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)的范圍等。一般應(yīng)設(shè)定合理的評價(jià)周期，即在多天內(nèi)進(jìn)行測試，并在評價(jià)過程中考慮納入前述可能影響精密度的不同條件，不必對每個(gè)測量條件進(jìn)行單獨(dú)評估，可在試驗(yàn)設(shè)計(jì)中納入多個(gè)測量條件。

3.6.2精密度的評價(jià)應(yīng)至少選擇2～3個(gè)水平的血漿樣本進(jìn)行，一般來說應(yīng)包含正常血漿、高值異常血漿等，并根據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)定適當(dāng)?shù)木芏纫蟆?/p>

3.6.3 PT試劑應(yīng)對聲稱的每一種可報(bào)告方式進(jìn)行精密度評價(jià)。

3.7定量限（FIB適用）

建議申請人參照國內(nèi)相關(guān)性能評估文件或CLSI EP17文件推薦的定義和設(shè)計(jì)方案，對申報(bào)產(chǎn)品的定量限（LoQ）進(jìn)行合理評估和驗(yàn)證。

3.8干擾物質(zhì)研究

對樣本中常見的內(nèi)源性干擾物質(zhì)進(jìn)行檢測，如甘油三酯、血紅蛋白、膽紅素等，確定可接受的干擾物質(zhì)極限濃度。

外源性干擾物質(zhì)通常包括常用藥物及其代謝物、患者群體使用的藥物及其代謝物等，建議申請人充分考慮已報(bào)道對類似試劑或測量程序存在干擾的物質(zhì)，并根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)選擇潛在的干擾物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證。

干擾物質(zhì)研究的樣本可采用臨床或模擬添加樣本進(jìn)行驗(yàn)證，建議至少包含正常、異常/病理兩個(gè)水平的樣本。

3.9線性區(qū)間（linearity interval）（FIB適用）

線性區(qū)間的研究，需采用高值和低值樣本配制一系列不同濃度的樣本。當(dāng)建立試劑的線性區(qū)間時(shí)，需配制出較預(yù)期線性區(qū)間更寬的至少9個(gè)左右不同濃度的樣本，每個(gè)樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測，根據(jù)可接受線性偏差和各濃度的重復(fù)性，確定檢測次數(shù)。采用重復(fù)檢測均值和預(yù)期值進(jìn)行直線回歸分析，建議采用加權(quán)最小二乘回歸等分析方法，提供散點(diǎn)圖、線性回歸方程、線性相關(guān)系數(shù)（r）及線性偏差，判斷結(jié)果是否滿足可接受標(biāo)準(zhǔn)。

當(dāng)驗(yàn)證試劑的線性區(qū)間時(shí)，需配制覆蓋整個(gè)線性區(qū)間的至少5個(gè)不同濃度的樣本，每個(gè)樣本至少重復(fù)檢測2次。

4.穩(wěn)定性研究

穩(wěn)定性研究主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性（有效期）、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶（在機(jī)）穩(wěn)定性及復(fù)溶穩(wěn)定性（如涉及）等研究，申請人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

5.參考區(qū)間確定資料

應(yīng)提交建立參考區(qū)間所采用樣本來源及詳細(xì)的試驗(yàn)資料。研究樣本來源應(yīng)覆蓋年齡、性別等因素，盡可能考慮樣本來源的多樣性、代表性。應(yīng)明確參考人群的篩選標(biāo)準(zhǔn)（如：未接受過藥物治療，且過去18～24小時(shí)內(nèi)未進(jìn)行過劇烈運(yùn)動(dòng)），研究各組（如性別、年齡等）例數(shù)通常應(yīng)不低于120例。（注：研究例數(shù)不低于120例是為了保證能正確估計(jì)參考限的90%置信區(qū)間。申請人應(yīng)根據(jù)預(yù)設(shè)的置信區(qū)間水平進(jìn)行樣本研究例數(shù)的選擇并符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。）

若引用針對中國人群參考區(qū)間研究的相關(guān)文獻(xiàn)，應(yīng)明確說明出處，并進(jìn)行驗(yàn)證。

樣本應(yīng)采用新鮮樣本（室溫，4小時(shí)內(nèi)）和/或-70℃冷凍血漿，冷凍血漿應(yīng)在37℃水浴中迅速融化，輕輕混勻立即測定。

6.其他資料

6.1主要原材料研究資料（如需提供）

應(yīng)提交主要原材料的來源、篩選研究過程、制備過程、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及檢驗(yàn)資料等。如為申請人自制，應(yīng)提交詳細(xì)制備方法及過程，并應(yīng)保證工藝相對穩(wěn)定;如為外購，應(yīng)注意明確原材料的供應(yīng)商，并應(yīng)提交供應(yīng)商提供的原材料質(zhì)量檢定報(bào)告。

6.1.1組織凝血活酶

組織凝血活酶的常見生物學(xué)來源有重組人組織因子、人胎盤、兔腦、牛腦等。如為外購，應(yīng)詳述其名稱、生物學(xué)來源、供應(yīng)商名稱、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等。

由于不同組織凝血活酶對凝血因子缺乏的敏感性不同。為了使不同敏感性的組織凝血活酶在檢測 PT 中能得到同樣的結(jié)果，需提供組織凝血活酶ISI（適用于手工法）、組織凝血活酶/儀器特異性ISI。

6.1.2磷脂（部分活化凝血活酶）

磷脂的生物學(xué)來源有人、動(dòng)物、植物以及合成磷脂等。如為外購，應(yīng)詳述其名稱、生物學(xué)來源、供應(yīng)商名稱、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等。

需要注意的是，某些凝血活酶和部分活化凝血活酶并不一定與某些儀器相匹配。渾濁的或含微粒的凝血活酶和部分活化凝血活酶可能無法運(yùn)用通過光學(xué)系統(tǒng)測定終點(diǎn)的儀器進(jìn)行檢測。

6.1.3激活劑

激活劑主要類型有硅土、硅藻土、二氧化硅微粒、白陶土、鞣花酸等。如為外購，應(yīng)詳述其名稱、供應(yīng)商名稱、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等。

不同的激活劑對肝素、狼瘡抗凝物及因子Ⅷ、Ⅸ缺乏的敏感性不同，申請人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品預(yù)期用途合理選擇激活劑進(jìn)行評估。

6.1.4凝血酶

凝血酶的常見生物學(xué)來源有重組人凝血酶、人血漿、牛血漿等。如為外購，應(yīng)詳述其名稱、生物學(xué)來源、供應(yīng)商名稱、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等。

6.1.5試劑盒校準(zhǔn)品、質(zhì)控品（如有）

應(yīng)包括原材料選擇、制備、賦值過程及試驗(yàn)資料。校準(zhǔn)品應(yīng)溯源至現(xiàn)行的國家或國際標(biāo)準(zhǔn)品。質(zhì)控品一般包含正常值和異常/病理值兩個(gè)水平，申請人可視申報(bào)產(chǎn)品具體情況合理設(shè)置質(zhì)控品。

如包含PT/INR標(biāo)定血漿（certified plasmas），建議根據(jù)其預(yù)期用途（如：用于臨床實(shí)驗(yàn)室ISI校準(zhǔn)、繪制INR校準(zhǔn)曲線或INR系統(tǒng)驗(yàn)證等），參照CLSI H54文件的方法進(jìn)行原材料的選擇、制備、賦值和驗(yàn)證。

6.2主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

6.2.1主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定方法，如各組分制備的工藝、試劑的配方及關(guān)鍵工藝參數(shù)的確定等。

6.2.2主要反應(yīng)體系的研究資料，包括樣本采集及處理、樣本要求、樣本用量、試劑用量、反應(yīng)條件、校準(zhǔn)方法（如有）、質(zhì)控方法等。

6.2.3不同適用機(jī)型的反應(yīng)條件如果有差異應(yīng)分別闡述。

（四）臨床評價(jià)資料

根據(jù)體外診斷試劑臨床評價(jià)的相關(guān)要求，如申請項(xiàng)目已列入《免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄》，申請人可按照《免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》要求進(jìn)行臨床評價(jià)。

如申請項(xiàng)目未列入《免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄》，或申請人無法按要求開展臨床評價(jià)的，則應(yīng)按照《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求開展臨床試驗(yàn)。下面僅對臨床試驗(yàn)中的特殊問題進(jìn)行闡述。

1.研究方法

選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為參比試劑，采用試驗(yàn)用體外診斷試劑（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行對比試驗(yàn)研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效。應(yīng)充分了解參比試劑的技術(shù)信息，包括適用儀器方法學(xué)（光學(xué)法、磁珠法）、臨床預(yù)期用途、主要性能指標(biāo)、校準(zhǔn)品的溯源情況（如有）、推薦的參考區(qū)間等，以便對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行科學(xué)的分析。

1.1 PT試劑盡量選擇組織凝血活酶生物學(xué)來源一致的，如同為人重組組織因子，或同為兔腦來源等。

1.2 APTT試劑應(yīng)充分考慮激活劑的類型，如鞣花酸、硅藻土等。

2.研究對象

臨床試驗(yàn)應(yīng)選擇產(chǎn)品的預(yù)期適用人群作為研究對象，入組人群應(yīng)能夠代表產(chǎn)品適用人群的各種類型（如：術(shù)前凝血功能檢查、常規(guī)凝血功能評估、先天及后天性凝血因子缺乏等），所有樣本均應(yīng)可以溯源。每個(gè)項(xiàng)目樣本例數(shù)應(yīng)分別滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，其中，PT、APTT、TT應(yīng)包含正常樣本及不同病理水平異常樣本，F(xiàn)IB樣本的選擇應(yīng)盡可能覆蓋其分析測量范圍并盡量均勻分布?？紤]到PT、APTT試劑敏感性的差異，其入組樣本應(yīng)進(jìn)一步滿足如下要求：

2.1 PT/INR

PT試劑預(yù)期用于口服抗凝劑的監(jiān)測時(shí)，應(yīng)選擇至少40例接受維生素K拮抗劑（如華法林）治療的患者樣本進(jìn)行評價(jià)，其中INR2.0～4.5為30例，INR＜2.0為5例，INR＞4.5為5例，通過與已上市試劑或參考方法相比，位于治療區(qū)間（2.0～4.0）內(nèi)的85%樣本需滿足不超過±0.5INR單位的要求。

2.2 APTT

應(yīng)包括正常樣本、接受普通肝素治療患者樣本、含狼瘡抗凝物樣本以及凝血因子缺乏的樣本。

APTT試劑預(yù)期用于普通肝素治療的監(jiān)測時(shí)，應(yīng)通過至少20例接受普通肝素治療的患者樣本進(jìn)行評價(jià)，樣本的選擇應(yīng)能覆蓋肝素的治療范圍，并注意避免使用體外模擬添加肝素的樣本。

3.樣本類型

用于臨床試驗(yàn)的樣本類型應(yīng)為枸櫞酸鈉（3.2%）抗凝血漿樣本。所有樣本均應(yīng)采用新鮮樣本，并按照說明書樣本穩(wěn)定性要求進(jìn)行離心和檢測。如無法避免使用貯存樣本時(shí)，注明貯存條件及時(shí)間，在數(shù)據(jù)分析時(shí)應(yīng)考慮其影響。

4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

4.1應(yīng)根據(jù)數(shù)據(jù)分布特點(diǎn)等因素選擇適用的回歸分析方法，如Deming回歸、Passing-Bablok回歸分析和最小二乘回歸估計(jì)等?；貧w分析應(yīng)重點(diǎn)觀察回歸方程（斜率和截距）、相關(guān)系數(shù)（r）或決定系數(shù)（R2）等指標(biāo)，計(jì)算斜率和截距的95%可信區(qū)間。亦可同時(shí)對相關(guān)評價(jià)指標(biāo)進(jìn)行假設(shè)檢驗(yàn)。

4.2采用Bland-Altman法，通過計(jì)算一致性限度，評價(jià)兩種測量結(jié)果的一致性，一致性限度應(yīng)在臨床認(rèn)可的界值之內(nèi)。

5.接受境外臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)要求

如進(jìn)口產(chǎn)品提交境外臨床試驗(yàn)資料作為臨床評價(jià)資料時(shí)，其境外臨床試驗(yàn)資料需滿足《接受醫(yī)療器械境外臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求。

（五）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿

產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽應(yīng)滿足《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》和《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求。下面對凝血四項(xiàng)檢測試劑說明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行闡述。

1.【預(yù)期用途】

至少包括以下幾部分內(nèi)容：

1.1該產(chǎn)品用于體外定量檢測人血漿樣本中的凝血酶原時(shí)間/活化部分凝血活酶時(shí)間/凝血酶時(shí)間/纖維蛋白原。

1.2簡要說明與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)證及背景情況。說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法。

2.【主要組成成分】

2.1說明試劑盒包含組分的名稱、數(shù)量、比例或濃度信息。生物活性物質(zhì)（如組織凝血活酶、磷脂、凝血酶等），應(yīng)說明其生物學(xué)來源、活性及其他特性;說明不同批號(hào)試劑盒中各組分是否可以互換。

2.2校準(zhǔn)品、質(zhì)控品（如有），應(yīng)明確具體基質(zhì)成分，此外，校準(zhǔn)品應(yīng)明確溯源性，質(zhì)控品應(yīng)注明靶值范圍，如靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨(dú)的靶值單。

2.3試劑盒中不包含但對該項(xiàng)檢測必須的組分，應(yīng)列出相關(guān)試劑的名稱、貨號(hào)及其他相關(guān)信息。

2.4PT試劑需注明批特異性ISI值或者提供查詢方式。

3.【儲(chǔ)存條件及有效期】

詳細(xì)介紹試劑盒的效期穩(wěn)定性、開封/開瓶穩(wěn)定性等信息。注明“生產(chǎn)日期、使用期限或失效日期：見標(biāo)簽”字樣。

4.【樣本要求】重點(diǎn)明確以下內(nèi)容

4.1樣本的類型：明確適用的樣本類型（靜脈血）以及所用的抗凝劑（3.2%的枸櫞酸鈉抗凝，不宜用EDTA-Na2、肝素、草酸鹽等），分離血漿宜除盡血小板（血小板計(jì)數(shù)＜10×10⁹/L）。

4.2樣本的穩(wěn)定性：明確樣本采集后和處理后的保存條件和期限等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否需恢復(fù)至室溫、凍融次數(shù)的要求。

4.3參考WS/T 359《血漿凝固實(shí)驗(yàn)血液標(biāo)本的采集及處理指南》或CLSI H21文件獲得更多標(biāo)本采集與處理的信息。

5.【檢驗(yàn)方法】

應(yīng)詳細(xì)說明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟：（以手工法/半自動(dòng)凝血分析儀為例）

5.1試驗(yàn)準(zhǔn)備：檢測試劑及樣本的復(fù)溫要求及相關(guān)注意事項(xiàng)。

5.2試劑配制方法、注意事項(xiàng)。

5.3試驗(yàn)條件：操作步驟、溫度、時(shí)間等以及試驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng)。

5.4標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（如適用）：詳細(xì)說明校準(zhǔn)品的復(fù)溶方法、稀釋倍數(shù)以及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法。

5.5質(zhì)量控制程序：操作步驟，質(zhì)控結(jié)果的要求（試驗(yàn)有效性的判斷），質(zhì)控結(jié)果不符合要求的處理方式。

5.6試驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算或讀取：需詳細(xì)描述對檢測結(jié)果的判定或計(jì)算方法等。

如適用于全自動(dòng)凝血分析儀，可注明“應(yīng)參照儀器使用說明書操作”，注明校準(zhǔn)周期（如適用）及質(zhì)量控制程序。

6.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

說明可能對試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素。

7.【檢驗(yàn)方法局限性】

綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測方法等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進(jìn)行相關(guān)說明，申請人選擇適用的條款在產(chǎn)品說明書中予以闡述。

7.1本產(chǎn)品檢測結(jié)果僅供臨床參考，不應(yīng)作為臨床診治的唯一依據(jù)，應(yīng)結(jié)合患者性別、年齡、病史及其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)等信息綜合考慮。當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析查找原因并重新確認(rèn)等。

7.2其他可能存在的問題 。

8.【注意事項(xiàng)】建議包括以下內(nèi)容：

8.1僅用于體外診斷。

8.2標(biāo)本有可見的溶血時(shí)不應(yīng)采用，因?yàn)榭赡芗せ钅蜃?，干擾最終測定。

8.3使用光學(xué)原理的儀器時(shí)，需注意標(biāo)本中存在黃疸、脂血或影響光散射強(qiáng)度的干擾物質(zhì)時(shí)，可能對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。

8.4血細(xì)胞比容值≥0.55L/L（55%）時(shí)，需調(diào)整血液與抗凝劑的比例。

8.5有關(guān)人源組分（如有）的警告，如：試劑內(nèi)質(zhì)控品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過了HBsAg、HIV1/2-Ab、HCV-Ab和TP等項(xiàng)目的檢測，但截至目前，沒有任何一項(xiàng)檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

（六）質(zhì)量管理體系文件

主要包括綜述、生產(chǎn)制造信息、質(zhì)量管理體系程序、管理職責(zé)程序、資源管理程序、產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)程序、質(zhì)量管理體系的測量、分析和改進(jìn)程序、其他質(zhì)量體系程序信息以及質(zhì)量管理體系核查文件等。

三、參考文獻(xiàn)

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四、編寫單位

浙江省醫(yī)療器械審評中心。